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毛细管电泳技术在检测分析中应用

毛细管电泳技术在检测分析中应用   摘要:毛细管电泳技术(CE)作为现今一种主要的分析技术,凭借其高效、灵敏、快速、设备简单、广泛适用性等特点,广泛应用于各个领域。本文简要概述了CE技术的原理及特点,并简述了它在环境分析、食品分析、药物分析、生物大分子分析等各个领域的应用。   Abstract: Capillary electrophoresis (CE) as a major analytical techniques today, with its efficient, sensitive, rapid, simple equipment, a wide range of applicability and other characteristics, is widely used in various fields. This paper briefly outlines the principles and characteristics of CE technology, and outlines its environmental analysis, food analysis, drug analysis, application of biological macromolecules and other fields.   关键词:毛细管电泳液相分离技术;应用;检测分析   Key words: capillary electrophoresis liquid separation technology;application;detection analysis   中图分类号:TS207.3 文献标识码:A 文章编号:1006-4311(2015)33-0140-02   0 引言   毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是指以毛细管为分离室,以高压电场为驱动力的一类新型现代电泳技术,克服了传统电泳分析中操作烦琐,分离效率低,定量困难,无法与其他分析相比等缺点。并且由于此项技术引入了高的电场强度,使得其不仅分离质量良好,而且效率高、速度快、灵敏度高,重要的是所需样品少,成本低,更为重要的是,它又是一种自动化的仪器分析方法。   1 毛细管电泳技术的基本原理   毛细管电泳是指带电离子在电场中的定向移动,不同离子具有不同的迁移速度,而对组分进行分离和分析(如图1)。以两个电解槽和与之相连的内径为20~100μm的毛细管为工具(如图2),毛细管电泳所用的石英毛细管柱,在pH3的情况下,其内表面带负电,和缓冲液接触时形成双电层,在高压电场的作用下,形成双电层一侧的缓冲液由于带正电荷而向负极方向移动形成电渗流(如图3)。同时,在缓冲液中,带电粒子在电场的作用下,以不同的速度向其所带电荷极性相反方向移动,形成电泳,电泳流速度即电泳淌度。   当带电离子以速度v在电场中移动时,受到大小相等、方向相反的电场推动力和平动摩擦阻力的作用。   电场力:Ft=qE   阻力:F=fγ   故:qE=fγ   上式中各参数代表含义如下:q―离子所带的有效电荷;E―电场强度;v―离子在电场中的迁移速度;f―平动摩擦系数(对于球形离子:f=6πηγ;γ―离子的表观液态动力学半径;η―介质的粘度)。   q―离子所带的有效电荷;E―电场强度;γ―离子的表观液态动力学半径;η―介质的粘度。   因此,在高压电场的作用下,利用毛细管电泳技术可有效实现各种粒子的分离,并且由于毛细管的管径细小、散热快,即便是遇到高的电场和温度,也不会影响其分辨率。   2 传统电泳的不足及毛细管电泳的优点   传统的电泳技术虽然对生物化学的发展起了重要的推动作用,但是传统的电泳存在诸多弊端,如解析度不佳、灵敏度差、重?F性差、电泳中的有害物质核酸染料废弃物处理麻烦、定量困难、各式药品保存及品质管理复杂、多样仪器操作及管理:配胶/制胶/电泳/UV灯/照相/软件分析等、人工判读没有统一标准、后续资料处理复杂、资料保存困难,已经很难满足现代生命科学研究的要求。   毛细管电泳技术的出现克服了传统凝胶电泳实验的一些弊端,具有高通量、高分辨率、高灵敏度、全自动、标准化、无污染等优点,赋予了其强大的检测分析功能,帮助科研工作者提高效率,及研判实验的准确性。其优点主要有如下几个方面:①效率高。②分析速度快几十秒到几十分钟就能完成分离。③电压升高,电场推动力大,又可进一步使柱径变小,柱长增加。④侧面/横截面比的增大使产生的热量能够较快散发。⑤微量进样所需的样品体积为nL级,进样量只需1~50nl。⑥多模式可根据需要选用不同的分离模式且仅需一台仪器。⑦经济样品需量小,无环境污染,运行成本低。进样量极少,可在水介质中进行

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