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柚子皮中总黄酮提取工艺研究 　　摘要：以乙醇作为浸提剂，利用响应曲面法探讨柚子皮总黄酮的最佳提取工艺条件。结果表明，提取温度为70 ℃，液料比为20∶1（mL∶g）、乙醇体积分数为80%、提取时间为1.5 h，所得的柚子皮中的总黄酮含量最高，为0.864%。 　　关键词：柚子皮；响应曲面法；总黄酮；提取工艺 　　中图分类号：S666.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2018）01-0104-05 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.01.027 　　Abstract： The optimum extracting parameters were investigated with response surface methodology with alcohol as the extraction agent. The results showed that the extracting rate of total flavonoids reached 0.864% at the optimal processing conditions when extraction temperature was 70 ℃，the ratio of extractant to material was 20∶1（mL∶g），volume percent of alcohol was 80%，and extraction time was 1.5 h. 　　Key words： pommel peel；response surface methodology；total flavonoids；extract process 　　?S酮类化合物是一类具有C6C3C6骨架的2-苯基色原酮或色原烷的衍生物[1]。柚子皮中含有丰富的黄酮类物质，通常在植物中与糖结合成苷，主要由柚皮苷、橙皮苷、柚皮素芸香苷等二氢黄酮类化合物构成，其中柚皮苷含量占80%以上[2]。黄酮类化合物具有多种生物活性和药用价值，如抗氧化、抗肿瘤、消炎、镇痛、抗菌、降低血液黏度、减少血脂和血栓的形成、防治胃溃疡等[3-6]。在食品工业上，可作为天然的食品添加剂、食用色素、风味改良剂和苦味剂[7]，又可合成高甜度、无毒、低能量的柚皮苷二氢查尔酮和新橙皮甙二氢查尔酮。此外，柚皮苷还可以用作合成柠檬素、鼠李糖等具有较高的药用价值的原材料[8]。长期以来，柚子主要用来鲜食，而占柚果总重量高达20%～30%的果皮，大多数作为废物被丢弃，既浪费资源又污染环境。从柚子皮中提取黄酮类物质可以有效开发利用柚子资源，对提高柚子产业的附加值具有重要意义。本研究应用乙醇浸提法，通过单因素试验和响应面优化，得出了柚子皮总黄酮提取的最佳工艺参数，以期为柚子产业开发提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与仪器 　　1.1.1 材料与试剂 马家柚，由江西瀛洲农业科技发展有限公司提供。芦丁标准品（生化试剂），乙醇、甲醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、三氯甲烷（均为分析纯），均购自广州齐云化学试剂有限公司。 　　1.1.2 仪器与设备 HH-4型数显恒温水浴锅（金坛市华城开元实验仪器厂）；722 N型可见分光光度计（上海奥谱勒仪器有限公司）；SHZ-CB型循环水式多用真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）；JJ200 B型电子天平（常熟市双杰测试仪器厂）；RV 10型旋转蒸发器（德国IKA集团）。 　　1.2 方法 　　1.2.1 芦丁标准曲线的绘制 精密称取芦丁标准品15.0 mg，加甲醇溶解并定容100 mL，得到浓度为150 μg/mL的芦丁标准溶液。分别准确吸取芦丁标准溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL移入10 mL具塞刻度试管中，先加30%乙醇溶液至5 mL，再加入5%NaNO2溶液0.3 mL，摇匀后静置6 min，加入10%Al（OH）3溶液0.3 mL，摇匀后静置6 min，再加入1.0 mol/L NaOH溶液2 mL，再用30%乙醇溶液定容至刻度，充分振荡后放置30 min。以30%乙醇为空白，用1 cm比色杯在波长510 nm下测定吸光度[9]。 　　1.2.2 黄酮类物质的提取 将柚子清洗除杂后，剥取其果皮，柚子皮经过挑选清洗，切割成1 cm2的小块，置于70 ℃的烘箱中干燥10 h，用小型高速粉碎机将其粉碎过100目筛。精确称取2.5 g制备好的柚皮粉，置于锥形瓶中。按照张怡等[10]的方法提取后作为待测液。 　　1.2.3 总黄酮的检测 用移液管吸取1 mL待测液，按标准曲线指标操作步骤于波长510 nm处进行吸光度测定。通过吸光度的测定，根据以下公式算出样品