5-HTT、5-HTR_2c1A_基因联合作用与重性抑郁症的关联性研究.pdfVIP

山西医辩大学硬士学位论文 引物：由上海生工生物工程技术服务有限公司合成 dNTPs(25mmo帅：购于上海生工生物工程技术服务有限公司 TaqDNA聚合酶：购于BBI公司 TaKaRaLA TaqTM(GcBuffer)：购于宝生物(大连)有限公司 模板DNA、石蜡油 1．3．3凝胶电泳所用试剂 DNA Ladder购于MBI公司 DNA分子量参照物：GeneRulerTMl00bp 溴化乙啶(10mg／m1)．-购于AMRESCO公司 Tfis·CI 10×TBE(1000ml配方)：1089 559硼酸 40ml0．5MEDTA(PH8．O) 琼脂糖、丙烯酰胺、N，N’-甲叉双丙烯酰胺、过硫酸铵、硝酸银：均购于上海生工生 物工程技术服务有限公司 1．4主要仪器设备： SANYO ．80℃超低温医用冰箱 MDF．382-E(日本) 普通冰箱 青岛海尔 微量加样枪 Cfilson(法国) BECKMAN 台式低温高速离心机 GS．15R(美国) 落地式低温高速离心机 KUBOTA6900(日本) 紫外凝胶图像分析系统 GDS7500(德国) 微波炉 格兰仕WP800T(中国) 电子分析天平 JA2003(上海精科天平) DY89-I型电动玻璃匀浆机 中国宁波 DYY-12型电脑三恒多用电泳仪 北京市六一仪器厂 37℃恒温箱 上海跃进医疗器械厂 LDZX-40BI立式自动电热压力蒸汽灭菌器 上海申安医疗器械厂 Millipak-40型制冰机 Millipore，法国 ABIPRISM 3700型DNA测序仪PerkinElmer，美国 2．方法 2．1研究对象的筛选及一般资料的收集 由经过严格培训具有丰富临床经验的精神科医师进行，应用DIGS做为筛查工具，严格 按照入组和排除标准选择病例。一般人口学资料包括性别、年龄、教育水平、职业等项目。 2．2抑郁严重程度的评定 抑郁严重程度采用HAMD7项)来进行评定。 0 4 山西医科大学磺士学位论土 HAMD：由经过训练的评定人员对被评定者进行检查，计算HAMD总分。 2．3基因组DNA的提取 抽取空腹静脉血5ml，无EDTA抗凝，弃血清，血凝块匀浆、高渗溶血后，常规酚／ 氯仿抽提基因组DNA，具体操作步骤如下： (1)5mt血凝块中加5ml溶血试剂，放入10ml匀浆管中匀浆。 10rain。 (2)用25ml溶血试剂洗至50ml离心管，4℃10000