砷染毒对大鼠红细胞的影响及n-acys干预分析-effect of arsenic exposure on erythrocytes in rats and analysis of n - acys intervention.docxVIP

摘要目的：研究低剂量亚砷酸钠对大鼠红细胞的影响，探讨N-乙酰-L-半胱氨酸（N-AcetylCysteine，N-ACys）对其的干预作用，进一步评价砷对红细胞的毒性，为慢性砷中毒机制和防治研究、更好发挥砷剂的治疗作用以及减少毒副作用提供重要的科学依据。方法：选择30只SD大鼠，随机分为三组，每组10只，即对照组（给予普通洁净自来水），染毒组（自由饮用含360μg/L砷水），N-乙酰-L-半胱氨酸（Cysteine，Cys）干预组（饮用含360μg/L砷水，隔天灌胃Cys20mg/kg体重）。每周称量一次大鼠体重，染毒4周后将其处死。计算各器官脏器系数；SDS凝胶电泳分离并分析红细胞膜蛋白；MEK-6318K全自动血细胞分析仪测定红细胞参数；血液流变测试仪测定血流变，流式细胞仪红细胞衰亡率；扫描电镜观察红细形态变化；结果采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果：1.随着时间的延长，SD大鼠体重均有增加，其中Cys干预组大鼠体重增幅最大，但组间差异没有统计学意义（P0.05）；各器官脏器系数与红细胞参数组间差异亦无统计学意义（P0.05）。2.血流变测定指标中，与对照组相比，染毒组全血低切表观粘度、红细胞聚集指数、全血低切还原粘度和全血高切还原粘度明显增高（P0.05）；Cys干预组与染毒组相比，全血低切表观粘度、红细胞聚集指数、全血低切还原粘度和全血高切还原粘度明显下降（P0.05）；全血高切表观粘度和血浆粘度组间无统计学意义（P0.05）。.采用SDS分离获得红细胞膜α-血影蛋白（Spectrin-α）、β-血影蛋白（Spectrin-β）、锚蛋白（Ankyrin）、带3蛋白（Band3）、带4.2蛋白（Band4.2）和肌动蛋白（Actin），共6种蛋白。染毒组红细胞膜带3蛋白含量显著高于对照组（P0.05），锚蛋含量明显低于对照组（P0.05）；Cys干预组与染毒组相比，红细胞膜带3蛋白含量降低（P0.05），锚蛋白含量增高（P0.05）；α-血影蛋白、β-血影蛋白、带4.2蛋白和肌动蛋白各组间均无统计学意义（P0.05）。.与对照组相比，染毒组红细胞衰亡率明显增加（P0.05）；Cys干预组与染毒组相比，干预组红细胞衰亡率显著下降（P0.05）。5.红细胞形态电镜观察结果显示：对照组红细胞形态正常，为双凹圆盘形，表面光滑规整、细胞大小均匀；染毒组红细胞边缘不规整，细胞出现刺状或棘状突起；干预组红细胞形态基本恢复正常。结论：低剂量亚砷酸钠对大鼠红细胞参数没有明显影响，但可造成红细胞聚集和血粘度增加进而引起血液流变学改变；低剂量亚砷酸钠可致大鼠红细胞膜蛋白表达异常，表现为带3蛋白增高，锚蛋白减少；低剂量亚砷酸钠可引起大鼠红细胞形态学改变和衰亡；Cys对亚砷酸钠所致红细胞毒性具有一定的干预作用。关键词：亚砷酸钠，红细胞，红细胞膜蛋白，N-乙酰-L-半胱氨酸TheinterventioneffectsofCysteineonerythrocyteinducedbysodiumarseniteinratAbstractObjective:TostudythechangeofparametersoferythrocyteinducedbylowdosesodiumarseniteandanalysetheinterventioneffectofCysteineonerythrocyte.Toevaluatethearsenitetoxicityoferythrocyteandtoprovidethescientificbasisformakinguseofthearsenite’stherapeuticaleffectandreducingthesideeffectofarsenite.Method:30femaleSprague-Dawleyrats(180g-200g)wererandomlydividedinto3groups,eachgroupinvolved10rats.Controlgroupdrunkbyordinarycleantapwater;360μg/LAstreatmentgroupweredrunkby360μg/Lsodiumarsenite;Inteventiongroupweredrunkby360μg/LsodiumarseniteandlavagedwithCysteineqd.TheSDratswereweighedeveryweeks.After4weeks,allanimalswerekilled.CalculatedtheorgancoefficientandseparatedtheproteinsoferythrocytemembranebySDS.Theparametersofre