独活寄生汤通过miRNAs调控炎症性骨关节炎软骨细胞功能改变机制探讨.docVIP

独活寄生汤通过miRNAs调控炎症性骨关节炎软骨细胞功能改变机制探讨 　　【摘 要】 软骨细胞功能改变在骨关节炎病理过程中发挥重要的调控作用。炎症因子是介导骨关节炎软骨退变的主要因素，其表达与MicroRNAs （miRNAs）密切相关。miRNAs是一类在转录后水平调控基因表达的非编码蛋白的RNA分子，参与了软骨细胞增殖、分化，以及合成与分解代谢等生物学过程。中医药治疗骨关节炎独具特色，能够靶向调节miRNAs介导的炎症反应，独活寄生汤长期运用于临床，能有效抑制关节炎症，其药效机制可能是通过调节骨关节炎软骨细胞中miRNAs的表达，以及改变miRNAs和炎症因子之间的相互协调作用而发挥对炎症性骨关节炎的治疗作用。多层次、多角度地探讨独活寄生汤的作用机制及药效物质基础，可为阐明独活寄生汤治疗炎症性骨关节炎提供新的研究思路。 　　【关键词】 骨关节炎；独活寄生汤；软骨细胞；miRNAs；炎症 　　doi：10.3969/j.issn.2095-4174.2015.09.016 　　骨关节炎（osteoarthritis，OA）是多种生物因素与机械损伤因素相互作用所致生物力学紊乱而引起的病理改变[1]，并以软骨退变为其根本病理变化。软骨细胞是软骨中的唯一细胞，分散于细胞外基质（extracellular matrixc，ECM）中，对维持软骨的完整性以及软骨的负重功能具有重要作用。软骨细胞功能退变，是引起OA的重要因素。独活寄生汤能够有效改善OA软骨的炎性症状[2]，但其具体机制不甚明了。现就miRNAs与炎症性OA的关系及独活寄生汤调控炎症性OA的机制进行探讨。 　　1 miRNAs调控OA软骨细胞功能的机制 　　miRNAs是一类内源性、非编码蛋白的单链小RNA家族，由20～22个核苷酸组成，在转录后水平调节基因的表达，通过调节细胞的增殖、分化等影响细胞的功能[3]。目前研究发现，miRNAs表达广泛，在OA软骨细胞增殖、分化，以及合成与分解代谢等过程中发挥重要的调控作用[4]。 　　1.1 miRNA调控软骨细胞的增殖 miRNAs能够上调Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达，促进软骨基质的合成和软骨细胞的增殖。miR-200a特异性地在胚胎发育过程中表达，研究表明，miR-200a能够下调软骨中促软骨细胞形成基因的表达，而转染miR-200a抑制剂到发育中的下颌髁突软骨中，则促进了软骨的形成，提示miR-200a可能通过调控软骨细胞的增殖，抑制早期软骨形成[5]。将双链miR-21转染到软骨细胞后，促进了软骨细胞的增殖以及软骨基质的合成[6]。 　　1.2 miRNA调控软骨细胞的分化 组蛋白脱乙酰酶（histone deacetylase，HDAC）4特异性地在非肥大软骨细胞中表达，并且通过抑制转录因子Runx2的激活调控软骨细胞的肥大分化。研究证实，HDAC4是miR-140的下游靶标之一[7]，而miR-140在促进软骨细胞分化中的关键作用已被证实[8]。因此，miR-140可通过抑制HDAC4的表达，从而消除HDAC4对转录因子Runx2的抑制作用，进而促进软骨细胞的肥大分化。miR-145可直接作用于其靶标SOX-9，从而调控软骨细胞分化的早期阶段[9]。miR-145还可以特异性地降低OA软骨ECM中Col2a1基因、蛋白聚糖和miR-140的表达，同时上调软骨细胞中Runx2和基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinases-13，MMP-13）的表达水平[10]。此外，miR-221也被证实可以促进软骨细胞的分化和软骨ECM的合成[11]。 　　1.3 miRNA调控软骨细胞的凋亡 软骨细胞凋亡是引起OA的重要分子事件，众多miRNAs参与关节软骨细胞的凋亡过程。白细胞介素-1（interleukin-1，IL-1）诱导的OA模型中，关节软骨细胞凋亡的数量随着miR-34a水平的增加而增加，表明miR-34a可能与软骨细胞的过度凋亡有关，当使用miR-34a抑制剂或者沉默miR-34a后，软骨细胞凋亡的现象出现明显的改善[12]。IL-1β介导的OA模型中，miR-145呈高表达，miR-145通过调控Smad3继而影响后者下游基因的表达，最终导致OA软骨细胞ECM的降解[13]。与之相反的是，在相同OA模型中，miR-127-5p的表达量降低并伴随MMP-13的表达量上升。而过表达的miR-127-5p则可以抑制MMP-13的产生，并且减缓OA软骨退变进程[14]。miR-27a通过减少MMP-1和IGFBP5的合成，抑制软骨细胞凋亡，从而间接调控OA的病理进程[15]。 　　2 miRNAs调控炎症性OA的机制 　　2.1 炎症介质参与OA软骨细胞功能改变的机制 炎症