TGF—β合并同种异体肌腱重建兔前交叉韧带的实验研究.pdfVIP

郑州大学2007届毕业生论文 如今ACL重建术后多采用积极的康复计划，即早期负重和肌肉锻炼。这对于 重建的固定强度和愈合速度提出了较高的要求。如不能满足坚强的固定和骨肌腱 界面良好的愈合，手术将失败或者延缓运动康复的时间和强度，而后者不可避免 会因起关节功能的减退和活动度的丧失。因此，目前重建ACE的各种移植物选择 都有它自身的优缺点。 转化生长因子B(TGF—B)是近些年来关注较多的促进软组织愈合的生长 因子，是一个25J(D的二聚体蛋白，有Bl、B2、133三个同分异构体，分别与 三种不同细胞受体(RI、RII、RIII)结合，发挥作用。正常肌腱细胞和腱鞘细胞 能产生TGF—目，在肌腱损伤环境中随着mRNA上调而激活，其在内源性肌腱细胞 和外源性腱鞘细胞及炎性细胞上调支持肌腱修复的双重机制。TGF—B1、B2、 B3都可以使肌腱中最主要的I型、III型胶原明显增加。已经有研究显示TGF 一8能够促进自体移植的移植物在骨隧道内生长，能否促进在体异体肌腱移植物 的生长尚未见报道。 深低温冷冻能抑制移植物的酶活性和分子运动，且--70℃-80℃时冰晶形成 非常缓慢，有利于组织长期地保存而不使组织结构发生破坏。同时，深低温冷冻 能中和细胞的免疫抗原，降低细胞的免疫原性，还能有效地抑制细菌的生长与繁 殖，故目前深低温冷冻(深低温冰箱一70℃--80℃，液氮-196℃)是韧带和肌腱保 存最可行的方法。 目前，关于其在骨隧道内的愈合过程和重建后组织演变国内外研究较少。相 关于肌腱骨隧道界面愈合愈合的研究更少，而且大多是自体肌腱移植物的研究。 对于同种异体肌腱移植物的生长过程报道更少。本文通过建立关节外悬吊固定前 交叉韧带模型，使用深低温冷冻肌腱复合TGF一9重建。观察同种异体肌腱在骨 隧道中的生长过程，以及免疫排斥情况，和细胞因子对愈合的影响，并探讨其机 制。为临床重建和术后康复提供理论依据。并对移植后的早期愈合提供新的思路。 2 郑州大学200／届毕业生论文 正文 材料与方法 1实验材料与仪器设备 1．1试验动物新西兰大白兔36只，雌雄不限。体重2．2～2．6kg，平均20月 龄。郑州大学试验动物中心提供。 司提供)。 1．3四号慕丝线(美国强生公司)． 1．4手摇钻(新牌上海医用设备公司)。 1．5关节手术主要用品兔台，无菌巾。无菌纱布，血管钳，巾钳，持针器， 组织剪，线剪，注射器，针，2．O毫米钻头，刀，刀柄，麻醉及消毒用品。 1．6取材用品刀，刀柄等。 1．7固定染色用品10％中性福尔马林固定液，EDTA脱钙液，砸染色液等。 1．8主要仪器设备Mod 型电热恒温培养箱(沪通电热设备厂)，BH．2型光学显微镜1台，光学显微镜照 相系统(日本奥林帕斯)等。 1,9万能生物力学试验机(ASG．100KNG日本岛津公司) 2实验动物选取和分组 新西兰大白兔36只，体重2．2～2．6kg，平均20月龄。单独喂养并检疫三 天。术前检查双后膝抽屉试验，Lachman试验确定前交叉韧带无损伤。 随机分为三组，每组12只动物24个后膝关节。一组作为自体肌腱移植对照 组(c)，行自体伸趾长肌腱重建前交叉韧带。第二、三组均取伸趾长肌腱，然后 分组别行二步深低温冷冻保存一周，然后重建ACL。第三组肌腱复温后作为移 植物重建第二组动物ACL，作为实验对照组(T)。第二组肌腱复温后与生长因 子TGFB结合后重建第三组动物ACL，作为实验组(E)。 3 郑州大学2007届毕业生论文 3试验方法 3．1模型建立 实验动物术前6小时禁饮食。术前称重。动物仰卧位，门齿及四肢固定， 经兔耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠溶液(按照30mg／kg配制)，待兔安静入睡后， 用剪刀给术膝各皮。常规消毒铺无菌孔巾，选小腿后外侧切口，长约8厘米，依 次切开皮肤、皮下。钝性分离，暴露伸趾肌腱，取尽可能长肌腱，约8厘米长， 取横截面积较大部分修剪成长约4cm移植物，备用。冲洗并逐层缝合伤口。选择 膝旁外侧切口，长5．Ocm，上起自髌上2cm，下至胫骨结节。分别切开皮肤、皮 下组织、深筋膜及关节囊，进入关节腔，髌骨外脱位，显露关节内结构。锐性离 断