毛莨粗提物对异型眼蕈蚊毒力活性研究.docVIP

毛莨粗提物对异型眼蕈蚊毒力活性研究 　　摘要：在室内条件下，测定了5种浓度的乙醇对毛茛全草的提取效果，并研究了毛茛中乙醇提取物对异型眼蕈蚊幼虫的毒杀活性。结果显示，55％的乙醇对毛茛的提取率最高，为28％；75％的乙醇提取物活性最强，对异型眼蕈蚊幼虫有很强的毒杀作用，24 h的毒力回归方程为Y=－1.297+0.022X,LC为57.913 g/L。而且毒杀效果随着提取物浓度的提高和处理时间的延长而增强。 　　关键词：毛茛；乙醇提取物；异型眼蕈蚊；毒力 　　中图分类号：S436.32　文献标识号：A　文章编号：1001－4942(2011)02－0080－03 　　 　　异型眼蕈蚊幼虫(俗称姜蛆)是生姜贮藏期的主要害虫。为防治该虫，姜农施用大量化学农药，使生姜仅农药残留超标原因所导致的损失每年高达数亿元。面对化学农药暴露出来的种种问题，人们逐渐认识到从植物中寻找新的杀虫活性物质对现代农药研究的巨大推进作用。毛茛，又名鱼疗草、五虎草、野芹菜等，是毛茛科毛茛属多年生草本植物，生长于河沟、池沼、水堤旁及阴湿的草丛中，全国各地都有分布，来源丰富。毛茛具有祛风止痛、杀虫解毒、退翳、截疟等多种功效，毛茛全草提取物对小菜蛾、柑橘全爪螨有较好的毒杀作用，对菜粉蝶幼虫有较高的拒食率，但毛茛提取物对异型眼蕈蚊的毒杀活性，未见报道。为探索毛莨提取物对异型眼蕈蚊幼虫的毒杀作用，为今后开展毛茛杀虫活性物质的作用机制及开发利用等研究提供依据，笔者以毛茛为材料试验了不同浓度的乙醇提取液对姜蛆的防治效果，为姜蛆植物源农药的研究开发提供理论依据。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1.1　材料 　　1.1.1　供试植物毛茛采自莱芜市莲花山山沟阴湿地。将毛莨带根铲起，用清水洗净根上的泥土，阴干，磨碎，装入保鲜袋密封贮于冰箱中备用。 　　1.1.2　供试昆虫　异型眼蕈蚊幼虫，2009年9月采于姜田，室内人工继代饲养。 　　 　　1.2　方法 　　1.2.1　提取方法称取毛茛全草粉碎样50 g，置于500 ml 圆底烧瓶中，用不同浓度(设35％、55％、75％、85％、95％，共5个浓度)的乙醇400ml回流提取2 h，倾出滤液，再用400 ml乙醇回流提取2 h，合并提取液，用旋转蒸发器回收溶剂，浓缩至膏状。将滤渣平摊于托盘并置于烘箱中烘至恒重，计算提取率。 　　提取率(％)=(提取前干粉重－提取后滤渣干重)/提取前干粉重×100 　　1.2.2　毛茛提取物对姜蛆的触杀活性测定参考慕卫等(2002)的培养皿法。用无菌水做溶剂，将35％、55％、75％、85％的乙醇提取的毛茛浸膏分别配成200、100g/L浓度的溶液。在9em的培养皿内铺两层滤纸，取2 ml配好的药液均匀滴加在滤纸表面，使之正好完全湿润。将姜切成大小一致的姜片于药液中浸泡15 s后，取出放在铺有药液处理滤纸的培养皿内，然后用自制移虫环轻轻挑取生长一致的3龄幼虫置于皿内姜片上。每处理20头，重复3次，同时设清水对照。将携带试虫的培养皿置于(25±1)℃、相对湿度(60±10)％避光的智能人工气候培养箱内，分别于24、48、72、96 h记录试虫的死亡情况，按Abbott公式计算死亡率及校正死亡率。用移虫环轻触虫体，以肢体不动者为死亡。 　　 　　将优选出的对姜蛆毒力活性较强的乙醇浓度的毛莨提取物进一步稀释为200、100、50、25、12.5 g/L浓度的溶液，重复上述触杀试验，根据浓度、供试虫数、死亡虫数的数据通过SPSS软件形成毒力回归方程，并用Duncans新复极差法比较数据之间的差异显著性。 　　校正死亡率(％)=(处理组死亡率－对照组死亡率)/(1一对照组死亡率)×100 　　 　　2　结果与分析 　　 　　2.1　不同浓度的乙醇对毛茛全草的提取率 　　试验结果表明，不同浓度的乙醇对毛茛全草的提取率相差不大，其中55％乙醇浓度的提取率最高，为28％；95％乙醇的提取率最低，为20％。 　　 　　2.2　不同浓度的乙醇提取液对姜蛆的毒杀活性 　　室内毒杀测定结果(表1)表明，毛茛4种浓度的乙醇提取液对3龄蛆虫均具有一定的毒杀活性。作用24 h时，在200 g/L高浓度处理下，其毒杀活性大小次序为75％乙醇提取液85％乙醇提取液55％乙醇提取液35％乙醇提取液，幼虫死亡率依次为100％、50.0％、45.5％、4.8％。在100g/L浓度处理时，毒杀活性大小次序为75％乙醇提取液55％乙醇提取液35％乙醇提取液=85％乙醇提取液。而且随着时间的推移各个浓度处理下的幼虫死亡率呈上升趋势。同时也显示，用75％的乙醇从毛茛中提取的粗提物对姜蛆的毒杀效果最强，相对于其它各处理差异显著。 　　 　　2.3　优选乙醇浓度的毛茛提取液对姜蛆的毒力测