姜黄素对胰腺癌细胞PANC―1体外侵袭转移影响.docVIP

姜黄素对胰腺癌细胞PANC―1体外侵袭转移影响 　　[摘 要] 目的：探讨姜黄素对胰腺癌PANC-1细胞侵袭转移的影响。方法：以10μmol/mL、 20μmol/mL、30μmol/mL和60 μmol/mL姜黄素处理胰腺癌PANC-1细胞，MTT 法检测其对PANC-1细胞的生长和抑制作用。应用Transwell小室进行人工重组基底膜（Matrigel）侵袭和运动实验，观察姜黄素对PANC-1细胞侵袭和转移的影响。结果：应用姜黄素处理后胰腺癌细胞生长受到抑制且作用呈时效、量效依赖关系；非致死浓度姜黄素处理后胰腺癌PANC-1细胞侵袭和转移明显降低。结论：姜黄素能够减弱胰腺癌细胞PANC-1的侵袭和转移。 　　[关键词] 胰腺癌；姜黄素；侵袭；转移 　　中图分类号：R 735.9 文献标识码： A 文章编号：2095-5200（2015）04-001-03 　　[Abstract] Objective： To explore the effects of curcumin on invasion and metastasis of the human pancreatic cancer cells PANC-1. Method： PANC-1 were treated with 10， 20，30 and 60μmol/ml curcumin，respectively. Proliferation of PANC-1 cells was measured with MTT assay. Invasion and metastasis of PANC-1 cells were evaluated with Transwell chamber. Result： After being treated with curcumin， the proliferation of Pancreatic cells was inhibited in a time and dose-depending manner. The invasion and metastasis of Pancreatic cells were also inhibited. Conclusion： Curcumin could restrain the invasion and metastasis of the human pancreatic cancer cells PANC-1. 　　[Key words] pancreatic cancer；curcumin；invasion；metastasis 　　胰腺癌是较常见的消化系恶性肿瘤，该疾病的早期诊断十分困难，多数新发病例已存在周围器官侵犯和/或远处转移 [1]。因此，探索有效的抗胰腺癌药物对降低胰腺癌死亡率极其重要。近年来，研究发现姜黄素（curcumin）具有较强的抗炎、抗氧化和抗肿瘤特性[2-6]。但姜黄素对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响尚未明确。本研究拟探讨姜黄素对胰腺癌PANC-1细胞体外侵袭和转移的影响，为姜黄素的进一步应用提供实验借鉴。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　细胞株及实验试剂人胰腺癌细胞系PANC-1购自上海细胞生物学研究所，细胞培养采用含10%胎牛血清（杭州四季青生物有限公司）的DMEM（赛默飞世尔生物化学制品有限公司）高糖培养基（ 内含1%的青霉素和链霉素） 。姜黄素、四甲基偶氮唑蓝（ MTT） 购于Sigma 公司。Transwell小室及聚碳酸酯购自Corning公司。 　　1.2 方法 　　1.2.1 细胞培养及处理 胰腺癌PANC-1细胞培养于含10%FBS的DMEM高糖培养基中，置于37℃，5% CO2潮湿空气的培养箱中培养， 每48 h换液传代1次，倍增时间约24 h。取2代生长良好，细胞活性大于98%的细胞进行实验。用不同浓度的姜黄素（10μmol/mL、 20μmol/mL、30μmol/mL和60 μmol/mL）作用后收集细胞进行相关检测。 　　1.2.2 MTT法（比色实验）测定细胞增殖 取对数生长期的PANC-1细胞，调整细胞浓度为2×104个/mL。取3块96孔培养板每孔接种细胞悬液200μL，设未加药细胞组、姜黄素组（设10 μmol/mL、20 μmol/mL、30 μmol/mL、60 μmol/mL 4个浓度于细胞80%处于融合状态后加药），每组设5个平行孔。置37 ℃、体积分数5%CO2饱和湿度孵箱内培养。分别培养24h、48h和72 h后弃上清，每孔加入MTT 20μL（5 mg/mL）及无血清DMEM 200 μL继续培养4 h， 取出后2 000 r/min（r =15 cm）离心10 min，弃上清，