液相―子空间夹角判据联用分析饮料中柠檬黄和日落黄.docVIP

液相―子空间夹角判据联用分析饮料中柠檬黄和日落黄 　　摘要：通过液相-光谱联用，采用向量-子空间夹角判据进行计算，建立了饮料中柠檬黄和日落黄的分析方法。该方法先采用全波长光纤光谱仪建立不同浓度柠檬黄和日落黄的标准光谱数据库，以及市售碳酸型饮料和功能型饮料的样品光谱数据，再进行液相-光谱联用，得到扣除饮料中待测组分后的本底光谱数据；运用向量-子空间夹角判据进行计算饮料中柠檬黄和日落黄的含量。试验结果表明，在3～30 μg/mL内柠檬黄和日落黄的标准工作曲线线性关系良好（R2柠檬黄=0.997 6，R2日落黄=0.999 8）；向量-子空间夹角判据计算结果与高效液相色谱法测定结果比较，相对误差小于2.5%，样本加标回收率为89.5%～109.0%，RSD为4.9%～6.1%，该方法能满足定量分析需求。 　　关键词：向量-子空间夹角；多波长紫外-可见光谱；高效液相色谱；柠檬黄；日落黄 　　中图分类号：O657.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）17-4277-04 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.17.044 　　柠檬黄和日落黄是碳酸型饮料和功能型饮料中广泛添加的人工合成色素，由于添加过量色素会对健康造成不良影响，因此建立碳酸型饮料和功能型饮料中柠檬黄和日落黄的分析方法对食品安全检测具有重要的作用。 　　目前柠檬黄和日落黄的分析方法有高效液相色谱法[1]、紫外分光光度法[2]、多元线性回归分光光度法[3]、荧光光谱法[4]、薄层色谱扫描法[5]、示差脉冲极谱法[6]等。柠檬黄含量测定的国家标准（GB4481.1-2010）[7]和日落黄含量测定的国家标准（GB6227.1-2010）[8]都已颁布，各个行业可根据相关国家标准进行检测，也可在这些技术的基础上进行改进。随着仪器技术和信息技术的飞跃发展，分析化学已不再是依赖物质消耗手段来获取信息，而是逐步发展成为化学信息科学。姚志湘课题组提出了采用“向量-子空间夹角”判据逐步扣减混合光谱中的待测组分光谱，判断出待测组分恰好消失的“等当点”并计算混合体系中待测组分含量的方法。该方法已经运用于化妆品中对羟基苯甲酸酯、酱油中苯甲酸钠和山梨酸钾的测定[9，10]。本研究基于稳健的“向量-子空间夹角”判据，采用液相-光谱联用技术，建立了饮料中柠檬黄和日落黄的同时分析方法。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 　　Maya2000紫外-可见光纤光谱仪（美国海洋光学，扫描波长范围为190～1 100 nm）；LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津公司）；SZ-93自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）。柠檬黄（1934-21-0，大连美仑生物技术有限公司）；日落黄（2783-94-0，大连美仑生物技术有限公司）；乙腈（分析纯，安徽时联特种溶剂股份有限公司）；乙酸铵（分析纯，西陇化工）；饮料（市售）。 　　1.2 分析方法 　　1.2.1 标准光谱数据库的建立 分别精确称取0.149 5 g柠檬黄、0.150 3 g日落黄对照品于烧杯中，用二次蒸馏水溶解，分别转移定容至100 mL容量瓶中，得到1 495 μg/mL柠檬黄标准储备液和1 503 μg/mL日落黄标准储备液。根据多波长紫外可见光谱仪的响应范围，用二次蒸馏水依次稀释标准母液，得到一系列不同浓度的标准溶液，再分别测定一系列不同浓度的柠檬黄标准溶液，日落黄标准溶液的190～1 100 nm紫外可见光谱数据，经最小二乘回归得到多波长标准光谱数据（v）。 　　1.2.2 建立市售饮料样本光谱数据 取一定量的碳酸型饮料，超声20 min，然后用0.22 μm滤膜过滤。测定各饮料样品的190～1 100 nm紫外可见光谱（a）。 　　1.2.3 建立饮料本底光谱数据库 确定被测组分与本底组分完全分离的高效液相色谱条件，将液相与光谱联用，采集市售饮料样本经过色谱柱完全分离后的190～1 100 nm光谱数据，分别扣除功能型饮料和碳酸型饮料样品中与柠檬黄、日落黄具有相同出峰时间的光谱数据后，得到本底光谱数据（N）。 　　1.2.4 高效液相色谱条件 色谱柱为Agilent C18柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）；柱温为30 ℃；可见紫外光纤光谱仪扫描波长为190～780 nm。流动相梯度∶0.01～9.00 min，乙腈∶0.04 mol/L乙酸铵水溶液=10∶90（V/V）；9.01～20.00 min，乙腈∶0.04 mol/L乙酸铵水溶液=40∶60（V/V）；20.01～35.00 min，乙腈∶水=10∶90（V/V）；35.01～60.00 min，乙腈∶水=95∶5（V/V）。 　　1.2.5 “向量-子空间夹角判据