Tie1在淋巴管重塑和瓣膜发育中的作用-细胞生物学专业论文.docxVIP

Tie1 在淋巴管重塑和瓣膜发育中的作用 中文摘要 Tie1 在淋巴管重塑和瓣膜发育中的作用 中文摘要 淋巴管系统由有盲端的毛细淋巴管和集合淋巴管组成，在维持体液平衡、脂肪吸 收和免疫监视中发挥着非常重要的作用。淋巴管的重塑和成熟对形成功能性的淋巴管 网络系统是至关重要的，而且毛细淋巴管重塑成集合淋巴管的过程中伴随着瓣膜的形 成，目前对于该过程的详细细胞与分子生物学机制了解的还很少。Tie1 是一种跨膜酪 氨酸激酶受体，主要在内皮细胞和一些血液细胞中表达。研究表明 Tie1 参与调节血 管的完整性和内皮细胞的存活。虽然有研究发现，敲除 Tie1 基因导致淋巴管生成异 常，但对于其如何参与淋巴管发育调控及其在淋巴管瓣膜发育中的作用机制并不了 解。在本项研究中，我们利用靶向 Tie1 胞内激酶区的条件性敲除小鼠模型 （Tie1-ICDFlox/Flox)，研究 Tie1 在淋巴管重塑和瓣膜发育中的作用。首先，我们统计 了 Tie1△ICD/△ICD 胚胎小鼠的生存率，发现 70%左右的 Tie1 突变体小鼠可以活到 E18.5 天。利用 RT-PCR 和 Western-blot 表达分析发现，Tie1△ICD 的表达量与野生型 Tie1 相 比显著下降。有趣的是，Tie1△ICD/△ICD 突变体小鼠水肿和出血的表型与 Tie1 全敲小鼠 （Tie1-/-)相比较弱，提示剩余的 Tie1△ICD 仍然具有 Tie1 的功能，小鼠的死亡可能是 因为 Tie1△ICD 表达量过低所致。通过对胚胎小 鼠皮肤的免疫染色分析发现， Tie1△ICD/△ICD 小鼠淋巴管网络紊乱，且淋巴管瓣膜不能正常形成。出生后诱导敲除 Tie1-ICD 后导致耳部皮肤淋巴管网络形成异常，淋巴管瓣膜的数量显著减少。进一步 的淋巴管功能分析发现，淋巴管回流液体的功能也有缺陷。利用成年鼠在耳部皮肤制 备创伤愈合模型的初步实验表明，诱导敲除 Tie1-ICD 对伤口愈合没有明显的影响。 上述结果表明，Tie1 在淋巴管重塑和瓣膜发育中起重要作用，该研究也暗示 Tie1 胞内激酶区对 Tie1 的生物学功能并非必须。 关键词：受体酪氨酸激酶；Tie1；淋巴管重塑；淋巴管瓣膜发育 作 者：尚 志 指导老师：何玉龙 I II II Abstract The role of Tie1 in lymphatic remodeling and valve development The role of Tie1 in lymphatic remodeling and valve development Abstract The lymphatic vascular system consists of the blind-ended lymphatic capillaries and collecting lymphatic vessels. It plays an essential role in the maintenance of tissue fluid balance, absorption of fatty acids, and immune surveillance. Lymphatic remodeling and maturation are important processes during the formation of a functional lymphatic network. The detailed cellular and molecular mechanisms of lymphatic remodeling and maturation are still poorly understood. Tie1 is a transmembrane tyrosine kinase receptor, and its expression is restricted to the endothelial cells and some hematopoietic cells. It has been shown that Tie1 plays a role in the establishment of blood vascular integrity and endothelial cell survival. Although deletion of Tie1 was previously reported to have abnormal lymphangiogenesis during embryonic development, it is unclear how Tie1 is involved in this poss