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缺血性脑血管疾病中凋亡基因研究新进展 　　摘要：最近有研究发现在缺血半影区或者梗死区域许多神经元在脑缺血几天或几小时后出现凋亡并非坏死，神经元可在缺血后一段时间后具有复原的潜能[2]。本文就脑缺血后细胞凋亡基因如Bcl-2家族，Par-4，P53，Caspase，Fas，AIF和IECs细胞凋亡的调控机制进行一简要综述。 　　关键词：缺血性脑血管疾病；凋亡相关基因 　　脑缺血，即脑部供血不足，导致脑组织功能障碍及死亡，其分为局限性和全脑性。脑缺血可以导致低代谢率，能量供应不足，可诱发视觉，肢体动作和语言障碍，进一步可导致心脏呼吸停止，脑组织不可逆损伤[1]。在脑缺血性中风发生的几分钟内，受到最剧烈的血流量减少影响的脑组织中心会遭受致命创伤随后立即坏死。包围坏死中心区域的是受血流减少影响较小的组织，其功能表现静息，但仍保持代谢活跃，其边界区域就构成了缺血半影区。 　　脑缺血可以通过不同的途径诱导神经元凋亡，包括内源途径(如Bcl-2家族，P53，Caspase等基因)和外源途径（如Fas）。下文将介绍脑缺血中不同细胞凋亡基因（如Bcl-2家族，Par-4，P53，Caspase，Fas，AIF和IECs）的最新研究，探讨其相关的凋亡机制。 　　1 Bcl-2家族基因 　　 B细胞淋巴瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）家族蛋白根据其促进或者抑制凋亡的反应以及它们所占有的Bcl-2同源区域（BH）分为三个类：一类为抗凋亡蛋白，包括Bcl-2，Bcl-xL，Bcl-w，Mcl-1和A1/Bfl-1等；一类为促凋亡蛋白，包括Bax，Bak和Bok/Mtd。此两类均由1-4个Bcl-2同源区域(Bcl-2 homoIogydo-main，BH)构成，BH1-BH4均具有α螺旋结构。另外一类则是BH3-only蛋白（如Bid，Bim/Bod， Bad， Bmf， Bik/Nbk， Blk， Noxa， Puma/Bbc3， Hrk/DP5），其仅占有BH3结构域[3]。Bcl-2能改变线粒体的理化性质从而抑制细胞凋亡，如通过调节线粒体膜对一些凋亡蛋白前体的通透性。在全脑缺血再灌注后海马CA1区及CA3区中发现，Bcl-2过度表达能减弱Fas和TNFR1蛋白在全脑缺血再灌注后的表达，明显减少凋亡细胞数[4]。一部分的BH3-only蛋白如Bid、Bad可通过激活Caspase-9或者Apaf-1（凋亡酶激活因子1）诱导细胞凋亡。Bax能允许一些离子和小分子如细胞色素C等穿过线粒体膜，进入细胞质，从而引起细胞凋亡。PUMA蛋白也可以通过诱导细胞色素C的释放以及Caspase的激活从而诱导凋亡[5]。然而，抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-w能与Bak形成异源二聚体，随后中和Bak促凋亡的作用，从而抑制细胞凋亡。通过免疫组化以及免疫电镜，研究发现在脑缺氧缺血新生小鼠模型上，Bcl-2易位到细胞核内并在其中蓄积。他们同时也发现在体内缺氧缺血后以及在体外培养的人神经母细胞瘤细胞（IMR-32）中载体的挑战后，Bcl-2总体水平下降，蛋白酶抑制剂CX295可阻止其在体内外的下降，证明了Bcl-2的减少依赖于蛋白酶。在缺血后的大鼠的同侧纹状体内发现，Bcl-2可提高钙紧张素水平，同时抑制骨形态发生蛋白4的表达，提示着Bcl-2通过下调BMP-4的表达的提升缺血诱导纹状体神经发生的分子调控机制。在脑缺血中Bcl-2家族基因在神经元凋亡的促进和抑制都起着举足轻重的作用。 　　2 Par-4基因 　　前列腺凋亡反应素-4 (Prostate apoptosis response-4 ，Par-4)，是一种促凋亡基因，Par-4蛋白是凋亡细胞对外界刺激反应而产生的一种亮氨酸拉链结构域蛋白。由于Par-4对PKA 有高度选择性，所以其能够诱导含高水平PKA的癌细胞凋亡,而对正常细胞不起作用。El-Guendy 发现了Par-4的效应结构域SAC(aa137-195)具有入核、激活Caspase、抑NF-κB活性以及诱导凋亡的能力。Par-4可以激活Fas/FasL-FADD-Caspase8凋亡途径，还可以降低ζPKC酶的活性，增强WT1（Wilms瘤抑癌基因）的抑制活性，隔绝TOP1（拓扑异构酶1），从而减低NF-κB活性，诱导细胞凋亡。近来发现在小鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型中，比较Par-4缺陷型和野生型小鼠体内脑静脉，血脑屏障，脑水肿中白细胞和血小板的凝集和粘附的情况。结果显示Par-4缺乏可部分通过抑制血小板活化和微血管炎症的衰减，从而保护脑缺血/再灌注带来的损伤。Par-4在脑缺血对于神经元凋亡调控存在多样性的特点。 　　3 P53基因 　　P53基因是在DNA病毒SV40转染的哺乳动物细胞中发现的一种与 SV40大T抗原结