β肾上腺素受体信号对佐剂性关节炎大鼠树突细胞及成纤维样滑膜细胞的影响-药理学专业论文.docxVIP

安徽 安徽医科大学博士学位论文 2.13 FLS 内 cAMP 水平的检测 23 2.14 流式细胞术检测 FLS 细胞表面 β2-AR 的表达 23 2.15 免疫组化法检测 DCs 和 FLS 上 β2-AR 的表达 23 2.16 免疫荧光法检测 FLS 细胞表面 β2-AR 的表达 24 Western blot 检测 β2-AR、GRK2、β-arrestin2、p-ERK 的表达. 25 QRT-PCR 检测 DCs 上 β2-AR mRNA、GRK2 mRNA 的表达 ... 27 2.19 统计学分析 30 3 实验结果 31 3.1 β-AR 信号对 AA 大鼠 DCs 功能的影响 31 3.1.1 DCs 的培养与鉴定 31 3.1.2 异丙肾上腺素（ISO）对 DCs 表型及功能的影响 32 3.1.3 β-AR 选择性拮抗剂对 ISO 处理的 DCs 表型及功能的影响 35 3.1.4 β2-AR 在 AA 大鼠骨髓源 DCs 中的表达分布 37 3.1.5 β2-AR 激动药灌胃对 AA 大鼠的影响 38 3.1.6 AA 大鼠骨髓源 DCs 对 ISO 反应的差异 44 3.1.7 AA 大鼠骨髓源 DCs 表型和胞膜 β2-AR、GRK2 及其 mRNA 在 AA 病程中的变化 45 3.2 β-AR 信号对 AA 大鼠 FLS 功能的影响 48 3.2.1 ISO 对正常大鼠 FLS 增殖能力的影响 48 3.2.2 ISO 对正常大鼠 FLS 分泌细胞因子水平的影响 48 3.2.3 β-AR 选择性拮抗剂对 ISO 处理的 FLS 增殖能力的影响 49 3.2.4 ISO 对正常和 AA 大鼠 FLS 增殖能力影响的差异 50 3.2.5 β2-AR 在正常和 AA 大鼠 FLS 的表达、分布 51 3.2.6 流式细胞术检测 ISO 对正常及 AA 大鼠 FLS 胞膜 β2-AR 表达的 影响 52 Western blot 检测 AA 大鼠 FLS 胞膜 β2-AR、GRK2、β-arrestin2 的表达变化 54 ISO 对正常及 AA 大鼠 FLS 胞内 cAMP 水平的影响 55 ISO 对正常及 AA 大鼠 FLS p-ERK 水平的影响 55 4. 讨 论 57 4.1 DCs 和 FLS 功能的异常参与了 RA 炎症免疫反应的病理过程 . 57 4.2 β2-AR 信号是调节 DCs 和 FLS 功能的重要信号通路 58 4.3 β2-AR 信号异常是 AA 大鼠 DCs 和 FLS 功能改变的重要原因 61 结 论 64 本研究创新点 65 下一步工作设想 65 参考文献 66 附 录 76 致 谢 79 综述:肾上腺素受体及其信号在类风湿关节炎中的研究进展 81 英文缩略词表 (Abbreviation) 英文缩写 A 英文全名 Absorbance 中文全名 吸光度 AA Adjuvant arthritis 佐剂性关节炎 AC Adenylate cyclase 腺苷酸环化酶 Adr Adrenaline 肾上腺素 AP Ammonium persulfate 过硫酸胺 APC Antigen-presenting cell 抗原提呈细胞 AR Adrenergic receptors 肾上腺素受体 β2-AR BSA β2 adrenergic receptors Bovine serum albumin β2 肾上腺素受体 牛血清白蛋白 CA Catecholamine 儿茶酚胺 cAMP Cyclic adenosine monophosphate 环磷酸腺苷 CD Cluster of differentiation 白细胞分化抗原 CFA Complete Freund adjuvant 完全弗氏佐剂 ConA Concanavalin A 刀豆蛋白 A DAB Diaminobenzidin 二氨基联苯氨 DC Dendritic cell 树突状细胞 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附实验 ERK FITC Extracellular signal-regulated kinase Fluorescein isothiocyanate 胞外信号调节激酶 异硫氰酸 HYPERLINK /view/2062542.htm 荧光素 1 安徽 安徽医科大学博士学位论文 PAGE PAGE 2 F FLS Gi GM-CSF GPCRs Fibroblast-like syn