TMEM16A在白介素13诱导的黏液高分泌中的作用-内科学(呼吸内科)专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 CaCC 英文全称 Ca2+-activated Cl? channel 中文全称 钙激活氯通道 IL-13 TMEM16A Interleukin-13 transmembrane protein 16A 白细胞介素 13 跨膜蛋白 16A HBE16 cell Human bronchial epithelial 16 cell 人支气管上皮细胞 NA Niflumic acid 尼氟灭酸 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 MUC5AC mucin 5AC 黏蛋白 5AC IκBα nuclear factor kappa B alpha 核因子 κBα NF-κB nuclear factor-kappa B 核因子 κB COPD chronic obstructive pulmonary disease 慢性阻塞性肺疾病 ATP adenosine triphosphate 三磷酸腺苷 UTP uridine triphosphate 尿苷三磷酸 CLCA1 Calcium-activated chloride channel-1 钙激活氯通道-1 IL-4 PCR Interleukin-4 polymerase chain reaction 白细胞介素 4 聚合酶链反应 TGF-β transforming growth factor-β 转移生长因子 rpm Round per minute 每分钟转数 mRNA Messenger ribnucleic acid 信使核糖核酸 DNA Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 cDNA Comlementary deoxyribonucleic acid 互补脱氧核糖核酸 RNA Ribonucleic acid 核糖核酸 h Hour 小时 siRNA Short interfering RNA 小分子干扰 RNA ELISA Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay 酶联接免疫吸附剂测定 1 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 DNA Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 GAPDH Glyceraldehyde-3-phosphate 甘油醛-3-3 磷酸脱氢酶 HRP Horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 min Minute 分钟 PBST Phosphate buffered saline with 0.05% tween-20  磷酸盐吐温缓冲液 PVDF Polyvinylidene difluoride 聚偏（二氟）乙烯 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链反应 TNFα Tumer necrosis factor α 肿瘤坏死因子 α 2 TMEM16A 在白介素 13 诱导的黏液高分泌中的作用 摘 要 前期研究表明钙激活氯通道（Ca2+-activated Cl?channel，CaCC） 参与了由白介素 13（Interleukin-13，IL-13）诱导的黏液高分泌，具 体 机 制 尚 不 清 楚 。跨膜蛋白 16A(transmembrane protein 16A ， TMEM16A)作为 CaCC 的主要组成部分，可能与之相关。本实验目 的在于了解 TMEM16A 是否参与到上诉过程中以及相应的调节机 制 。 我 们 观 察 到 在 IL-13 刺 激 后 的 人 支 气 管 上 皮 细 胞 （ human bronchial epithelial 16 cells，HBE16)中 TMEM16A mRNA 和蛋白的表 达明显升高，同时伴随着黏液分泌增加。而加入特异性 CaCC 阻断 剂尼氟灭酸后（Niflumic acid，NA），作为黏液主要成分的黏蛋白 （mucin，MUC）5AC mRNA 和蛋白的表达被明显抑制了。进一步 实验表明转染 TMEM16A 后的 HBE16 细胞促进了黏液的分泌、核因 子 κBα（nuclear factor kappa B alpha，IκBα）的氧化磷酸化以及细胞 核中 p65 蛋白的聚集。敲除 TMEM16A 后的细胞其黏液分泌则减少。 同时我们还观察到 MUC5AC 的生成可被一种核因子 κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）抑制剂所阻断。由此推断 TMEM16A 作为 3 NF-κB 的上游信号通路参与着黏液分泌的调节。本课题首次阐明了 TMEM16A-NF-κB 通路在 IL-1