酶解对翡翠贻贝中砷形态含量影响-effect of enzymatic hydrolysis on arsenic speciation in perna viridis.docxVIP

中英文缩略缩写英文名称中文名称As(III)Arsenite亚砷酸As(V)Arsenate砷酸MMAMonomethylarsonicacid一甲基砷酸DMADimethylarsinicacid二甲基砷酸AsBArsenobetaine砷甜菜碱AsCArsenocholine砷胆碱AsSArsenosugar砷糖AsLArsenolipids砷脂DMAEDimethylarsinoylethanol二甲基砷氧化乙醇TMAPTrimethylarsoniopropiona三甲基丙内酯HPLCHighPerformanceLiquidChromatography高效液相色谱ICP-MSInductivelyCoupledPlasmaMassSpectrometry电感耦合等离子体质谱ESI-MSElectrosprayIonizationMassSpectrometry电喷雾电离质谱DHDegreeofHydrolysis水解度TTrypsin碱性蛋白酶AAlcalase胰蛋白酶目录摘要IAbstractII中英文缩略III目录IV1绪论11.1元素形态分析概况11.2砷形态分析21.2.1自然界中的砷21.2.2砷的实际应用及其对环境的影响61.2.3砷化合物的稳定性81.2.4砷化合物的毒理学安全性评价91.2.5食品中砷形态分析的研究进展131.2.6海产品中砷元素的形态分析151.3酶解在样品前处理中的应用161.4翡翠贻贝研究概况161.5研究的主要内容181.6研究的目的和意义182翡翠贻贝的酶解处理192.1实验仪器及试剂192.2实验方法202.2.1样品预处理212.2.2样品脱脂212.2.3样品组分测定212.2.4翡翠贻贝酶解条件的确定212.2.5水解度（DH）的测定212.2.6蛋白浓度的测定222.3结果讨论与分析222.3.1样品组分分析222.3.2水解度结果讨论232.4小结273翡翠贻贝中的砷形态分析283.1实验仪器及试剂283.2实验方法293.2.1总砷的测定293.2.2翡翠贻贝中砷化合物的提取293.2.3高效液相色谱及电感耦合等离子体质谱条件303.3结果分析与讨论313.3.1翡翠贻贝中的总砷含量313.3.2高效液相色谱条件的优化313.3.3电感耦合等离子体质谱仪器参数设定323.3.4方法学参数考察323.3.5酶解样品中砷形态的测定353.4小结384未知砷化合物质谱分析394.1实验仪器及试剂394.2实验方法394.3结果分析与讨论404.3.1液相分离片段的一级质谱图与二级质谱图404.3.2未知砷化合物的推测414.3.3未知砷化合物的分析414.4小结425.结论与展望435.1结论435.2创新点445.3研究工作的不足445.4未来展望44参考文献45在学期间发表论文50附录Ⅰ51附录Ⅱ52附录Ⅲ54致谢561绪论1.1元素形态分析概况最初，人们对元素化学形态（chemicalspecies）的认知为“某一元素在真实试样中可能存在的特定状态或结构[1]。我们可以将其理解为，某种特定元素或其化合物的不同化学形式。这一宽泛的定义使得给出形态分析一个明确的定义颇有难度，因此在很长一段时间内，关于形态分析的具体定义众所纷纭。为了结束这种混乱的状态，给出一个简单、明确的标准术语，国际纯粹和应用化学联合会（IUPAC）最终正式给出了形态分析的明确定义，即为“形态分析指某一待测物的原子和分子状态获得证实的过程”[2]。事实上早在上世纪六十年代末期，关于形态分析的研究已逐渐开始发展，直到现在仍在爆炸性的增长当中。究其原因，一方面是由于社会的高速发展，人们对科学的认识也愈加深入。自然界中存在着许多种微量与痕量元素，在生命体的新陈代谢中发挥着不可或缺的作用。在长期的实践工作中，人们逐渐意识到简单的将元素分划分为有益元素(如Na，K，Mg，Ca,Mo，Mn，Fe，Co，Cu，Zn，B，Se，I等)、有毒元素(如Pb，Hg，As，Cd，Al，Be等)以及有待确认的元素(如V，Ni等稀土)这三种类型的分类方式，或许并不能完全反应这些元素与生命体的关系。有时一些有益元素含量过高同样会对人体造成危害，反而有些食品中有毒元素的总含量而高，却不会使人中毒[4]。这些元素的毒理作用、有益作用及生物迁移性很大程度上取决于其在试样中存在的化学形式。元素及其化合物的的不同化学形态、不同的结构都有可能影响到其稳定性、毒性、流动性及其他相关属性。所以，仅仅对元素总量的测定已经不能满足科学工作者的科研需求[5]。这也是形态分析应运而生的必要条件。另一方面，科学技术的进步日新月异，现代分析检测仪器和方法都有突破性的进展。色谱、质谱等快速、精密、准确、高效的分离检测手段，为形态分析的大批量研究提供了便利的