唾液蛋白质组学在口腔疾病诊断中研究进展.docVIP

唾液蛋白质组学在口腔疾病诊断中研究进展 　　【摘要】近年蛋白质组技术的发展为利用唾液寻找疾病标志物提供了更稳健的平台。本文就唾液蛋白质组分析技术研究口腔鳞状细胞癌、原发性舍格伦综合征、牙周病等疾病标志物现况和当前存在的问题作一综述。 　　【关键词】蛋白质组技术；唾液诊断；标志物；口腔鳞状细胞癌；原发性舍格伦综合征 　　【中图分类号】Q51 　　【文献标志码】A 　　随着蛋白质组学技术的发展，唾液已经逐渐成为一种安全、灵敏、准确诊治疾病的体液，目前用唾液蛋白质组学进行诊断的口腔疾病主要集中于口腔鳞状细胞癌（oral　squamous　cell　carcino-ma，OSCC）、原发性舍格伦综合征（primary　Sjog-ren’s　syndrome，pSS）、牙周病等疾病。 　　本文主要综述唾液蛋白组学在诊断上述3种口腔疾病的研究进展，并就目前唾液蛋白组学在临床普以及使用存在的问题及应用前景作一简单介绍。 　　1　蛋白质组学分析技术 　　1.1蛋白质组学的作用 　　蛋白质组是指在特定条件下由一个生物体或者细胞产生的所有蛋白质，无论是它在质或量上的改变都反映了处于活动中细胞的状况变化。蛋白质几乎参与所生物功能，所以对生物体或细胞进行蛋白质组学分析可获得较为全面的信息。蛋白质组学可以对蛋白质进行大规模和系统的分析。 　　1.2蛋白质组学分析方法 　　蛋白质组学分析方法由蛋白质分离技术、鉴定技术和生物信息学有机整合而成。最基本的蛋白质组分离技术是双向凝胶电泳（two-dimensionalgel　electrophoresis，2-DE），常用的还有液相柱色谱分离技术（liquid　chromatography，LC）、毛细管电泳和在2-DE基础上改进而来的双向荧光差异凝胶电泳（two　dimensional　fluorescence　differencegel　electrophoresis，2D-D1GE）。蛋白质鉴定技术主要是生物质谱（mass　spectrometry，MS）技术。按照样品分子离子化方式不同，主要可分为基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱（matrix-assistedlaser　desorption／ionization　time　of　flight　mass　spec-trometry，MALDI-TOF-MS）和电喷雾离子化质谱（electrospray　ionization　mass　spectrometry，ESI-MS）。常用的还有与蛋白质芯片技术结合的表面增强激光解吸／电离飞行时间质谱（surface　enhancelaser　desorption／ionization　time　of　flight　mass　spec-trometry，SELDI-TOF-MS）。目前，蛋白质组生物信息学主要是从大规模的质谱数据中发现和提取重要的生物学信息。 　　1.3蛋白质组学分析样本 　　蛋白质组学分析样本主要来源于组织细胞或体液，样本的收集方法与其来源相关，常用的诊断体液有血液、唾液、脑脊液、尿液等。 　　2　唾液在蛋白质组学分析中的优势 　　唾液作为诊断体液越来越受到青睐，主要是因为唾液取样为非侵入式、简单易行、安全，而且含有许多有助于疾病早期诊断的蛋白质。全面分析和鉴定唾液蛋白质是发现疾病标志物的重要一步，而近年快速发展的蛋白质组学分析技术为唾液诊断疾病奠定了技术基础。唾液作为诊断体液相对于血液来说，在诊断时效、样品分析和应用普及上都有自身独特的优势。 　　2.1提高诊断时效性 　　从诊断时效性来看，血液存在于封闭的循环系统，细胞通过不同器官时，可能会使在循环系统停留数天甚至数月的蛋白质发生改变。而唾液则可频繁监测身体状况的实时变化。 　　2.2降低分析难度 　　从分析难易角度来看，唾液蛋白质含量只有0.5～2.0g?L-1，以往因为含量低难以检测成为它作为诊断体液的障碍，但这个问题已经随蛋白质组分析技术的发展而得到改善。血液成分复杂，首先要决定诊断标本是血清还是血浆。血清蛋白质浓度达60～80g?L-1，蛋白质成分复杂，容易引起非特异性干扰。而且在蛋白质处理分析前要去除载体蛋白，如白蛋白，载体蛋白和许多小分子蛋白形成复合物，而小分子蛋白和多肽被认为是疾病标志物的主要来源。血凝块形成可去除因疾病而改变的蛋白质，持续的酶活动可能清除许多信号通路相关蛋白。血浆做诊断标本时要选择肝素做抗凝剂，但它半衰期很短，只有3～4h，同样容易导致血凝块形成。除此，血液各种物质的半衰期和浓度范围相差也很大。 　　2.3普及性好 　　从普及角度看，近年出现的家庭便携式唾液诊断装置，能够使患者能够在家里监测自己身体状况。而血液标本则需训练有素的医护人员才能采集。 　　3　唾液蛋白质