高衣分染色体片段导入系IL101衣分形成研究.docVIP

高衣分染色体片段导入系IL101衣分形成研究 　　摘 要：以高衣分染色体片段导入系IL-10-1以及背景亲本陆地棉遗传标准系TM-1和供体亲本海岛棉H7124为试验材料，用扫描电镜观察了纤维初始发育的特征，测定了单粒种子成熟纤维总重量、纤维平均长度、单位长度纤维重量和纤维总根数并分析了IL-10-1高衣分形成的原因。扫描电镜观察的结果表明，纤维突起启动的早晚与基因型关系密切，纤维伸长起始的早晚与衣分关系密切，较早的纤维伸长启动有利于高衣分的形成。高衣分导入系IL-10-1单粒种子成熟纤维总质量、纤维平均长度、单位长度纤维质量和纤维总根数均极显著高于TM-1。相关性分析和通径分析结果证明：纤维总质量、单位长度纤维质量和纤维平均长度与衣分关系密切。因此，材料较早的启动纤维突起和开始纤维伸长利于优良品质和高衣分的形成。 　　关键词：衣分；纤维初始发育；扫描电镜；衣分形成 　　中图分类号：S562.01 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2012）10-0025-06 　　衣分是指籽棉中纤维重量占籽棉重量的百分率，是棉花纤维产量的三要素之一。纤维产量与纤维的发育密切相关。棉纤维是由胚珠外珠被表皮细胞发育成的一种单细胞结构，其发育过程包括四个阶段：纤维细胞的分化启动（initiation）、纤维细胞的伸长或初生壁的合成（cell elongation）、次生壁的合成（cell wall deposition）与沉积以及脱水成熟。每个时期各有特点，但它们之间并没有截然的区分界限，并存在某些重叠现象[1～3]。在开花当天至开花后3 d突起的纤维细胞发育成有纺纱价值的长绒（lint），开花后4～10 d突起的纤维细胞发育成短绒（fuzz）。Li等研究发现开花当天的纤维突起密度和开花后1 d的纤维伸长密度均与衣分和衣指正相关，与铃重和籽指负相关。棉花纤维的初始发育与分化过程与纤维产量性状衣分、籽指关系密切[4]。棉花纤维的初始发育与分化对衣分的形成具有重要的意义。 　　单粒种子成熟纤维总质量、纤维平均长度、单位长度纤维质量、纤维总根数是构成衣分的4个重要性状[5]，这4个性状对于研究不同衣分材料纤维的分化和发育机理以及衣分的形成具有重要的意义。 　　染色体片段导入系（CSILs），又称染色体片段代换系（CSSLs），是通过高代回交结合分子标记辅助选择建立的一套覆盖全基因组的、相互重叠的染色体片段代换群体[6]。染色体片段导入系具有片段单一、背景一致、遗传稳定等特点，能够大大降低甚至消除供体材料遗传背景的影响[7]。 　　试验以高衣分染色体片段导入系IL-10-1和背景亲本TM-1、供体亲本H7124为材料，排除了遗传背景对研究结果的干扰，对纤维初始发育过程超微结构的差异进行了扫描电镜观察和比较，并研究了单粒种子衣分相关性状与衣分的关系，旨在揭示IL-10-1高衣分的形成原因，为研究棉花高衣分的形成机理提供借鉴和参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　2011年4月底在德州种植陆地棉遗传标准系TM-1、海岛棉H7124，以及根据2009、2010两年鉴定结果选择的表现稳定的高衣分导入系IL-10-1。IL-10-1为两条片段的导入系，一条导入片段位于A10染色体0.0～12.8 cM位置，另一条导入片段位于D10染色体0.0～12.4 cM位置[8]。每个材料种植5行，行长10 m，田间管理同常规大田。在8月上旬将开花前1 d 的蕾用线扎住花冠，使其自交，并挂牌标记开花日期以备按日龄采样。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 衣分、衣指、籽指的测定 2011年10月，分别收取相同材料第一果枝第一、二果节正常成熟棉铃30个，重复3次，置于网袋中晒干，用皮辊轧花机轧花，分别测定衣分、衣指、籽指。用SAS 8.0软件进行差异显著性分析。 　　1.2.2 纤维初始发育时期胚珠的扫描电镜观察以及纤维突起、伸长密度研究 在8月上旬开花盛期9时，用镊子剥取3个材料第一果枝第一、二果节开花前1 d、开花当天、开花后1 d、开花后2 d、开花后3 d棉铃，在冰盒上用镊子剥取胚珠，每个处理剥取20～30粒，置于3%磷酸戊二醛缓冲液中0～4℃固定2 h以上，再经pH 7.4的磷酸盐缓冲液（PBS缓冲液）冲洗，饿酸（H2OsO4）固定，PBS缓冲液冲洗，乙醇梯度脱水，醋酸异戊酯置换，CO2临界点干燥，离子溅射喷金镀膜，最后在JSM-6610LV （Hitachi，Japan） 扫描电镜下观察并照相。 　　1.2.3 单粒种子成熟纤维总质量、平均纤维长度、单位长度纤维质量和纤维总根数的测定 2011年10月，分别收取相同材料第一果枝第一、二果节正常成熟棉铃，用于测定单粒种子纤维总质量、平均纤维长度、单位长度纤维质量