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棉花TDNA标签雄性不育突变体遗传分析 　　摘 要:利用农杆菌介导T-DNA插入得到棉花雄性不育突变体,与野生型陆地棉(Gossypium hirsutum L.)Coker312杂交得到F??1代。F??1代植株出现了不育与可育两种性状的分离,分离比是1∶1。对F??1代进行形态学观察、卡那霉素和除草剂抗性鉴定、PCR扩增检测以及遗传学分析,证实雄性不育突变性状的表现与T-DNA插入共分离,从而认为突变是由T-DNA插入引起的显性杂合突变,这为利用T-DNA标签法进行雄性不育有关基因的克隆奠定了基础。 　　关键词:棉花;T-DNA;雄性不育突变体;遗传分析 　　中图分类号:S562.035.3文献标识号:A文章编号:1001-4942(2010)01-0022-04 　　 　　Genetic Analysis of Cotton Male Sterile Mutant ??by T-DNA Tagging 　　ZHANG YU-qin????1,2??, GAO Jun-ping??2, ZHANG Jin??3,WANG Fu-rong??2,ZHANG Jun??2 　　(1.College of Life Science, Shandong Normal University, Jinan 250014,China;??2.Shandong Subcenter of National Cotton Genetic Improvement Center of P.R.China/Shandong Cotton ??Research Center, Jinan 250100,China;3.College of Life Science, Shandong Agricultural University,Taian 271018,China) 　　Abstract A male sterile mutant by T-DNA insertion was crossed with a wild type upland cotton (Gossypium hirsutum L.) cultivar Coker312.The segregation ratio of male sterile to male fertile was 1∶1 in generation F??1.The results of morphological observation, kanamycin and herbicide resistance assay, PCR identification and corresponding genetic analysis showed that the male sterile was co-segregated with the T-DNA insertion.This male sterile mutant was considered as dominant heterozygous mutation caused by the T-DNA insertion,which would lay the basis for cloning the male sterile related genes of upland cotton by T-DNA tagging. 　　Key wordsUpland cotton;T-DNA;Male sterile mutant;Genetic analysis 　　在植物的基因克隆和功能分析研究中有许多种策略,利用突变体就是其中之一[1]。产生突变体的方法主要有理化诱变、T-DNA 插入、转座子插入等[2]。其中,农杆菌介导的T-DNA标签法[3]是目前研究植物功能基因组最有效、使用最广泛的手段,据统计有40%的拟南芥突变基因是用T-DNA标签法克隆的[4]。对这些基因的功能研究和利用将为提高作物的产量、品质、抗逆性提供更有效的途径。?? 　　棉花是世界上重要的经济作物,提高皮棉产量和纤维品质具有重要的经济效益。目前利用不同品种间的杂交优势是提高皮棉产量和纤维品质的主要手段。但大面积推广的组合,仍然以人工去雄授粉为主,制种成本过高已经成为棉花杂种优势利用的主要限制因素[5]。因此,利用基因工程手段克隆育性相关基因并加以利用创造理想的雄性不育系,就成为提高棉花产量和品质的新途径。?? 　　本研究利用野生型Coker312花粉与根癌农杆菌介导T-DNA插入得到的T??0代转基因棉花雄性不育突变体杂交,获得F??1代植株。在对F??1代植株进行育性观察、卡那霉素和除草剂抗性鉴定、PCR扩增检测的基础上,对突变体进行遗传分析,为下一步利用T-