原发性干燥综合征患者体内维生素D3水平与其免疫功能相关性研究.docVIP

原发性干燥综合征患者体内维生素D3水平与其免疫功能相关性研究 　　【摘要】目的 探讨原发性干燥综合征（pSS）患者体内维生素D3水平与其免疫功能的相关性。方法 36例pSS患者（pSS组）依据SS疾病活动度评分系统（SSDAI）积分对患者进行筛查， 活动期（SSDAI积分≥5分）与稳定期（SSDAI积分5分）各18例， 38例健康体检者作为对照组， 分别采集外周血， 将单个核细胞实施分离， 另对CD27+记忆性B细胞及CD27high浆细胞所占比重进行检测；采集血清且对白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及1， 25-二羟基维生素D3[1， 25（OH）2D3]的含量进行检测。结果 pSS组血清中1， 25（OH）2D3含量低于对照组， 差异有统计学意义（P0.05）；pSS活动期患者血清中1， 25（OH）2D3含量低于稳定期患者， 差异有统计学意义（P0.05）。pSS组血清当中CD27+记忆性B细胞含量及外周血CD27high浆细胞含量低于对照组， 差异有统计学意义（t=2.11、15.14， P0.05）。pSS组血清中TNF-α、IL-17及IL-6含量高于对照组， IL-10含量低于对照组， 差异有统计学意义（t=20.40、13.36、14.57、15.21， P0.05）。pSS活?悠诨颊哐?清当中的CD27+记忆性B细胞含量及外周血CD27high浆细胞含量均低于稳定期患者， 差异有统计学意义（P0.05）。活动期患者血清中TNF-α、IL-17及IL-6含量均高于稳定期患者， IL-10含量低于稳定期患者， 差异有统计学意义（P0.05）。CD27+记忆性B细胞、IL-10、CD27high细胞含量与1， 25（OH）2D3含量呈现明显正相关（P0.05）；1， 25（OH）2D3含量与TNF-α、IL-17及IL-6呈现显著负相关。结论 维生素D3水平异常降低， 不仅相关于pSS发病， 而且与免疫功能之间存在紧密关联。 　　【关键词】 原发性干燥综合征；维生素D3；免疫功能 　　维生素D3作为一种具有脂溶性的维生素， 利用体内代谢作用可形成1， 25（OH）2D3， 此物质带有明显生物学活性， 除了能够参与到钙磷代谢调节之外， 在调节免疫功能方面同样有所参与[1-3]。本文分析了pSS患者体内维生素D3水平， 另对其与免疫功能之间所存在的相关性开展深入研究。现报告如下。 　　1 资料与方法 　　1. 1 一般资料 选取2014年6月～2016年6月在本院治疗的36例pSS患者为pSS组， 选取患者均与pSS相关诊断标准相符， 排除结核病、艾滋病、病毒性肝炎等传染病史， 另将抗乙酞胆碱使用史、头面部接受过放疗及肝肾肺功能不全者予以排除[4]。pSS组患者依据SSDAI积分对患者进行筛查， 活动期（SSDAI积分≥5分）与稳定期（SSDAI积分0.05）， 具有可比性。见表1。 　　1. 2 方法 本研究选用Amresco公司产的淋巴细胞分离液；另选取Sigma公司生产的CD27、CD19抗体；TSZ公司生产的酶联免疫吸附试剂盒；选用Thermo公司生产的流式细胞仪。于清晨空腹下， 对三组的外周静脉血进行采集， 抗凝血操作， 将淋巴细胞分离液加入， 且实施离心操作， 获取单个核细胞。运用聚丁二酸丁二醇酯（PBS）对外周血单个核细胞（PBMC）实施重悬后， 将其分类后分别装在提前准备好的流式细胞管中， 于4℃下加入各种有荧光标记的抗体， 然后于避光环境中实施孵育， 时间控制在30 min， PBS洗涤， 并实施离心操作（2遍）， 最后加入固定液200 μl， 混匀后运用流式细胞仪检测CD27+记忆性B细胞比重， 另对CD27high曲浆细胞所占比重进行检测。 　　1. 3 血清标本采集与指标检测 于空腹状态下， 先进行外周静脉血相应采集， 对其实施离心操作， 从中获取优质血清；检测时运用IL-17、IL-6、TNF-α及1， 25（OH）2D3酶联免疫吸附试剂盒， 就其在血清中的含量进行检测， 全部操作均依据试剂盒说明书完成。 　　1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差 （ x-±s）表示， 采用t检验；相关性检验采用Pearson相关性分析；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P0.05表示差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 血清1， 25（OH）2D3含量比较 pSS组血清中1， 25（OH）2D3含量低于对照组， 差异有统计学意义（P0.05）；pSS活动期患者血清中1， 25（OH）2D3含量低于稳定期患者， 差异有统计学意义