姜黄素对脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡作用及机制研究.docVIP

姜黄素对脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡作用及机制研究 　　DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2014.07.014 　　作者单位：325000 浙江省温州，温州医科大学附属第一医院急诊医学中心 　　通信作者：卢中秋，Email：lzq640815@163.com 　　【摘要】目的 研究姜黄素对脓毒症淋巴细胞凋亡的抑制作用，并探讨其机制?方法 本实验于温州医科大学遗传学实验教学中心完成?取180只清洁级BALB/c雄性小鼠，每次60只，按照随机数字法分成3组，即假手术组（n=20），脓毒症组（n=20），姜黄素组（n=20），实验重复3次?假手术组仅行开腹，不结扎穿孔；脓毒症组和姜黄素组行盲肠结扎加穿孔术（cecal ligation and puncture，CLP）；姜黄素组术前灌胃姜黄素200 mg/（kg?d），持续两周?术后24 h观察病死率，并取脾脏分离淋巴细胞?采用流式细胞术检测淋巴细胞凋亡情况与线粒体膜电位水平；Western blot检测Cyt C?Bax蛋白表达?数据采用SPSS 16.0软件进行分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用单因素方差分析?结果 脓毒症组小鼠术后24 h病死率较假手术组明显升高（33.3% vs. 0.0%， P=0.000），姜黄素组病死率较脓毒症组明显降低（16.6% vs. 33.3%， P=0.035）?脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为（41.2±3.8 ）%，较假手术组（8.0±1.7）%明显增高（P=0.000）；与脓毒症组比较，姜黄素组淋巴细胞凋亡率（27.3±1.3）%明显下降（P=0.000）?脓毒症组线粒体膜电位阳性的细胞百分率为（40.4±1.9）%，较假手术组（79.9±2.1）%明显降低（P=0.000），姜黄素组线粒体膜电位阳性细胞比率为（57.7±1.6）%，与脓毒症组比较膜电位水平明显升高（P=0.000）?脓毒症组胞浆Cyt C蛋白?线粒体Bax蛋白表达水平较假手术组明显上调（P=0.000），而姜黄素组胞浆Cyt C蛋白（P=0.037）?线粒体Bax蛋白（P=0.000）水平都较脓毒症组明显降低?结论 姜黄素可明显减轻脓毒症状态下脾脏淋巴细胞凋亡， 且这一作用可能是通过拮抗线粒体凋亡途径实现的? 　　【关键词】 脓毒症；小鼠；淋巴细胞；细胞凋亡；姜黄素；线粒体凋亡 　　Protective effects of curcumin on sepsis-induced lymphocyte apoptosis in mice Jiang Yunlong， Zhao Guangju， Ying Lan，Hong Guagnliang， Wu Bin， Qiu Qiaomeng， Li Mengfang， Lu Zhongqiu. Emergency Department，The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University，Wenzhou 325000，China 　　Corresponding author： Lu Zhongqiu， Email： lzq640815@163.com 　　【Abstract】Objective To investigate the effects of curcumin on lymphocytes apoptosis in septic mice and elucidate the underlying mechanisms. Methods Sixty male BALB/c mice of clean grade were randomly divided into three groups： sham operation group （n=20）， sepsis model group （n=20） and curcumin treatment group （n=20）. The experiment was repeated three times. Mice in both sepsis group and curcumin group were made to be sepsis models by cecal ligation and puncture （CLP）. Curcumin was intragastrically administrated in dose of 200 mg/（kg?d） for two weeks before operation in curcumin group. And mice in sham group were only treated with open