注射用丹参多酚酸对脑缺血大鼠vegf il-10表达的影响-effect of salvianolic acid for injection on vegf il - 10 expression in cerebral ischemia rats.docxVIP

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注射用丹参多酚酸对脑缺血大鼠vegf il-10表达的影响-effect of salvianolic acid for injection on vegf il - 10 expression in cerebral ischemia rats

万方数据 万方数据 原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者: 日期: 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者: 日期: 年 月 日 摘 摘 要 注射用丹参多酚酸对脑缺血大鼠 VEGF、IL-10 表达的影响 研究生 王 淑 导 师 白 蓉 教授 郑州大学第一附属医院神经内一科 河南 郑州 450052 摘 要 背景与目的 缺血性脑血管病是全球死亡率和长期致残率的主要原因,具有高发病率、 高致残率、高死亡率的特点,已严重威胁到人类的生命和健康。缺血性脑卒中 的发生过程中涉及多种病理生理学机制,包括氧化应激,炎症反应,血管内皮 细胞及微血管功能障碍,细胞坏死、凋亡等,其中血管内皮细胞损伤及微血管 障碍是主要机制。在大脑血管阻塞后数分钟,即可迅速启动一系列脑缺血生物 化学级联反应,炎性因子的释放:肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF- α),白介素-10(Interleukin-10,IL-10),白介素-1(Interleukin-1,IL-1),白介 素-20(Interleukin-20,IL-20),白介素-6(Interleukin-6,IL-6)等因子。其中,白 介素-10 是主要的抗炎和神经营养因子,通过抑制多种促炎因子如 TNF-α, IL-1β,IL-8 的产生发挥抗炎作用。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)是非常重要的神经营养因子之一。在脑缺血损伤后 VEGF 水平上 调已在动物模型中证实。由于复杂的病理生理学机制,治疗缺血性脑卒中已成 为临床工作的重点。近年来,关于中药在急性脑缺血损伤的治疗方面研究非常 活跃,传统经典中药丹参已广泛应用于临床治疗多种微循环障碍相关疾病,如: 心血管疾病,脑血管疾病,肾脏功能障碍,肝纤维化及糖尿病并发症等,具有 多靶点、多途径等特点。 注射用丹参多酚酸(Salvianolate lyophilized injection ,SLI))是丹参的水溶 性提取物,具有多种药理活性,主要由丹酚酸 B(salvianolic acid B)、丹酚酸 D、 I 丹酚酸 E、迷迭香酸等组成,已有研究证实丹参多酚酸可通过血脑屏障,降低 大鼠脑组织缺血面积,清除自由基,抑制炎性细胞浸润,改善循环等达到治疗 急性脑缺血目的。目前丹参多酚酸在急性脑缺血的抗炎及血管保护研究尚少见, 本实验通过采用经典的大鼠左侧大脑中动脉闭塞模型(Middle cerebral artery occlusion,MCAO),给予注射用丹参多酚酸腹腔注射(30mg/Kg),并选取 6h、 12h、24h、48h 四个不同缺血时间点,通过应用 Zea-Longa 法评估注射用丹参多 酚酸对急性脑缺血大鼠神经功能缺损,TTC 染色观察注射用丹参多酚酸对 MCAO 大鼠脑梗塞体积影响,HE 染色观察缺血半暗带区神经细胞形态学变化, 酶联免疫吸附测定法(ELISA),蛋白质印迹技术检测方法(Western Blot),免疫组 织化学检测法检测注射用丹参多酚酸对 MCAO 大鼠的血清及脑组织中 VEGF、 IL-10 表达水平的影响,以证实丹参多酚酸在急性脑缺血中发挥的抗炎及血管神 经保护作用。 材料与方法 选取健康雄性 SD 大鼠(体重 250-280g)120 只,清洁级,由郑州大学实验 动物中心提供,随机分为假手术组(Sham 组)、模型组(MCAO 组)、丹参多 酚酸治疗组(MCAO+SLI 组),再按缺血时间随机分为 6h、12h、24h、48h 4 个亚组。采用改良 Longa 法制备大鼠左侧大脑中动脉闭塞模型。Sham 组除了不 结扎血管其余步骤同模型组,大鼠清醒后,在脑缺血不同时间点 MCAO+SLI 组 腹腔注射丹参多酚酸 30mg/Kg,MCAO 组、Sham 组给予等量的生理盐水。分别 于

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