Tfh细胞调节自身抗体形成在免疫复合物诱导的小鼠结肠炎发病中的作用-消化内科专业论文.docxVIP

华申科技大学 罔济医学院 华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 1 PAGE 1 英文缩写 中英文缩略词表 英文全名 中文全名 IBD Bcl-6 inflammatory bowel disease B-cell lymphoma 6 炎症性肠病 B 细胞淋巴瘤蛋白-6 PC plasma cell 浆细胞 Tfh follicular helper T cell 滤泡辅助 T 细胞 CD Crohn’s disease 克罗恩病 IL-21 interlukin-21 白细胞介素-21 ELISA enzyme-linked immuno sorbent assay 酶联免疫吸附试验 FACS fluorescence-activated cell sorting 流式细胞术 MPO myeloperoxidase 髓过氧化物酶 UC ulcerative colitis 溃疡性结肠炎 CXCR5 C-X-C chemokine receptor 5 趋化因子受体-5 ICOS inducible co-stimulator 可诱导共刺激因子 RT-PCR real time quantitative poly merase chain reaction 实时定量聚合酶链反应 TNBS trinitrobenzene sulfonic acid 三硝基苯磺酸 Tfh 细胞调节自身抗体形成在免疫复合物诱导的小鼠结肠炎发 病中的作用 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科 硕士研究生 杨建美 导 师 邹开芳 教授 中 文 摘 要 目的 利用免疫复合物联合 TNBS 建立小鼠结肠炎模型，研究结肠炎小鼠模型中 Tfh 细胞数量，浆细胞数量，外周血自身抗体形成情况及 Tfh 细胞相关细胞因子的表达情 况，探讨 Tfh 细胞调节自身抗体形成在小鼠结肠炎发病中的作用。 方法 将 12 只 BALB/C 雄性小鼠（6-8 周）随机分为 2 组:模型组与对照组。模型组 分别于第 0、7、14、21 天给予免疫复合物皮下及腹腔注射，第 28 天给予 TNBS 灌肠 诱导结肠炎模型；对照组同时间给予等量生理盐水注射及灌肠。每日记录小鼠活动、 体重、大便及精神变化。于第 42 天处死小鼠，结肠组织 HE 染色评价肠道炎症，测 定结肠组织 MPO 活力；分离脾脏淋巴细胞，测定 Tfh 细胞及浆细胞的数量；测定外 周血清 IgG 含量；实时荧光定量 PCR 检测肠道组织 Bcl-6 及 IL-21mRNA 的表达。 结 果 成 功 构 建 结 肠 炎 小 鼠 模 型 ， 对 照 组 小 鼠 肠 道 MPO 活 力 为 0.3127U/g ± 0.06983U/g，模型组小鼠肠道 MPO 活力 0.4543 U/g±0.12207 U/g，较对照组明显升高 （p0.05）；模型组小鼠脾脏 Tfh 细胞数量和浆细胞数量分别为 1.550%±0.414%和 0.780% ± 0.360% ， 较 对 照 组 （ 1.000% ± 0.108% ， 0.300% ± 0.063% ） 都 明 显 升 高 （p0.05）；模型组外周血清 IgG 含量为 372.3ng/ml±43.925ng/ml，较对照组（7.94ng/ml ±26.356ng/ml）升高（p0.05）；模型组肠道组织 Bcl-6mRNA 表达上调，是对照组（1.00 ±0.00）的 3.87 倍，IL-21mRNA（18.40±7.52）的表达是对照组（1.00±0.00）的 18.40 倍，差异具有统计学意义。 结论 免疫复合物联合 TNBS 诱导的结肠炎小鼠 Tfh 细胞和浆细胞数量明显增加， 自身抗体增高，Tfh 细胞相关细胞因子上调，提示我们 Tfh 调节自身抗体形成在其发 病中发挥着重要作用。 关键词 结肠炎；免疫复合物；TNBS；Tfh；浆细胞 Tfh cell regulates autoantibody to initiate intestinal inflammation in immune-complex induced colitis Department of Gastroenterology, Union Hospital, Tongji Medical College, Hua zhong University of Science and Technology Master degree candidate: Yang Jianmei Supervisor : Prof. Zou Kaifang ABSTRACT Objectives This study aimed a