Toll样受体信号通路在一氧化氮预处理对小鼠肺缺血再灌注损伤保护过程中的作用-胸外科专业论文.docxVIP

华中科技大学博士学位论文 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 前 言 肺缺血再灌注损伤（Ischemia/reperfusion injury，IRI）常出现在肺移植，肺栓塞， 心肺联合移植等多种临床疾病之中，尤其在肺移植术后，肺 IRI 导致的原发性移植肺 功能衰竭，一旦发生，往往缺乏对其有效的治疗措施，成为引起患者术后死亡的常见 原因，因此肺 IRI 被称为“肺移植领域的荆棘”。虽然近年来大量的研究从不同角度对 肺 IRI 的治疗取得了一定的成效，但其效果仍然不够理想，因此，寻找新的有效治疗 方法，减轻肺 IRI，改善肺移植患者预后是目前需要解决的关键问题。 肺 IRI 的病理变化特征为肺血管内皮细胞及肺泡Ⅰ、Ⅱ型上皮细胞的缺失、脱落 及坏死，从而导致肺毛细血管通透性增高、肺水肿、透明膜形成、肺毛细血管内出血 及血栓形成等一系列改变[1]，严重者可以引起急性呼吸窘迫综合症。因此，采取有效 措施阻止肺血管内皮细胞及肺泡上皮细胞损伤是减轻肺 IRI 的关键。 一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种自由基物质，具有广泛的生物学活性，主要 有扩张血管、抗血小板凝集、介导免疫应答等生物学效应，但因其质的不同和量的差 异，NO 的效应常表现为两面性[2]。NO 作为肺血管内皮细胞的保护性物质，被用于肺 部疾病的治疗，并且认为 NO 参与肺 IRI 的调节主要通过 NF-κB 途径及 NOS 途径。 大量实验证明，吸入低浓度 NO 预处理对肺 IRI 具有保护作用[3]，但是由于 NO 的生 理功能强烈的依赖其在体内的时间及空间分布，因此确定 NO 预处理吸入的最佳时长 对于临床 NO 吸入治疗肺移植术后肺 IRI 的应用具有一定的指导意义。 Toll 样受体（Toll-like receptors，TLRs）家族是高度保守的分子家族，在肺泡巨 噬细胞、内皮细胞、树突状细胞等细胞表面表达丰富。TLRs 识别病原微生物及其细 胞壁的特殊结构来启动细胞固有免疫应答，但有研究表明受损或出于应激状态的内源 性配体也可以激活 TLRs，如热休克蛋白（TLR2/4）等，并且发现在 IRI 过程中 TLRs 是诱发炎症的关键因素[4]。髓样分化因子 88（myeloid differentiation factor 88 MyD88） 是 TLRs 信号通路中重要的衔接蛋白，TLRs 通过 MyD88 依赖途径及非 MyD88 依赖 途径激活下游的 NF-κB 调节炎症反应[5]。 基于以上分析，在低浓度 NO 预处理对于肺 IRI 保护过程中，TLRs 信号通路是 否参与调节及他们两者之间是否具有相互作用和联系，目前尚未有研究明确。因此我 们通过建立小鼠肺 IRI 模型，确定最佳的 NO 预处理吸入时长，并且利用 TLRs 高通 量基因芯片技术及基因工程小鼠，明确 TLRs 信号通路在 NO 预处理肺 IRI 保护过程 中的作用，从而进一步阐明 NO 参与肺 IRI 反应调节的途径和机制。 参考文献 [1] Waldow T, Alexiou K, Witt W, et al. Attenuation of reperfusion-induced systemic inflammation by preconditioning with nitric oxide in an in situ porcine model of normothermic lung ischemia. Chest 2004;125:2253-2259 [2] Feil R, Lohmanm SM, de Jonge H, et al. Cyclic GMP-dependent protein kinases and the cardiovascular system: insights from genetically modified mice. Circ Res 2003 ;93:907-916 [3] Watson CM, Reight L, Nottingham JM. Inhaled nitric oxide. Curr Surg 2005;62:396-399 [4] Wu HS, Zhang L, Chen Y, et al. Effect of nitric oxide on toll-like receptor 2 and 4 gene expression in rats with acute lung injury complicated by acute hemorrhage necrotizing pancreatitis. Hepatobiliary Pancreat Dis In