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猪瘟病毒结构蛋白研究进展 　　摘要：对猪瘟病毒结构蛋白进行了综述，进一步弄清了猪瘟病毒的结构，为猪瘟病毒的研究提供理论支撑。 　　关键词：猪；猪瘟病毒；研究进展 　　中图分类号：S852.65+1 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2015）12-0007-03 　　猪瘟由猪瘟病毒（classical swine fever virus， CSFV）引起，是在猪间流行的一种重要传染病。患猪会出现运动失调、后肢无力、高热、皮肤出现出血点或出血斑等症状[1]。该病致死率高且难以清除，隐性感染或治愈猪通常会成为潜在感染源。在被感染猪的多个器官，如扁桃体、皮肤、淋巴、脾脏等，都能够检测出猪瘟病毒。据统计，我国每年因猪瘟而造成的损失高达100亿元以上[2]。 　　猪瘟造成的危害巨大，而其病原致病性，主要是通过病毒基因组RNA所编码的蛋白实现的。研究表明，CSFV的基因组RNA主要由3部分组成，分别为3′非编码区（3′-untranslated region， 3′UTR）、5′非编码区（5′-untranslated region， 5′UTR）以及一个较大的开放阅读框（ORF）[3]。在ORF编码产生的蛋白中，结构蛋白与病毒致病、免疫，以及防控疫苗研制等方面关系最为密切。本对CSFV结构蛋白的研究进展进行介绍，为探明病毒致病机理，更好防控猪瘟提供理论依据。 　　1 ORF 　　CSFV的ORF位于病毒的5′UTR与3′UTR之间。病毒基因组RNA全长约为12.3 kB，其大部分为ORF。该ORF编码一个由3 898个氨基酸所构成的多聚蛋白（polyprotein，PPro）。该蛋白能够被宿主细胞的信号肽酶及病毒自身合成的蛋白酶所识别、加工[4]，进而被分解为12种蛋白质。按照编码各种蛋白质基因的顺序，12种蛋白分别为Npro、C、Erns（E0）、E1、E2、P7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A及NS5B。其中C、Erns、E1及E2为病毒结构蛋白[5]，其余8种为非结构蛋白。结构蛋白与非结构蛋白共同作用，参与病毒复制、传播等过程。 　　2 CSFV结构蛋白 　　2.1 C蛋白 　　CSFV C蛋白，也称核衣壳蛋白C。编码该蛋白的基因大小为192 bp，是由PPro经宿主细胞中的信号肽酶加工而成。构成该蛋白的氨基酸具有较强的亲水性。序列分析发现，组成该蛋白的多为带正电荷的精氨酸及赖氨酸残基，推测可能与基因组RNA结合作用有关[6]。最近的研究发现，C蛋白在黄病毒科中的丙型肝炎病毒中，具有基因转录调控因子的作用。C蛋白能够有效的抑制基因组中核糖体结合位点的活性，使病毒的复制、翻译过程受到抑制，降低病毒的增殖效率，呈现持续感染的状态。但C蛋白在CSFV中是否存在同样功能尚不清楚。 　　2.2 Erns 　　Erns蛋白存在于PPro的268～494位，由227个氨基酸残基构成，分子量为44～48 kDa之间。结构分析发现，该蛋白具有9个潜在的糖基化位点，在病毒粒子中，通常以同源二聚体的形成存在[7]，二聚体分子量约为100 kDa。被感染的细胞能够分泌大量的Erns蛋白。 　　对Erns功能研究发现，该蛋白除是一种囊膜蛋白外，同时具有核糖核酸酶活性，对尿嘧啶具有较高专一性。在pH 6.0～6.5时活性最高，Mn2+与Zn2+为酶活性强抑制剂，Ca2+与Mg2+对其抑制作用较弱。该蛋白具有较高的热稳定性，50～60 ℃时活性最强，在65 ℃时仍能够保持75%的酶活性，而在37 ℃时的活性能够保持在86%左右[8]。 　　Erns具有免疫抑制活性，同时具有一定神经毒性及抗蠕虫能力。蛋白的297位及346位氨基酸为酶活性必需氨基酸，该位点氨基酸发生突变后，Erns将失去核糖核酸酶活性，但仍能与相应抗体结合。研究表明，Erns的核糖核酸酶活性在CSFV复制过程中具有重要作用，与自然宿主长期带毒及隐性感染有关。体外试验发现，Erns对不同种属的淋巴细胞蛋白合成均有较强的抑制作用，尤其是对人、猪、羊和牛的淋巴细胞增殖，能够完全抑制其增殖[9]。在Erns蛋白346位的组氨酸对CSFV的致病性具有决定性作用，当该位点发生氨基酸突变时，病毒的致病力将完全消失，突变病毒虽能够在细胞中稳定传代，但产毒量显著降低。在病毒侵入细胞的过程中，Erns也发挥了重要作用。研究表明，Erns蛋白能够与位于细胞表面的膜蛋白相互作用。在猪肾细胞试验中发现，CSFV与肾细胞结合是通过Erns蛋白与细胞表面中的硫酸乙酰肝素相互作用而实现的[10]。 　　Erns蛋白能够刺激机体产生对CSFV的免疫能力。由于编码Erns蛋白的核苷酸序列保守性相对较高，因此Erns可作为免疫防控猪瘟的靶蛋白。Erns的抗原决定簇可分为3个区