TiO2涂层种植体抗菌性能及生物活性的实验研究-口腔医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 本论文属于 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 不保密 。 （请在相对应的方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 天津医科大学硕士学位论文 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 研究目的： 骨结合是种植义齿成功的关键因素，通过对种植体表面进行处理，在其表 面形成具有良好抗菌性能和生物活性的涂层，从而促进种植体早期骨结合、提 高种植体早期负载能力。本研究采用阳极氧化方法对纯钛表面进行处理，并对 得到的二氧化钛(TiO2)纳米管涂层进行表面特性分析，通过不同消毒方法处理后 进行接触抗菌实验研究其抗菌性能，利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实 时荧光定量(Real-time)PCR技术系统分析材料对细胞骨功能基因表达的影响规 律，为TiO2纳米管在钛种植体表面改性中的应用提供有价值的参数。 材料和方法： 1、纯钛试样表面经碳化硅砂纸序列打磨后，分别用丙酮、乙醇和蒸馏水超 声 10 分钟，室温下自然干燥。在 0.5%质量分数的氢氟酸电解液中，酸蚀纯钛试 样 30 分钟，之后立即用去离子水冲洗晾干。酸蚀后的试样在 0.2%质量分数的氢 氟酸电解液中，以 20V 电压阳极氧化处理 40 分钟。对照组为光滑纯钛试样组， 实验组为酸蚀后 TiO2 纳米管组。扫描电子显微镜观察实验组和对照组试样表面 形貌，应用表面粗糙度仪测量其表面粗糙度值。 2、采用三种消毒方法分别为：乙醇浸泡、高压蒸汽灭菌、紫外线照射处理 实验组和对照组试样。用去离子水测量试样表面接触角，分析利用不同方法消 毒前后，试样表面接触角的变化，评价试样的细菌黏附能力；采用薄膜密着法 进行抗菌效能检测，验证经三种消毒方法处理后，试样抑制金黄色葡萄球菌的 功效；采用场发射扫描电子显微镜观察 3 种消毒方法对细菌形态的影响。 3、小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)接种于实验组和对照组试样上，培养 7 天后， 提取核糖核酸(RNA)，采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量 PCR 检测骨钙素(OCN)信使 RNA(mRNA)的表达水平。 结果： 1、在电解液为质量分数 0.5%的 HF 中酸蚀 30min 后进行阳极氧化处理 30 min，纯钛试样表面可以形成均匀分布的同时含有微米及纳米级结构的形貌。场 发射扫描电镜显示，与对照组相比较，实验组经酸蚀后阳极氧化的 TiO2 纳米管 有较大的沟壑样突起，坑窝边缘稍圆钝。酸蚀后的 TiO2 纳米管试样表面粗糙度 更大，对细菌黏附能力更强。 I 2、经紫外线照射消毒后，实验组和对照组试样表面接触角均小于乙醇浸泡 消毒和高压蒸汽灭菌。与对照组相比，经酸蚀后阳极氧化制备的 TiO2 纳米管试 样，在紫外线照射消毒后，其表面金黄色葡萄球菌细菌数明显小于对照组。场 发射扫描电镜观察显示，乙醇浸泡消毒后，试样表面活菌数最多，细菌形态较 完整；高压蒸汽灭菌后，试样表面活菌数较多，细菌形态受到破坏；紫外线照 射消毒后，试样表面活菌数最少，细菌形态破坏最完全。 3、与对照组相比，实验组成骨细胞标记基因 OCN 的表达上调。 结论： 1、利用酸蚀加阳极氧化方法可以制备出含有微米及纳米梯度形貌的 TiO2 纳米管，该形貌均匀覆盖整个试样表面。 2、经不同消毒方法处理后，紫外线照射消毒抗菌性能最佳。 3、TiO2 纳米管可以提高前成骨细胞 MC3T3-E1 骨功能基因 OCN 的早期表 达水平。 关键词： TiO2 涂层 阳极氧化 抗菌 金黄色葡萄球菌 消毒 成骨细胞 II Abstract Objective: Osseointegration is the key of a success implant denture. Different kinds of surface modification have been made to improve the implants antibacterial ability and biological activity