酶学理论基础课件.ppt

第二讲 酶学理论基础 ;第二章 酶学理论基础;第二章 酶学理论基础;1、酶的分类、组成和结构特点;★已知酶历年增长统计图;1.1.1、酶的分类命名原则;一、蛋白类酶的系统名、惯用名; 1961年国际酶学委员会（Enzyme Committee，EC）根据酶所催化反应类型和机理分为6类：;EC. X.X.X.X;（1）氧化还原酶类;（2）转移酶类;（3）水解酶类;（4）裂合酶类;（5）异构酶类;（6）连接酶类;二、核酸类酶;★核酸类酶的分类;1.2、酶的组成和结构特点;★辅助因子;★其它重要概念;1.2.2、酶的空间结构;1、维持酶蛋白分子构象作用力;2、具有酶活性的蛋白质都是球蛋白，结构特征如下：;3、酶的活性中心 ;;★氨基酸残基的分类;(1)接触残基 ;(2)辅助残基 ;(3)结构残基 ;(4)非贡献残基 ;★各种氨基酸残基的作用;2、酶的催化作用;2.1、酶催化作用特点;2.1.1、高效性 ;2.1.2、专一性;2.1.3、可调控性;2.2、酶催化作用机制;2.2.2、中间复合物学说;2.2.3、酶的作用专一性机制;★“琐和钥匙”学说;★“诱导契合”学说; 2.2.4、酶高效催化的机制 ;(1)?趋近与定向效应;(2)构象变化效应 ;(3)酸碱催化机制 ;;(4)共价催化机制 ;1.亲核催化 ;1）亲核取代反应 ;★反应1：;★反应2：;2）亲核加成反应 ;2.亲电催化;(5)微环境效应 ;3、酶促反应动力学;3.1 底物浓度对反应速度的影响;底物浓度对酶促反应速度的影响;;; 当底物浓度高达一定程度，反应速度不再增加，达最大速度，反应为零级反应，说明酶已经被底物所饱和。;1.米氏方程;推导过程;k1 ([Et]－[ES]) [S]＝k2 [ES] + k3 [ES];★当底物浓度很高，将酶的活性中心全部饱和时，即[Et]＝[ES]，反应达最大速度 Vmax＝K3[ES]＝K3[Et] (4);当反应速度为最大反应速度一半时,;2）Km与Vmax的意义;思考题;3）Ｋm值与Ｖmax值的测定;酶动力学的双倒数图线;2）Eadie—Hofstee作图法;;3.2 酶浓度的影响 ;3.3? 温度的影响;1）酶催化反应速度在最适温度达到最大，超过最适温度，反应速度逐步降低，一般酶在60℃以上会变性失活； 2）不同来源的酶，其最适温度不同； 3）添加酶作用底物或者某些稳定剂，可以适当提高酶的热稳定性。;3.4 pH值的影响;几点说明：;4）pH对不同酶的活性影响不同，大多数酶在不同pH条件下???得的酶活力对pH的变化作图可得到-钟罩形的曲线.;3.5 抑制剂的影响 ;抑制剂的分类;（1）非专一性不可逆抑制剂;;（2）专一性不可逆抑制剂;A、结合型不可逆抑制剂(Ks型);B、催化型不可逆抑制(Kcat型);对高血压具有较好疗效的药物迫降灵是一种β-γ-丙炔基叔胺类衍生物，实质上是线粒体单胺氧化酶的自杀性底物。由于线粒体单胺氧化酶是一种黄素酶类，以核黄素腺苷二核苷酸(FAD)为辅基。 线粒体单胺氧化酶催化迫降灵进行氧化反应，其产物可以将FAD中的核黄素还原，并与酶活性中心的基团发生共价结合作用，致使酶的活性受到不可逆的抑制作用。;2.?可逆性抑制;（1） 竞争性抑制剂;例如，丙二酸是琥珀酸的结构类似物，它们可以竞争琥珀酸脱氢酶分子上的结合位点，而琥珀酸脱氢酶只能催化琥珀酸脱氢，所以丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。;+;竞争性抑制的特点;竞争性抑制剂与磺胺类药物;蝶呤 对氨基苯甲酸 Glu;E+S;非竞争性抑制的特点;E+S;反竞争性抑制的特点;讨论：添加底物浓度能否解除抑制作用？;3.6 激活剂的影响;几点说明：;有的酶也可以作为激活剂，通过激活剂的作用使酶分子的催化活性提高或者使酶的催化活性显示出来;4 ?酶活力的测定;酶活力单位;酶的比活力;转换数（Kcat）;4.2、酶活力测定的方法;★酶活力测定的一般步骤:;讨论：终止酶反应的方法有哪些？;作业?;★磷酸化酶a与磷酸化酶b互变过程;★天冬氨酸转氨甲酰酶（ATCase）（aspartate transcarbamylase）;★ E.coli中Thr、Met、Lys合成AK