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植物脂质转运蛋白研究 　　摘要：植物脂质转运蛋白(Lipidtransfer protein，LTP)是一类小分子碱性蛋白，占植物可溶性总蛋白的4％左右，目前已经在许多植物中克隆了LTP的编码基因。LTP是一种多功能的蛋白，除了被认为参与了磷脂在生物膜之间的运输外，LTP还在生物膜、角质和脂质的形成、植物的生殖发育以及信号的转导等生物过程中发挥了重要的作用，另外LTP作为一种食物过敏原和防御蛋白引起了科研人员越来越多的兴趣。本文综述了LIP的生物学功能，对LTP在农业上的应用前景做了展望。 　　关键词：脂质转运蛋白；过敏原；植物防御 　　中图分类号：Q946.1　文献标识号：A　文章编号：1001―4942(2009)08―0013―05 　　 　　脂质转运蛋白(upid transfer protein,LTP)，又被称为磷脂交换蛋白(Phosphdi，did@xchangeprotein，PIEP)，1975年首次在马铃薯块茎中发现，是一类分子量为7～11 ku的碱性小分子蛋白。植物中LTP含量高，占可溶性蛋白的4％左右，被认为是植物生命活动的一种重要活性蛋白。在1998年第五届国际植物病程相关蛋白专题研讨会上，LTP被列入植物病程相关蛋白(PRs)家族，并被命名为PR―14。LTP在植物中普遍存在，目前关于LTP在拟南芥、玉米、水稻、棉花、小麦、番茄、辣椒、油菜等作物和蔬菜中的研究比较深入。LTP的生物学功能呈现出多样性和复杂性，LTP基因也存在多态性。LTP基因在植物中属于一个小的多基因家族，从辣椒中已经分离到6个LTP基因，拟南芥中分离到15个LTP基因，水稻全基因组测序发现了53个非特异LTP基因，这些不同的LTP基因编码相似的蛋白，但是不同的LTP基因的表达模式不尽相同。除了被认为能在离体条件下参与磷脂、脂肪酸、糖脂等在生物膜之间的运输外，LTP还在生物膜、角质和脂质的形成，植物的生殖发育以及信号的转导等生物过程中发挥着重要的作用。作为一种防御蛋白，LTP在植物抵抗病原菌的侵染以及适应胁迫的环境中起着重要作用。因此，通过基因工程的手段过量表达LTP基因，增强作物的抗病和适应不良环境的能力，培育作物抗逆新品种，在实际生产中有重要意义。 　　 　　1　植物脂质转运蛋白 　　 　　1.1　脂质和植物脂质转运蛋白 　　脂质(1ipids)又称类脂，是生物体中一大类不溶于水而溶于有机溶剂的有机化合物，主要包括脂肪酸、磷脂、糖脂、类萜、类固醇、蜡等。其中磷脂、糖脂等是植物叶绿体、线粒体等细胞器生物膜的重要组成成分，而叶绿体、线粒体等并没有合成脂质的能力，Kader等在研究脂质是如何从合成之处转运到这些受体细胞器的过程中发现了脂质转运蛋白。LTPs在体外能够可逆地结合和转运多种疏水分子，如磷脂、糖脂、脂肪酸、乙酰辅酶A／类固醇、芳香衍生物及角质单体等脂类复合物。LTPs相对热、化学变性、酶的消化稳定性很高。LTPs蛋白的一级结构在不同物种中同源性不高，一般只有30％～70％氨基酸相同，但都具有LTP蛋白的结构和特性。LTPs N端一般都含有一个由21-29个氨基酸组成的信号肽序列，包含有8个半胱氨酸残基，由4个保守的二硫键按照固定模式排列。根据分子量的大小LTP可以分为两大类：LTP I和LTPⅡ，LTP I定位于细胞壁，分子量约为lO ku，由90～95个氨基酸组成，主要存在于植物地上部分的组织和器官；LTPⅡ分子量约为7 ku，由大约70个氨基酸组成，主要存在于根部。LTP I和LTPⅡ在N端都有一段信号肽序列，并且具有基本相同的二级结构。X射线晶体衍射和核磁共振研究表明LTP分子的三维结构具有一个向内的疏水腔，Kader推测LTPs疏水腔和磷脂分子酰基链的结合是实现磷脂在膜之间转运的基础。 　　 　　1.2　植物脂质转运蛋白在细胞中的定位 　　植物LTP是一类胞外分泌型蛋白，在细胞内的定位比较复杂。对拟南芥、水稻、蓖麻的免疫细胞学研究表明，LTP定位于细胞壁上，并可能在内质网形成后全部进人内质网腔，然后通过高尔基体分泌到细胞外。 　　 　　2　植物脂质转运蛋白基因及表达调控 　　 　　2.1　不同植物脂质转运蛋白基因的克隆和序列分析 　　1986年，Mundy等从玉米中扩增到650个碱基的cDNA序列，同源比对后被定义为a-淀粉酶抑制子。1988年Tchang等通过构建玉米幼苗的eDNA文库，筛选克隆了玉米LTP编码基因的部分eDNA序列，这是对LTP编码基因的首次明确报道，同时也证实Mundy等1986年克隆的a-淀粉酶抑制子编码序列也是LTP基因。此后拟南芥、水稻、烟草、油菜等的LTP基因部分编码序列相继报道。截止到2009年5月7日，在美国国立生物技术信息中心(NCBI)中登录