广西金花茶水提取物对小鼠皮肤光老化防护作用实验研究.docVIP

广西金花茶水提取物对小鼠皮肤光老化防护作用实验研究 　　摘要：目的 研究金花茶提取物对光老化模型小鼠皮肤的保护作用。方法 用紫外光灯照射KM小鼠，建立光老化小鼠模型，灌胃给予金花茶提取物，观察小鼠皮肤的组织形态，测定小鼠皮肤中超氧化物歧化酶、丙二醛及羟脯氨酸的含量。结果 各剂量金花茶提取物均能有效提高光老化小鼠皮肤中SOD活力（P0.05）、降低MDA含量（P0.05）、增加羟脯氨酸含量（P0.05），且能显著减轻小鼠皮肤组织受损程度。结论 金花茶提取物具有抗皮肤光老化的作用，且大剂量优于小剂量，作用机制可能与其能够清除自由基和活性氧，从而防止组织过氧化损伤有关。 　　关键词：金花茶；光老化；皮肤 　　皮肤是机体最大的器官，与许多皮肤病如脂溢性角化、日光性角化、基底细胞癌、鳞状细胞癌等的发生也有着病因学的关系，而且有损于美容。皮肤老化包括两个过程，内在老化和光老化，其中光老化主要由长期紫外线照射所致，只能通过避免阳光照射和使用防晒药物来预防。金花茶属山茶科山茶属植物，是世界珍贵的药用资源，含有多种茶多酚、茶多糖、黄酮类以及微量元素等人体所需的有益成分[1]。此外，金花茶是广西特有的植物资源，其水浸出物具有明显的降血压、降血脂和防止动脉粥样硬化、提高机体免疫能力、抗氧化等多种功能[2]。本文通过给小白鼠灌胃给予低、高剂量金花茶提取物，观察小鼠皮肤的组织形态，测定小鼠皮肤中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及羟脯氨酸（Hpy）的含量，以深研究金花茶防治皮肤光老化作用。现将实验结果报道如下。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 3月龄昆明种小鼠50只。雌雄各50%，体重（20±2）g，由右江民族医学院动物中心提供（许可证号：SYXK桂2011-0010）。 　　1.2药物及试剂 将金花茶生品用干燥箱烘干24 h，高速粉碎机粉碎后，过120目筛，制备成极细的中药粉末，配制成浓度分别为8%、16%的金花茶提取液，置于4℃冰箱中备用。维生素E（浙江医药股份有限公司）、维生素C（湖北华中制药公司）配成1%的混悬液，冷藏备用。 　　1.3方法 　　1.3.1分组 将小鼠正常喂养1 w后，随机分为5组：空白组、模型组、维生素E-C合剂组（以下简称西药组）、金花茶大剂量组（以下简称大剂量组）、金花茶小剂量组（以下简称小剂量组），每组10只。分笼喂养，自由饮食。 　　1.3.2造模 各组小鼠称重，做标记，全价饲料适应性喂养1 w。除空白组外其余各组小鼠每天或每2 d用动物剃毛剪将背部毛脱干净，面积2 cm×2 cm。将小鼠置于紫外光灯下（UVA+UVB，模拟日光）照射，照射距离40 cm。照射15 min/d，连续照射20 d，达到累计照射剂量UVA为20.6 mJ/cm2、UVB为1.8 mJ/cm2，造模完成。 　　1.3.3给药 空白组：正常饲养；蒸馏水灌胃组：模型组：造模+每天灌胃蒸馏水；大剂量组：造模+按3.2 mg/g/d体重的剂量灌胃；小剂量组：造模+按0.8mg/g/d体重的剂量灌胃；西药组：造模+每日灌胃维生素E-C悬液（50 mg/kg），连续6 w。 　　1.3.4指标观察 第56d末次给药前禁食12 h，给药1 h后，小鼠背部脱毛，肉眼观察皮肤组织形态改变，取背部正中皮肤约1 mm×1 mm大小的皮肤组织，进行指标检测。 　　1.4统计学处理 所有数据均通过SPSS 18.0软件完成数据分析，计算资料以（x±s）表示，各组间均值比较采用t检验，P0.05有统计学意义。 　　2结果 　　2.1皮肤一般形态 与空白组相比，模型组小鼠背侧表皮颜色加深、增厚、脱屑，严重者出现皱缩、粗糙变硬；西药组及大剂量组、小剂量组小鼠背侧表皮仅有稍许皮肤增厚，无脱屑、颜色加深。 　　2.2小鼠皮肤中SOD活力、MDA含量、HPy含量：经紫外照射后小鼠皮肤组织丙二醛含量明显增加，羟脯氨酸含量下降，SOD活性降低，与空白对照组各指标变化比较差异有显著性意义（P0.01）。灌服金花茶水提取液后，小鼠皮肤中SOD活力明显升高，丙二醛含量显著降低，差异均有显著性意义（P0.05），提示金花茶可增强皮肤对自由基的防护功能，减少脂质过氧化产物堆积。灌服金花茶后，小，大剂量组小鼠皮肤羟脯氨酸含量提高，提示内服金花茶可促进皮肤胶原蛋白的合成，减少紫外线对皮肤胶原蛋白的影响，见表1。 　　3讨论 　　皮肤衰老是在增龄过程中所出现的特殊皮肤的外貌，是由于机体在生理和病理性衰老过程中引起的表皮、真皮和皮下组织以及皮肤附属器官的改变并同时受激素、日光辐射，化学及营养缺陷等诸多因素积累性、多方位性作用的结果[3]。①非暴露的皮肤变薄，而暴露的部分由于长期的慢性日光照射还会引起皮肤微循环的改变，使皮肤无光泽，有时还可能出现良性及恶