不同NO3―N NH4N配比对紫花苜蓿盛花期生长及结瘤固氮影响.docVIP

不同NO3―N NH4+N配比对紫花苜蓿盛花期生长及结瘤固氮的影响 　　摘要：在完全营养液条件下，采用砂培法，研究了NO3-N与NH4+N两种氮素形态的7种配比（氮素水平210 mg/L）对紫花苜蓿盛花期生长及结瘤固氮的影响。结果表明：各形态配比下紫花苜蓿的株高、生物量、根瘤数、根瘤重及固氮酶活性均随NO3-N/NH4+N增大呈先增大后减小的趋势；且NO3-N/NH4+N比例为5/3时，紫花苜蓿的株高、生物量、根瘤数、根瘤重及固氮酶活性均取得最大值，而地上部和地下部全氮含量则在5/5时最高。综合分析，当氮素水平在210 mg/L时，5/3处理下紫花苜蓿生长较好，自身固氮能力较强。 　　关键词：紫花苜蓿；NO3-N/NH4+N；生长；结瘤固氮 　　中图分类号：S 144.5文献标识码：A文章编号2015 　　氮素既可以被作物以阴离子NO3-N形式吸收，也可以被作物以阳离子NH4+N形式吸收＼[1＼]，且这两种形态是植物吸收利用的两种主要氮源形式＼[2＼]。铵态氮可直接被植物利用合成氨基酸，而植物吸收的硝态氮则必须经过还原形成铵态氮后才能被利用＼[3＼]。从生物能学的角度来看，铵态氮在同化前不需要被还原，应该是植物优先利用的氮源＼[4＼]。因此，对于大多作物而言，植株在NO3-N营养下生长良好。研究表明，NO3-N可以促进植物根系的长度生长以及表面积和密度的增加＼[5＼]，NH4+N可以促进紫花苜蓿生物量积累和结瘤固氮＼[6＼]。裴文梅等＼[7＼]用营养液培养甘草的研究表明，硝态氮与铵态氮等量配合施用时，甘草根的产量、整株合成的药用成分均最高。与单一的NO3-N或NH4+N比，NO3-N和NH4+N以适度比例混合施用可以更好的促进绝大多数旱作作物生长。 　　有关氮素形态配比对植物的影响报道很多，而在最适氮素浓度下NO3-N/NH4+N对紫花苜蓿影响尚未见报道。为了进一步研究氮素形态不同配比对‘甘农3号’紫花苜蓿盛花期生长及结瘤固氮的影响，采用砂培法，在一定氮素水平下（210 mg/L），研究不同的配比对‘甘农3号’紫花苜蓿盛花期生长及结瘤固氮的影响，以期为紫花苜蓿合理的氮素供应提供理论依据和数据支撑。 　　1材料和方法 　　1.1供试材料 　　供试品种‘甘农3号’紫花苜蓿（Medicago sativa cv.Gannong No.3），供试菌株为中华根瘤菌（12531），来源苜蓿根瘤和诱变菌株，均由甘肃农业大学草业学院提供。 　　1.2试验方法 　　1.2.1粗砂处理 　　将粗砂经自来水冲洗多次，直到冲洗用水不再浑浊为止，再用蒸馏水冲2～3次。121 ℃灭菌，150 ℃烘干后，备用。 　　1.2.2种子处理 　　选取大小均匀，颗粒饱满的紫花苜蓿种子，95%乙醇浸泡5 min，0.1% HgCl2溶液灭菌3 min，无菌水冲洗5～6次，最后用无菌滤纸吸干，备用＼[8＼]。 　　1.2.3根瘤菌培养 　　将中华根瘤菌（12531）采用平板划线培养，挑起单个菌落，将其接入YMA液体培养基＼[9＼]。在28 ℃下120 r/min的恒温摇床上培养至菌液的光密度值（D600nm）≥1.0时，再在10 000 r/min下离心10 min，除去上清液用无菌水洗下根瘤菌体并配制成吸光值为0.6的菌悬液，备用。 　　1.2.4营养液配置 　　（1）Fahraeus无氮植物营养液：Na2HPO4?12H2O 0.15 g，MgSO4?7H2O 0.12 g，柠檬酸铁0.005 g，CaCl2?2H2O 0.1 g，KH2PO4 0.1 g，Gibson微量元素1 mL，H2O 1 000 mL，pH 6.5～7.0。 　　（2）Gibson微量元素液：H3BO3 2.86 g，ZnSO4?7H2O 0.22 g ，CuSO4?5H2O 0.08 g，MnSO4?4H2O 2.03 g ，Na2MoO4?2H2O 1.26 g，H2O 1 000 mL＼[10＼]。 　　1.3试验设计 　　选用直径16 cm、高20 cm 的花盆，装入经自来水冲洗再用蒸馏水清洗并经过高温灭菌的粗砂10 kg。每盆播种100粒灭菌种子，播种14 d后进行间苗，每盆定苗50株，然后浇入营养液，置于塑料防雨棚内。根据前期试验结果＼[11，12＼]设氮素水平为210 mg/L（以纯氮计），设NO3-N、NH4+N两种氮素形态7种配比，NH4+N/NO3-N分别为12.5/87.5；25/75；37.5/62.5；50/50；62.5/37.5；75/25；87.5/12.5，即：1/7、1/3、3/5、5/5、5/3、3/1、7/1，共7个处理，每处理重复10次，完全随机排列。以Fahraeu