精子染色质结构与不明原因复发性流产相关性研究.docVIP

精子染色质结构与不明原因复发性流产相关性研究 　　【摘要】目的：分析精子染色质结构与不明原因复发性流产的关系。方法：选择2013年4月至2014年4月期间收治的40例不明原因复发性流产孕妇的配偶组成实验组，同时选择40例正常男性组成对照组。对两组男性的精液进行常规检查、精子染色质扩散试验（sperm chromatin dispersion，SCD）实验以及苯胺蓝染色实验，分析两组男性精液的常规数值、DNA完整性以及核蛋白组型，分析不明原因复发性流产与精子染色质结构的关系。结果：经过检测，实验组男性精液的pH、精液体积与对照组比较无差异性（P005），但实验组精液的密度、活动率、活动力均显著低于对照组，畸形率显著高于对照组（P005）；经过分析，实验组男性的SCD大光晕与中光晕的比值显著小于对照组，小光晕、无光晕以及DFI值显著高于对照组（P005）；经过苯胺蓝染色实验分析，实验组男性苯胺兰染色阳性例数以及阳性比例均显著高于对照组（P005）。结论：男性精子染色质DNA异常可能是不明原因复发性流产发生的原因之一，需要进一步深入的科学研究。 　　【关键词】精子染色质；精子染色质扩散试验；苯胺蓝染色实验；不明原因复发性流产【中图分类号】R6【文献标志码】A 　　妊娠不足28周、胎儿体重不足1000g而终止妊娠者称为自然流产，连续2次或2次以上的自然流产则成为复发性流产（recurrent spontaneousabortions，RSA）[1]。RSA发生的病因有生殖道解剖畸形、内分泌紊乱、自身免疫性疾病等，但约有50%的RSA患者的发病原因不明，临床上称之为不明原因性复发性流产（Unexplained recurrent spontaneous abort ions URSA）[2]。URSA是临床上较为常见的且难以治疗的不孕症，影响到了患者的身心健康，甚至造成患者家庭的和睦与社会稳定。URSA的发生与男性的精子质量密不可分，但是关于男性精子质量与URSA的关系的研究性文章较少。本文的目的分析精子染色质结构与不明原因复发性流产的关系。 　　1临床资料与方法 　　11临床资料 　　选择2013年4月至2014年4月期间收治的40例不明原因复发性流产孕妇的配偶组成实验组，同时选择40例配偶已正常生育的男性组成对照组。其中实验组男性年龄23～48岁??平均年龄（345±45）岁，文化程度小学15例，中学18例，大学7例。对照组年龄24～47岁，平均年龄（335±35）岁，文化程度小学14例，中学17例，大学9例。两组患者在年龄、性别以及文化程度等临床资料无差异性（P005）。 　　12病例纳入标准 　　（1）夫妇双方染色体均正常；（2）女方年龄38 岁、≥3 次的自然流产史；（3）排除影响男性生育功能的放化疗史、创伤史、精索静脉曲张史、慢性疾病或服用药物史的患者；（4）排除女方身体异常造成RSA的男性；（5）入组患者均签署知情同意书。 　　13检测方法[3] 　　采用国产WLJY-9000伟力彩色精子质量检测系统软件及计算机操作，对精液的pH、精液体积、密度、活动率、活动力、畸形率进行检测。《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》为正常精液参照标准；采用SCD实验检测男性DNA的完整性，具体操作严格按照说明进行，根据光晕与精子头部横径的比例，粗分为大、中、小和无光晕4个等级。大和中光晕表示精DNA完整无碎片，小和无光晕表示精子DNA断裂为碎片。小光晕：精子头直径≤1/4。中光晕：精子头直径1/4且2/3。DNA断裂指数（DFI）=小光晕+无光晕。采用苯胺蓝染色实验进行男性精子核蛋白组型的检测，严格按照实验组操作步骤进行操作。 　　14统计学处理 　　数据处理软件包为SPSS160，计量资料比较采用t值检验，计数资料比较采用χ2检验，P005表示有显著性差异。 　　2结果 　　21两组患者精液常规检查结果的分析 　　经过检测，实验组男性精液的pH、精液体积与对照组比较无差异性（P005），但实验组男性精液的密度、活动率、活动力均显著低于对照组，畸形率显著高于对照组（P005）。见表1。 　　22两组患者精子DNA完整性检查的分析 　　经过分析，实验组男性的SCD大光晕与中光晕的比值显著小于对照组，小光晕、无光晕以及DFI值显著高于对照组（P005）。见表2。 　　23两组患者精子核蛋白组型检测结果的分析 　　经过苯胺蓝染色实验分析，实验组男性苯胺兰染色阳性比例均显著高于对照组（P005）。见表3。 　　3讨论 　　URSA是指妊娠28周前排除遗传、解剖、内分泌、感染及自身免疫功能异常等病因的和同一性伴?H连续发生2次或2次以上的自然流产[4，5]。近年的生殖免疫学研究证明：2次