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套袋对红将军苹果果皮结构影响 　　摘要：采用透射电镜技术，研究了套袋和不套袋红将军苹果果实果皮结构的差异。结果表明，套袋果实果皮角质膜变薄，光滑均匀度好，没有明显的“V”形凹陷，表皮细胞形状近圆形；不套袋果角质膜变厚，光滑均匀度差，有较深的“V”形凹陷，表皮细胞形状不规则。另外，套袋后果实的表皮细胞壁变厚，改变了表皮细胞的排列方式，减少了表皮细胞层数，降低了机械组织的厚度及层数。套袋对红将军果皮结构产生了显著的影响，果皮结构的变化与贮藏性相关。 　　关键词：红将军苹果；套袋：果皮结构 　　中图分类号：S661.101 　　文献标识号：A 　　文章编号：1001-4942(2010)10-0058-04 　　 　　红将军苹果是早熟富士的浓红型芽变，1995年山东省果树研究所从日本引入。该品种果实色泽艳丽，果实高桩，成熟期比红富士提前30天左右，在市场上具有较强的竞争力。苹果生长期套袋改变了果实周围的微域环境，形成了遮光、保湿、保温的微环境。苹果果皮受气候因子的影响会在结构上发生变化。本研究通过对套袋和不套袋红将军苹果果实解剖结构的观察，了解套袋对果皮结构的影响，为套袋苹果的贮藏提供理论依据。 　　 　　1、材料与方法 　　 　　供试品种取自沂源县鲁村镇果园。株行距3m×4m，15年生，管理水平较高。2008年5月25日在3棵树上选大小、方向及着生部位等基本一致的果实套袋，每树套30个果实，以不套袋为对照，单株小区，重复3次。8月23日摘袋，9月11日采收并运回实验室。 　　分别取套袋果和对照果10个，将果皮切成1mm2的小片，用2.5％戊二醛固定，磷酸缓冲液清洗，再用1％锇酸固定，酒精脱水，环丙烷渗透，环氧树脂包埋，超薄切片用醋酸双氧铀和醋酸铅染色后，用JEM-100CXⅡ型透射电镜观察、照相。 　　 　　2、结果与分析 　　 　　2.1　果皮角质膜厚度、表皮细胞壁厚度、细胞排列方式的变化 　　套袋和不套袋红将军苹果果皮解剖结构有明显的差异。套袋果实蜡质层没有孔洞，不套袋果实蜡质层有空洞。套袋果实角质膜平均厚度13.95μm(图版1)，不套袋果实角质膜平均厚度18.87μm(图版2)。不套袋的果皮角质膜个别区域有较深的“V”形凹陷(图版11)，直达表皮细胞下。其表皮细胞椭圆形，排列不紧密，个别地方有缺口。套袋果实的角质膜较平滑，没有明显的凹陷(图版12)。套袋果表皮细胞比不套袋果变大(图版3、4)。套袋果表皮细胞大小比较均匀，排列比较紧密、规则，不套袋果实表皮细胞大小不均匀，排列疏松。 　　套袋使红将军苹果果实表皮细胞的细胞壁变厚。套袋果实表皮细胞壁上壁平均厚度为1.49μm(图版5)，不套袋果表皮细胞壁上壁平均厚度为0.885μm(图版4)。套袋和对照果实表皮细胞侧壁厚度也有差异，套袋果实果皮的表皮细胞侧壁厚0.71txm(图版5)，不套袋为0.27μm(图版4)。 　　半薄定位观察，套袋后果皮的表皮细胞层数减少，不套袋果的果皮表皮细胞层数为2层，在部分区域可以达到3层(图版11)，套双层纸袋的果皮表皮细胞只有1-2层(图版12)。表皮细胞下为数层机械组织细胞，套袋和对照果实的果皮机械组织厚度、细胞层数、细胞大小和排列方式存在差异。不套袋果实的机械组织细胞层数为5层，套袋果实的机械组织细胞层数减少为3层(图版11、12)。套袋后，果实的机械组织变薄，机械组织细胞层数减少。说明果实所处的微域环境对果皮机械组织发育水平有显著的影响。 　　2.2　果皮表层细胞叶绿体、液泡的变化 　　不套袋红将军苹果果皮表皮细胞的第2层细胞中观察到叶绿体，叶绿体结构完整，叶绿体的片层结构发达，呈椭圆球状，可观察到淀粉粒，并有黑色嗜锇颗粒存在，但无脂滴(图版6、7)。套袋果实表皮细胞中没有观察到叶绿体。分析原因可能是，未套袋果一直生长在正常光照条件下，皮层细胞可进行一定的光合作用，其叶绿体片层结构发达，并有嗜锇颗粒存在，脂滴则相对较少。 　　透射电镜观察结果表明，套袋果的表皮细胞个体较大，液泡也较大，占据了细胞80％以上的体积(图版8)，但是对照液泡较小，占据细胞体积的1/2以下(图版3、4)。套袋和对照果实表皮细胞质体中均有丰富的脂滴(图版3、4；图版9、5)。脂滴通常作为细胞内的脂类仓库，丰富的油脂可能对于表皮细胞外角质层和蜡质层形成有积极意义。 　　套袋果和对照均观察到表皮细胞的液泡染色加深，有絮状凝结(图版8)，有染色较深的物质(图版10)。前人研究表明，花青苷在细胞中合成后储存在液泡内，果表皮细胞液泡内的絮状凝结可能是花青苷大量积累所致。表皮细胞中液泡染色的显著变化可能与花青苷合成并大量积累有关，此观察结果与前人研究吻合。Lancaster等(1994)的研究表明，积累花青苷的细胞只有少数几层，