紫外可见光谱法探讨白藜芦醇稳定性和反应性能.docVIP

紫外可见光谱法探讨白藜芦醇稳定性和反应性能 　　摘要：为了考察白藜芦醇在多种体系中的稳定性和反应性能，采用紫外可见分光光度法定性研究温度、时间、紫外线和溶剂等对白藜芦醇稳定性的影响，跟踪白藜芦醇分别与酸碱、H2O2、DPPH?、铜离子的反应。结果表明：温度、时间、紫外线等都不同程度影响白藜芦醇的稳定性，紫外可见光谱跟踪到了酸碱、H2O2、DPPH?和白藜芦醇的反应。 　　关键词：白藜芦醇；稳定性；反应性；紫外可见分光光度法 　　中图分类号： TS201.2 文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2016）11-0302-03 　　研究发现，最初从毛叶藜醇中发现的白藜芦醇（resveratrol）是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物，具有抗氧化、抗炎、抗癌、心血管保护以及神经系统保护等多种生理功效，同时在功能食品和化妆品方面具有很好的应用价值[1]。但是天然多酚类化合物不稳定，曹庸等曾经研究了纯白藜芦醇在加热和光照下的稳定性，并用HPLC法测定了虎杖中白藜芦醇含量[2]。郑湘娟等用HPLC 法考察了在提取液中白藜芦醇的稳定性，初步获得了能够基本保持白藜芦醇稳定的最佳提取工艺条件[3]。本试验拟采用紫外可见分光光度法，更全面地定性研究不同条件下白藜芦醇的稳定性及其与酸碱、H2O2、DPPH?、铜离子等的反应。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与仪器 　　白藜芦醇（南京广润生物生物制品，98%），DPPH?（Sigma公司），无水乙醇，30%过氧化氢，盐酸，氢氧化钠，甲醇、乙腈、乙酸乙酯、四氯化碳、三氯甲烷、己烷等药品皆为国产分析纯试剂。 　　紫外可见分光光度计（型号：UV-1801），十万分之一天平（CPA 225D），电热恒温水浴锅，三用紫外分析仪（WFH-203），上海精科实业有限公司。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 浓度对白藜芦醇的影响 准确称取白藜芦醇 0.042 0 g 于250 mL的容量瓶中，用无水乙醇定容，得 168 μg/mL 的白藜芦醇储备液。用移液管分别移取白藜芦醇储备液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL于25 mL的比色管中，用无水乙醇定容至10 mL配成浓度为1.68、3.36、5.04、6.72、8.40、10.08 μg/mL的梯度溶液，用UV-Vis光?V仪进行光谱检测。 　　1.2.2 温度对白藜芦醇溶液的影响 分别吸取浓度为 168 μg/mL 的白藜芦醇储备液0.2 mL于6支25 mL比色管中，用无水乙醇定容到10 mL，配成等浓度的溶液，分别放入冰箱（4 ℃）、室温（20 ℃）、40、60、80 ℃温度的水浴锅中各 1 h 后取出，用UV-Vis光谱仪进行光谱检测。 　　1.2.3 时间对白藜芦醇溶液的影响 分别吸取浓度为 168 μg/mL 的白藜芦醇储备液0.2 mL于7支25 mL比色管中，用无水乙醇定容到10 mL，将其中6支比色管放入80 ℃水浴锅中，分别在0.5、1.0、2.0、3.0、4.5、5.5 h后扫描其紫外可见吸收曲线。 　　1.2.4 紫外灯照射对白藜芦醇溶液的影响 分别吸取浓度为168 μg/mL的白藜芦醇储备液0.2 mL于9支25 mL比色管中，用无水乙醇定容到10 mL，将其中8支比色管放在 1.34 mW/cm2 紫外光线强度的紫外灯下分别照射10、20、30、50、70、110、180 min后扫描其紫外可见吸收曲线。 　　1.2.5 溶剂对白藜芦醇溶液的影响 分别称取白藜芦醇0.000 25 g，转入25 mL比色管中，分别加入水、甲醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯、四氯化碳、三氯甲烷、己烷定容至25 mL，配制成浓度为10.0 μg/mL的溶液，用UV-Vis光谱仪进行光谱检测。扫描时不同溶剂用不同的参比。 　　1.2.6 酸碱与白藜芦醇溶液的反应 分别向2个比色管中移入0.2 mL的168 μg/mL白藜芦醇储备液，用无水乙醇定容至10 mL。向其中一支比色管中逐滴滴加0.01 mol/L的盐酸，振荡，逐次进行紫外可见光谱扫描。pH值从4.6降低到3。向另一支比色管中逐滴滴加0.01 mol/L的氢氧化钠，振荡，逐次进行紫外可见光谱扫描。pH值从4.6上升到9。 　　1.2.7 H2O2与白藜芦醇溶液的反应 移取168 μg/mL白藜芦醇储备液0.2 mL于25 mL比色管中，用无水乙醇定容至10 mL，不断滴加0.04 mol/L的过氧化氢溶液，反应5 min，用UV-Vis光谱仪进行光谱检测。 　　1.2.8 白藜芦醇与DPPH?的反应及清除率效应 移取 168 μg/mL 白藜芦醇储备液0.2 mL于25 mL比色管中，用无水乙醇定容至10 mL，不断滴加0.176