双歧杆菌介导hsv-tkgcv治疗大鼠膀胱癌分子机制研究-study on molecular mechanism of bifidobacterium mediated hsv - tk gcv in treating bladder cancer in rats.docxVIP

重庆医 重庆医科大学博士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 BI 英文全称 Bifidobacterium infantis 中文全称 婴儿双歧杆菌 bp Base pair 碱基对 Caspase Cysteinyl aspartate specific proteinase 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋 白水解酶 CCK-8 Cell Counting kit-8 细胞增殖与毒性检测试剂 盒 ddH2O DMSO Double distilled water dimethyl sulphoxide 双蒸水 二甲基亚砜 DNA Deoxyribonucleoside acid 脱氧核糖核酸 EP eppendorf 微量离心管 GCV Ganciclovir 更昔洛韦 HE Hematoxylin and eosin 苏木素伊红染色 H2O2 Hydrogen peroxide 过氧化氢 HSV Herpes simplex virus 单纯疱疹病毒 iTRAQ Isobaric tags for relative and absolute quantitation 同位素标记的相对和绝对 定量技术 kD Kilo-Dalton 千道尔顿 MNU Methylnitrosourea N－甲基亚硝基脲 ng nanogram 纳克 OD Optical density 光密度 PAGE polyacrylamide gel electrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 pH power of hydlogen 酸碱值 1 PRX PMSF Peroxiredoxin Phenylmethanesulfonyl fluoride 过氧化物酶 苯甲基磺酰氟 qPCR Realtime quantitative PCR 实时定量 PCR rpm revolution per min 每分钟转速 SDS soculium dodecylsulfate 十二烷基硫酸钠 shRNA short hairpin RNA 短发夹样 RNA siRNA Srx1 TAE TE TEMED TK Tris small interfering RNA Sulfiredoxin1 Tris acetate buffer Tris Tris- EDTA N,N,N,N-Tetramethylethylenediami Thymidine kinase trishydroxymethylaminomethane 小干扰 RNA 硫过氧化物还原因子 1 乙酸电泳缓冲液 TE 缓冲液 ne N,N,N,N-四甲基乙二胺 胸苷激酶 三羟甲基氨基甲烷 2 双歧杆菌介导 HSV-tk/GCV 治疗大鼠膀胱癌 分子机制研究 摘 要 膀胱癌（bladder cancer）是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤，同时 也是全身十大常见肿瘤之一，严重威胁着人类健康。手术是治疗膀胱 癌的主要手段，同时并辅以放化疗以及生物治疗，但复发率高，总体 生存率仍不理想。因而，在最新的分子生物学研究成果基础上，进一 步研发有效的膀胱癌治疗方法，具有重大的理论和现实意义。当前， 基因治疗仍旧占据着肿瘤研究的前沿阵地，其中自杀基因疗法是近年 来肿瘤基因治疗研究的主力军，单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (herpes simplex virus thymidine kinase, HSV- TK) /丙氧鸟苷 (ganciclovir, GCV) 作为目前研究最早最彻底并且最有效的自杀基因系统之一，在肿瘤基 因治疗中扮演着不可或缺的角色。就肿瘤基因治疗的载体系统而言， 目前主要有病毒载体和非病毒载体（脂质体等），病毒载体本身有很多 局限性，如病毒滴度低、宿主范围有限、插入宿主基因组可能引起突 变及病毒本身缺乏安全性等缺点，脂质体等非病毒载体，普遍存在基 因转染效率低、缺乏肿瘤特异靶向性等缺点，而双歧杆菌作为一种具 有良好肿瘤靶向定植性的厌氧细菌很好的克服以往肿瘤基因治疗中缺 乏肿瘤组织靶向性、安全性和转导效率低等“瓶颈”。 前期实验中，我们采用双歧杆菌介导的 HSV-TK/GCV 治疗荷瘤大 鼠膀胱癌，发现膀胱肿瘤体积缩小、重量减轻，肿瘤细胞凋亡明显增 3 加。本课题拟在前期研究基础上，对双歧杆菌介导的 HSV-TK/GCV 治 疗荷瘤大鼠膀胱癌组织进行比较蛋白质组学研究，寻求该治疗系统的 作用靶标，并剖析靶标的功能，探索用双歧杆菌介导 HSV-TK/GCV 治 疗荷瘤大鼠膀胱癌的分子机制。本论文分为二个部分。 第一部分