黄芪与三七有效成分配伍对动脉粥样硬化大鼠模型TIMP1表达影响.docVIP

黄芪与三七有效成分配伍对动脉粥样硬化大鼠模型TIMP1表达影响 　　摘要：目的利用高脂饲料诱发动脉粥样硬化(AS)大鼠模型，观察益气活血代表中药黄芪、三七有效成分黄芪槲皮素(Que)和三七总皂甙(tPNs)抗AS的作用，探讨二者单独使用及不同比例组方对AS大鼠模型血清基质金属蛋白酶特异性抑制物(TIMP－1)表达的影响。方法将64只雄性健康wistar大鼠随机分为正常组和造模组，正常组10只喂养普通饲料，造模组54只喂养高脂饲料。造模成功后，造模组大鼠停喂高脂饲料改为普通饲料喂养，剩余48只造模组大鼠再随机分为6组，用不同药物干预灌胃30 d后，取各组大鼠血清用酶联免疫吸附试验(ELISA)测血清TIMP－1的表达。结果Que、tPNS单用以及2:1组方、3:1组方皆可增加TIMP－1表达，以3:1组方为最优组。结论Que、tPNS单用及2:1、3:1组方皆可增加TIMP－1表达，联合用药比单独应用抗AS效果好，并在一定范围内随着益气药物剂量增加，抗AS作用增强。这可能是益气活血法抗AS作用机制之一。 　　关键词：动脉粥样硬化；槲皮素；三七总皂甙；基质金属蛋白酶抑制物 　　中图分类号：R543.5 R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672―1349(2007)04―0326―03 　　 　　动脉粥样硬化(AS)是严重危害人类健康的因素之一，其形成涉及许多方面，目前大量研究已证实基质金属蛋白酶　(MBPs)及其特异性抑制物(TIMPs)在AS的发生发展过程中起着十分重要的作用。本实验通过建立大鼠AS模型，来研究黄芪槲皮素(Que)和三七总皂甙(tPNS)单用及2:1、3:1组方对大鼠血清TIMP－1表达的影响。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1.1 实验动物 雄性Wistar大鼠64只(由山西医科大学实验动物中心提供，二级)，体重(180±20)g。各组动物单笼饲养，自由饮水。 　　1.2 实验用药品、试剂 槲皮素粉剂中西安华琦科技有限公司提供；三七总皂甙粉剂由云南玉溪市维和制药有限公司提供；川芎嗪片剂由预新国际龙源药业有限公司提供；大鼠TIMP－1定量ELISA试剂盒购内上海森雄科技实业有限公司；其余试剂均为国产分析纯。 　　　1.3 主要仪器 Novapath TM全自动酶标仪(日本BIO－RAD公司生产)，医用低温冰箱(青岛海尔公司生产)，高速低温离心机(德国Eppendorf公司生产)，均由山西医科大学实验中心提供。 　　1.4 动物模型制作及分组 　　1.4.1 AS模型的建立 健康雄性Wistar大鼠64只，适应性饲养1周后，按体重编号，完全随机分组，正常组l0只，造模组54只，均自由进食、进水。正常组喂养普通饲料，造模组喂养AS饲料(蛋黄粉10％、猪油5％、猪胆盐0.5％、基础饲料84.5％)，均喂养3个月。3个门后随机处死2只正常组大鼠，6只造模组大鼠，以观察造模是否成功。 　　1.4.2　实验分组及药物干预　造模成功后，AS饲料组大鼠均停喂AS饲料，改为普通饲料喂养，剩余48只大鼠，再随机分为6组，每组8只。槲皮素治疗组：槲皮素100 mg/(kg?d)；三七总皂甙治疗组：二七总皂甙I00 mg/(kg?d)；槲皮素、三七总皂甙2:1组(2:1组)：槲皮素100 mg/(kg?d)、三七总皂甙50 mg/(kg?d)；槲皮素、三七总皂甙3：1组(3:l组)：槲皮素150 mg/(kg?d)、三七总皂甙50 mg/(kg?d)；川芎嗪对照组：川芎嗪200 mg/(kg?d)；正常组：纯净水4 mL/d；模型组：纯净水4 mL/d。各组均灌胃30d。 　　1.5　标本采集与检测各组大鼠于药物干预30 d后，禁食、禁水12 h，从腹主动脉取血每只2 mL，注入试管中，2 000 r／min离心15 min，分离出血清，分别做好标记，一40℃冷冻，用于检测血清TIMP－l的表达。血清HMP－1的检测采用ELISA法，严格按照说明进行检测。 　　1.6 统计学处理计量资料以均数±标准差 　　表示，使用SPSS 11.5统计软件进行统计分析，采用方差分析和SNK－q检验。 　　 　　2　结　果 　　 　　2.1 药物治疗后各组大鼠血清TIMP－1表达量比较与模型组相比，各干预药物及川芎嗪对照组均可增加AS大鼠血清TIMP－1的表达，3:1组血清TIMP－l表达量高于川芎嗪组及各药物干预组(P＜0.05或P＜0.01)；槲皮素治疗组和三七总皂甙组对增加AS大鼠血清TIMP－1表达量无统计学意义(P＞0.05)，故不能认为槲皮素和三七总皂甙对促进AS大鼠血清TIMP－1表达量不同；可认为槲皮素、三七总皂甙、3:1组方、2:1组方与川芎嗪均可增加AS大鼠血清TIMP－1的