亚麻籽中转基因成分检测 实时荧光PCR法 征求意见稿.docVIP

ICS FORMTEXT FORMTEXT FORMTEXT FORMTEXT SN 中华人民共和国 FORMTEXT 检验检疫行业标准 FORMTEXT SN/T FORMTEXT XXXX— FORMTEXT XXXX FORMTEXT FORMTEXT 亚麻籽中转基因成分检测 实时荧光PCR法 FORMTEXT Real-time PCR method for the detection of the Triffid Flax（Event FP967） FORMTEXT FORMDROPDOWN FORMTEXT FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 SN/T XXXXX—XXXX PAGE \* MERGEFORMAT 5 前言 本标准本标准按照GB/T 1.1-2009起草。 本标准的附录A是规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：曹际娟、张莹、徐君怡、王金玲、王芳、贾金生。 亚麻籽中转基因成分检测 实时荧光PCR法 范围 本标准规定了转基因亚麻籽（FP967品系，又称作CDC Triffid）及其加工产品中转基因成分检测的实时荧光PCR方法。 本标准适用于转基因亚麻籽（FP967品系，又称作CDC Triffid）及其加工产品中转基因成分的定性检测。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 19495.1 转基因产品检测 通用要求和定义 GB/T 19495.2 转基因产品检测 实验室技术要求 GB/T 19495.3 转基因产品检测 核酸提取纯化方法 GB/T 19495.7 转基因产品检测 抽样和制样方法 术语、定义和缩略语 3.1 转基因transgene 指将物种本身不具有的、来源于其它物种的功能DNA序列，通过各种导入手段，使其在该物种中进行表达，以便该物种获得新的品种特征。 3.2 内源基因endogenous gene 在栽培的物种中拷贝数恒定的、不显示等位基因变化的基因。该基因可用于对基因组中某一目的基因的定量分析。 3.3 缩略语 Ct值：C：Cycle，t：threshold，每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。 EDTA：ethylene diaminetetraacetic acid，乙二胺四乙酸。 Tris：tris (hydroxymethyl) aminomethane，三（羟甲基）氨基甲烷。 TE：Tris-HCl、EDTA缓冲液。 PCR：polymerase chain reaction，简称PCR。 DNA：deoxyribonucleic acid，脱氧核糖核酸。 dNTP：deoxyribonucleoside triphosphate，脱氧核苷三磷酸。 dATP：deoxyadenosine triphosphate，脱氧腺苷三磷酸。 dCTP：deoxycytidine triphosphate，脱氧胞苷三磷酸。 dGTP：deoxyguanosine triphosphate，脱氧鸟苷三磷酸。 dUTP：deoxyuridine triphosphate，脱氧尿苷三磷酸。 dTTP：deoxythymidine triphosphate，脱氧胸苷三磷酸。 Taq酶：DNA 聚合酶。 UNG酶：uracil-N-glycosylase，尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶。 NOS： terminator of nopaline synthase gene，胭脂碱合成酶基因终止子。 SAD：stearoyl-acyl carrier protein desaturase硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶 NOST-Spec：NOS terminator and spectinomycin resistance gene. NOS终止子-奇放线菌素抗性基因。奇放线菌素抗性基因是FP967品系转基因亚麻籽独有基因，目前未在其他任何转基因作物中使用。 防污染措施 检测过程中防止交叉污染的措施按照GB/T 19495.2 中的规定执行。 抽样和制样 取样 按照GB/T 19495.7 中规定的方法执行。 制样 称取约50 g亚麻籽样品，经干热灭菌（150 ℃干热预处理2