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普罗布考对高脂血症性急性胰腺炎金黄地鼠脂质过氧化及细胞因子影响
普罗布考对高脂血症性急性胰腺炎金黄地鼠脂质过氧化及细胞因子影响
[摘要] 目的 探讨普罗布考在高脂血症性急性胰腺炎金黄地鼠模型中的效应。 方法 金黄地鼠60只,高脂饮食饲喂建立高三酰甘油血症模型后,随机分成两组:高脂血症性急性胰腺炎对照(D)组,普罗布考治疗(P)组。D组与P组建立HL-AP模型:予以20% L-精氨酸溶液腹腔注射。P组加入1%普罗布考。检测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)的水平以反应机体氧化应激水平;检测细胞因子TNF-α和IL-6来反应机体的炎症情况。 结果 P组金黄地鼠MDA水平明显高于D组(P 0.05),而SOD、T-AOC、TNF-α、IL-6均明显低于D组(P 0.05)。 结论 普罗布考对于高脂血症性急性胰腺炎具有一定的疗效。
[关键词] 普罗布考;高甘油三酯血症;急性胰腺炎;脂质过氧化
[中图分类号] R965 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2013)04-0012-03
高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia,HTG)已成为继胆源性和酒精性之后急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的第三大病因[1]。据报道,高脂血症性急性胰腺炎(hyperlipedemic acute pancreatitis,HL-AP)约占全部胰腺炎的10%[2]。而且,一项研究揭示大约有56%的妊娠期胰腺炎由HTG引起[3]。尽管HL-AP已相当普遍,其具体机制尚不清楚,脂质代谢的异常被认为与之相关。研究者认为血浆甘油三酯(TG)水平1 000 mg/dL(11.3 mmol/L)是胰腺炎的触发点[4],高TG水平组成的乳糜颗粒将血清变成乳汁状,此时体内自由基的产生和清除之间失去平衡,增加体内氧化应激水平,特别是增加脂质的过氧化。普罗布考具有降脂、抗氧化的作用,可降低体内氧化应激水平;亦有报道普罗布考可影响体内炎症因子的水平[5]。本研究通过建立HL-AP金黄地鼠鼠模型,研究普罗布考在HL-AP中所起的作用,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 试剂
普罗布考由北京维信康医药有限公司提供;血脂检测试剂盒均购自中生北控生物技术公司;MDA/SOD和T-AOC 检测试剂盒购自南京建成生物有限公司;淀粉酶测定试剂盒购买于四川迈克生物科技股份有限公司;脂肪酶检测试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供;肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒购自上海康成生物有限公司。
1.2 动物和饲料
6~8周龄雄性金黄地鼠(golden hamster)60只,体重90~110 g,购自南华大学医学部动物实验部,于南华大学医学部动物试验部饲养,温度(23±1)℃,自然光照,自由饮水,给予专用饲料,动物在实验前适应性饲养1周。普通饲料和高脂饲料(10%猪油,2%胆固醇,88%普通饲料)均购自南华大学医学部动物试验部。
1.3 方法
1.3.1 HTG模型的建立 60只金黄地鼠饲喂高脂饮食3周,喂养前后均行尾静脉取血检测甘油三酯及总胆固醇(total cholesterol,TC)的含量浓度,前后比较升高10倍以上,HTG成模。
1.3.2 HL-AP模型的建立 将上述HTG模型随机(抽签法)分为2组:对照组(D),n = 30,继续高脂饮食饲喂1W;普罗布考治疗组(P),n = 30,高脂饮食的基础上加用1%普罗布考1周,胰腺炎模型诱导前禁食水12 h,20%L-精氨酸溶液腹腔注射3次,2.0 g/kg 体重,间隔1 h。模型诱导后予动物进食水。
1.3.3 血液样本 在L-精氨酸最后一次注射后0、3、6、12、24 h取血液样本,然后处死动物。
1.3.4 血清脂质及炎症因子的测定 取血液样本,离心(4 000 r/min×15 min,4℃),制备血清,酶比色法检测试剂盒测定血清中三酰甘油、总胆固醇(total cholesterol,TC)的含量;ELISA法检测血清中炎症因子TNF-α、IL-6的水平。
1.3.5 血清生化测定 取血液样本,离心(2 800 r/min×20 min,4℃)去除乳糜颗粒,按试剂盒说明测定淀粉酶及脂肪酶活性,硫代巴比妥酶法测定血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,比色法测定血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及总抗氧化能力(total antioxideiative)。
1.4 统计学分析
采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,其中计量资料采用t检验,以P 0.05为有统计学意义。
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