山奈酚对血吸虫肝纤维化小鼠il-13,collagen1,tgf-beta1,mmp-2的mrna表达影响-effect of kaempferol on mrna expression of il - 13, collagen 1, tgf - beta 1, mmp - 2 in mice with schistosome liver fibrosis.docxVIP

目 录 摘 要 … … … … … … … … … … … … … … … … 1 Abstract………………………………………………………3 1 背景 1.1 血吸 虫肝纤维 化……… …………… …………… …… .5 1.2 目前 治疗现状……… …………… …………… ……… .5 1.3 山奈 酚……… …………… …………… …………… … .5 2 实验材料与方法 2.1 实 验 材料… …… … … …… … … …… … … …… … …… 6 2.2 实验装置………………………………………………… 6 2.3 实验方法………………………………………………… 6 3 实验结果………………………………………………12 4 讨论…………………………………………………… 16 5 结论……………………………………………………17 参考文 献………… …………………… ………………… …18 附录 1…… ……… ……… ……… ……… ……… ……… …20 附录 2 … … … … … … … … … … … … … … … … … … 2 1 6 综述……… …………… …………… …………… ……24 致 谢 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 35 华中 科技 大 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE PAGE 10 山 奈 酚 对 血 吸 虫 肝 纤 维 化 小 鼠 IL -13,C ollagen1 ， TGF -beta1 ,MMP -2 的 mRN A 表 达 影 响 摘要 目的：探讨山奈酚治疗血吸虫肝纤维化的疗效以及可能的作用机制。 方法：36 只健康健康雄性 balb/c 小鼠喂养一周后随机分为 6 组：阴性对照 组，阳性对照组，山奈酚不同浓度干预组（5，15,15,20mg/kg）。每组 6 只。使 用日本血吸虫尾蚴感染除阴性对照组的小鼠 4 周后给予吡喹酮 500mg/kg*天灌 胃，2 天处理，然后连续 4 周山奈酚不同浓度灌胃干预，阴性对照组和阳性对照 组给予等体积生理盐水灌胃。感染后第 59 天断颈处死小鼠，取肝组织切片做 MASSON 染 色 ， 实 时 定 量 逆 转 录 聚 合 酶 链 式 反 应 （ realtime reverse transcription polymerase chain reaction ， RT-PCR ） 法 检 测 肝 组 织 内 TGF-beta1，IL-13，COL1 和 MMP-2 的 mRNA 表达。 结果：MASSON 染色测量阳性区域光密度显示阳性对照组与阴性对照组相比胶 原表达明显升高(P＜0.05)，5-20mg/kg 山奈酚干预组分别与阳性对照组相比胶 原表达明显降低(P＜0.05)；实时定量 RT-PCR 测定显示阳性对照与阴性对照组相 比 IL-13 的 mRNA 表达明显升高(P＜0.05)，15-20mg/kg 山奈酚干预组分别与阳 性对照组相比 IL-13 的 mRNA 表达明显降低(P＜0.05)；阳性对照组与其他各组相 比 TGF-beta1 的 mRNA 表达无明显变化(P＞0.05)；阳性对照与阴性对照组相比 COL1 的 mRNA 表达明显升高(P＜0.05)，20mg/kg 山奈酚干预组与阳性对照组相比 COL1 的 mRNA 表达明显下降(P＜0.05)，阳性对照组与阴性对照组相比 MMP-2 的 mRNA 表达无显著差异(P＞0.05)，5-20mg/kg 山奈酚组分别与阳性对照组相比 MMP-2 的 mRNA 表达有明显升高 (P＜0.05)。 结论：山奈酚有抗纤维化疗效。山奈酚可能通过下调 IL-13 和 COL1 的 mRNA 表达，抑制胶原合成，以及上调 MMP-2 的 mRNA 表达促进胶原分解，从而发挥治 疗血吸虫肝纤维的作用。而 TGF-beta1 在血吸虫肝纤维化中无明显变化。山奈酚 可能成为将来针对 IL-13 通路和 MMP-2 靶点的抗纤维化药物。 关键词: 血吸虫病，肝纤维化，山奈酚，白介素-13,1 型胶原, 转化生长因 子 beta1, 基质金属蛋白酶-2. Abstract Objective: Exploring the effectiveness and mechanism of kaempferol in the treatment of schistosomia egg induced hepatic fibrosis. Experimental method: 36 healthy