广西民族药黑草化学成分及质量控制的研究.pdfVIP

正 文 第一部分 黑草有效成分的提取、分离和化合物结构鉴定 1实验材料、仪器和试剂 1．1实验材料 实验所用的黑草采集于广西荔浦。样品经广西中医药研究所卢文杰 cruciata Hamit)的干燥 教授鉴定为玄参科鬼羽箭属植物黑草(Buchnera 全草。木犀草素对照品(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用， 批号：111520．200201)。 1．2仪器 ． 1100型高 IRPrestinge．21红外分光光度计(日本岛津公司)；Agilent 效液相色谱仪(美国安捷伦公司)；XS．205Du电子分析天平(瑞士梅特 勒公司)；KQ．250DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)； Millipore Micro 度计(日本岛津公司)；Quattro 微机熔点仪(上海精密科学仪器有限公司)；层析柱：各种不同规格口径 的普通玻璃柱。 核磁共振谱由广西师范大学分析测试中心测定。部分质谱图(EI源) 由中科院昆明植物研究所测定，其余图谱均在广西玉林食品药品检验所 测定。 1．3试剂 95％乙醇：分析纯，广东光华化学厂有限公司，批号石 乙酸乙酯：分析纯，上海申博化工有限公司，批号：0507101；水为实验 用纯化水和超纯水，柱层析用硅胶(100～200目)：青岛海洋化工厂生产。 2黑草有效部位的提取和分离 2．1黑草有效部位的提取和分离流程图 黑草药材粉碎粗粉 上95％乙醇回流提取6次 95％乙醇液 l减压回收乙醇 裤浸膏 用水混悬依次用 石油醚、乙酸乙酯萃 取 石浏醚部位 乙酸乙 上硅胶柱层析 岳撅 III 晶岳万习i雨HCSIII辱丙■瓦面矾HCY 2．2黑草有效部位的提取 黑草药材粉碎，取粗粉2．6kg，用95％乙醇回流提取6次，每次1800ml， 合并提取液，减压回收乙醇，得浸膏250．129。加适量水混悬，依次用石 油醚，乙酸乙酯萃取。回收石油醚部位的溶剂得76．449浸膏，回收乙酸 乙酯部位的溶剂得57．209浸膏。(石油醚部位的得率为2．94％，乙酸乙酯 部位的得率为2．20％)。 2．3黑草有效成分的分离 一 2．3．1乙酸乙酯部位的分离及结晶的纯化 取乙酸乙酯部位浸膏与硅胶按(1：1．5)比例拌匀后，湿法装柱，湿 法上样，依次用乙酸乙酯．石油醚(比例从1：1_+O：1)梯度洗脱，收集 172个流份，每份500ml，利用薄层色谱检查，合并含有相同斑点的流份 析出物。合并13～19流份析出物，得到淡黄色粉末，再上硅胶柱，用乙 酸乙酯．石油醚(40：60)洗脱，这样反复柱层析得到晶HCYI。合并 23～36流份析出物，得到淡黄色粉末，再上硅胶柱，用乙酸乙酯．石油醚 (35：65)洗脱，这样反复柱层析得到晶HCYII。合并91～121流份析 出物，得到白色结晶，反复用甲醇重结晶，得到晶HCYIII。 6 2．3．2石油醚部位成分的分离及结晶的纯化 取石油醚部位浸膏与硅胶按(1：1．5)比例拌匀后，湿法装柱，