Ki―67在甘肃回族患者原发肝细胞性肝癌中表达及临床意义.docVIP

Ki―67在甘肃回族患者原发肝细胞性肝癌中表达及临床意义 　　[摘要] 目的 探讨ki-67在甘肃回族原发性肝细胞性肝癌（PHC）中的表达情况及其与汉族患者之间的差异。方法 回顾性分析10年间兰州大学第二医院原发性肝癌术后的汉族、回族患者的临床资料各100例，采用免疫组化法检测汉族、回族患者石蜡标本肝癌组织及癌旁组织中的ki-67表达情况。结果 回族患者 ki-67指数为（246.9±101.3），汉族患者ki-67指数为（198.3±103.7），ki-67蛋白在回族PHC患者表达明显高于汉族患者（P0.05）。 结论 ki-67蛋白在甘肃回、汉族患者之间的表达存在差异，值得进一步深入研究及探讨。 　　[关键词] ki-67；原发性肝细胞肝癌；回族；免疫组化；甘肃 　　[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）05（a）-0122-02 　　原发性肝细胞肝癌（Primary Hepatocellular Carcinoma，PHC）是世界上常见的恶性肿瘤，它具有生长速度快，恶性程度高等特点，发病率在恶性肿瘤中位居世界第5位，死亡率位居第3位[1]。据研究[2]表明，近15年来甘肃地区肝癌死亡率明显上升。ki-67蛋白，它是一种抗核增殖细胞核蛋白单克隆抗体，也是测定细胞群增长分数的极好指标[3]。国内有报道ki-67蛋白在汉族人群PHC患者中的表达阳性率58.8%[4]，因此，该研究2002―2012年间检测了ki-67蛋白在甘肃回族PHC患者的表达情况及特点，探讨回族与汉族PHC患者之间的ki-67蛋白表达的差异。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　回顾性分析在兰州大学第二医院手术切除的回族、汉族PHC患者的石蜡标本各100例，复习其HE切片，证实其可用。分别选取癌组织及癌旁组织的石蜡标本，石蜡标本由病理科提供，所有患者临床资料完整。 　　1.2 临床资料 　　回族100例患者，其中男62例，女38例，平均年龄（50.13±8.32）岁。肿瘤病理分化程度，高分化 32例，中分化 37例，低分化 31例； 发病因素：乙型肝炎68例，丙型肝炎21例，其他11例。汉族100例患者，其中男性59例，女性41例，平均年龄（50.33±8.41）岁。肿瘤病理分化程度，高分化 31例，中分化 36例，低分化33例； 发病因素：乙型肝炎65例，丙型肝炎23例，其他12例。 　　1.3 实验试剂 　　鼠抗人ki-67单克隆抗体浓缩型，SP试剂盒及DAB显色试剂盒。 　　1.4 实验方法 　　采用免疫组化SP法，将石蜡标本作4 μm厚连续切片，放于经APES试剂防脱片处理的载玻片上。对染色切片在高压锅中进行抗原热修复，持续2 min，PBS冲洗5 min×3次。滴加一抗鼠抗人ki-67单克隆抗体（1∶50稀释），PBS再次冲洗5 min×3次。滴加二抗及辣根酶标记链霉卵白素工作液，PBS冲洗5 min×3次。用DAB工作液充分显色，苏木素溶液复染，医用酒精脱水，二甲苯透明后封片。已知阳性片作阳性对照，PBS替代一抗作阴性对照。 　　1.5 结果判定 　　ki-67蛋白表达位于细胞核，阳性细胞的细胞核染色为棕黄色。在高倍镜（×400）下随机选取5个视野，每个视野最少计数200个肿瘤细胞，共计最少1 000个肿瘤细胞，计算其阳性细胞总数数即为ki-67标记指数，ki-67指数 10记为阳性表达，10记为阴性表达。 　　1.6 统计方法 　　所有数据采用SPSS17.0统计软件分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，率的比较应用χ2检验。 　　2 结果 　　2.1 ki-67免疫组化结果 　　ki-67蛋白表达于回族、汉族PHC患者肝癌细胞的细胞核（见图1、图2、图3）。 　　2.2 ki-67表达在回族PHC患者肝癌组织、癌旁组织之间的差异 　　回族患者肝癌组织 ki-67指数为（246.9±101.3），癌旁组织ki-67指数为（17.3±10.8），t值22.21， ki-67蛋白在回族PHC患者肝癌组织表达明显高于癌旁组织（P0.05）。 　　2.3 ki-67表达在回族、汉族PHC患者之间的差异 　　回族患者 ki-67指数为（246.9±101.3），汉族患者ki-67指数为（198.3±103.7），t值31.07，ki-67蛋白在回族PHC患者表达明显高于汉族患者（P0.05）。 　　3 讨论 　　ki-67蛋白，又称细胞增殖相关蛋白，它存在于细胞周期中的G1、G2、S期及M期，G0期不表达，是评价肿瘤增殖的指标之一。目前，国内研究[5-6]发现，ki-67作为一种肿瘤增殖因子，它的表达与多种恶性肿瘤有关，如胃癌、