二至丸对更年期综合征模型大鼠实验研究.docVIP

二至丸对更年期综合征模型大鼠的实验研究 　　【摘 要】 目的：研究二至丸对更年期模型大鼠的影响。方法：将SPF级雌性SD大鼠60只随机分成假手术对照组、模型对照组、更年欣胶囊组（4mg/kg）、二至丸高（600mg/kg）、中（300mg/kg）、低（150mg/kg）剂量组，各组灌胃给予相应的药物连续30d。除假手术对照组外，给药30d后对其余5组大鼠通过手术将0.2ml无水乙醇注射到卵巢内1次，建立更年期综合征模型大鼠。观察大鼠给药前后体质量的变化，测定血清中雌二醇（E2）、促卵泡成熟激素（FSH）、黄体生成素（LH）、催乳素（PRL）水平，计算子宫系数和阴道上皮细胞角化率，以及测定下丘脑5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量。结果：与假手术对照组比较，模型对照组大鼠的体质量缓慢降低，肛温升高（P0.05），FSH、LH和PRL水平明显升高（P0.05） ，E2水平明显减少（P0.01）；阴道上皮细胞角化率和子宫系数明显下降（P0.01）；降低下丘脑5-HIAA/5-HT （P0.05），增加NE/DA （P0.05）；与模型对照组相比较，二至丸各剂量组大鼠体质量增长较模型组快，肛温下降（P0.05）；FSH、LH水平明显降低（P0.01）；PRL水平明显降低（P0.05） ，E2水平明显升高（P0.05）；阴道上皮细胞角化率明显提高（P0.01）；子宫系数增加（P0.05）；增加下丘脑5-HIAA/5-HT （P0.05），减少NE/DA （P0.05）。结论：二至丸能既可以改善性激素，又可以增加更年期综合征模型大鼠下丘脑单胺类神经递质含量，从而达到缓解更年期症状的作用。 　　【关键词】 二至丸；绝经综合征；神经递质；性激素； 　　【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）06-0034-04 　　更年期综合征多因妇女在围绝经前后因卵巢功能逐渐衰退以致雌激素水平下降，引起以植物神经功能紊乱代谢障碍为主的一系列症候群[1]。更年期综合征见于中医古籍的“脏躁”、“郁证”、“崩漏”、“月经不调”等病证中，现代中医将其命名为“绝经前后诸症”[2]。该病表现为五心烦热、烘热汗出、四肢麻木、时冷时热等阴阳失调的症状[2]。西医学一般认为卵巢功能的衰退是引起更年期各种症状的主要原因，应用雌激素替代疗法治疗妇女更年期综合征，虽能缓解部分症状，但是毒副作用较大[2]。二至丸出自清代江昂《医方集解》，具有补腰膝，壮筋骨，益肾阴的功效[4]，临床常用于更年期相关疾病的治疗[5]。本实验采用手术方式制备更年期综合征大鼠模型，观察二至丸对模型大鼠生殖内分泌和神经递质的调节，为临床应用提供实验依据。 　　1 仪器与材料 　　1.1 材料 二至丸（批号：990910，苏州雷允上制药厂）；雌二醇（E2）、黄体生成激素（LH）、促卵泡激素（FSH）、催乳素（PRL）放免试剂盒（批号：116408，美国Beckman公司）；5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）标准品（美国Sigma公司）；更年欣胶囊（批号：120702，通化方大药业股份有限公司）。 　　1.2 实验动物 SD雌性大鼠，SPF级，体质量220～250g，动物正常饲养5d后用于以下实验，由郑州大学实验动物中心提供。动物合格证号：SCXK（豫）2010-0002。 　　1.3 仪器 ACCESS型全自动化学发光免疫分析仪（美国BECKMAN COULTER公司）；AE-200型电子分析天平（美国METTLER公司）；2695型高效液相色谱仪（美国Waters公司）。 　　2 方法 　　2.1 造模[6]雌性大鼠用10%水合氯醛（35mg/kg），腹腔麻醉，腹位固定然后取最末肋骨下、腋中线和距脊柱外侧约2cm交叉处，剪除长毛，常规皮肤消毒，切开皮趺和背肌约1.5～2.0cm，在切口视野中白色发亮的脂肪团中找出卵巢，轻轻夹住脂肪团拉出切口外，模型组用0.5ml的注射器将0.2ml无水乙醇注射到卵巢内，假手术组仅作注射针刺动作而无任何液体，然后顺势将卵巢送回腹腔中，缝合创面，皮肤消毒，腹腔注射青霉素20万单位，连续3d，以防手术感染。 　　2.2 分组与给药 取雌性大鼠60只，随机分成假手术组及造模组，假手术组10只，造模组50只。适应性饲养3d后，将造模组大鼠按体质量分5组，分别为模型对照组，更年欣胶囊组（4mg/kg），二至丸高（600mg/kg）、中（300mg/kg）、低（150mg/kg）剂量组。各组连续灌胃给予相应的药物30d，每天一次。 　　2.3 观察与检测方法 　　2.3.1 一般观察 观察雌性