GSTM1基因多态性和鼻咽癌遗传易感性研究进展.docVIP

GSTM1基因多态性和鼻咽癌遗传易感性研究进展 　　【摘要】 目的 分析GSTM1（谷胱甘肽转移酶基因）的多态性与NPC（鼻咽癌）遗传易感性的关系。 方法 选取我院2009年2月――2012年2月收治的78例NPC患者作为观察组。另选取78例与观察组患者同民族，同性别，同居住地，年龄相近，无血缘关系的正常人群作为对照组。应用内参照（PRC）法检验156例患者GSTM1的基因型。 结果 观察组GSTM1基因空白基因型概率为65.38%；对照组空白基因型概率为44.87%；与对照组相比，观察组空白基因型概率更高（P=0.01），OR=1.840，95%CI=1.045-3.146。其中，鳞癌患者空白基因型概率为67.61%；腺癌患者空白基因型概率为42.86%；与腺癌患者相比，鳞癌患者空白基因型概率更高（P0.05，x2=3.26）。对照组和观察组中吸烟人群中空白基因型概率比较，差异具统计学意义（P0.01，x2=12.85）。 结论 GSTM1的多态性不仅与NPC遗传易感性相关，还与NPC病理类型密切相关。此外，吸烟者患NPC的危险性更大。 　　【关键词】 GSTM1；基因多态性；易感性；鼻咽癌 　　doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.03.748 文章编号：1004-7484（2014）-03-1781-02 　　肿瘤的发展及发生是一个多步骤，多基因的病理过程。它受环境和遗传等多种因素共同影响。环境中的化学致癌物质进入人体后，因人体内代谢酶基因的多态性和表达差异，不同个体形成不同内暴露的剂量，机体基因随之改变，机体细胞分化及细胞增殖受到影响，细胞癌变，最终造成个体患癌易感性的差异。谷胱甘肽转移酶，它参与人体致癌物质的代谢和解毒过程。若GSTM1基因发生突变，则可能影响谷胱甘肽转移酶的活性。因此，GSTM1的多态性和肿瘤的易感性密切相关。NPC在我国南方的发病率比较高。NPC属恶性肿瘤。它的发生及发展与遗传，环境等因素密切相关。吸烟是NPC的重要危险因素[1]。相关研究表明[2]，GSTM1与头颈部癌，膀胱癌，肺癌等密切相关。本文，选取我院2009年2月――2012年2月收治的78例NPC患者作为观察组，另选取78例健康体检者作为对照组，分析GSTM1的多态性与NPC易感性的关系。报道如下。 　　1 资料及方法 　　1.1 临床资料 选取我院2009年2月――2012年2月收治的78例NPC患者作为观察组。另选取78例与观察组患者同民族，同性别，同居住地，年龄相近，无血缘关系的正常人群作为对照组。观察组中，男54例，女24例；年龄48-72岁，平均（54.1±10.8）岁；其中，腺癌7例，鳞癌71例。对照组中，男54例，女24例；年龄49-72岁，平均（54.2±10.9）岁。两组一般资料比较，P0.05，具备可比性。采集两组外周静脉血，均进行EDTA（抗凝）。 　　1.2 方法 　　1.2.1 进行流行病学的相关调查 全部调查员均接受统一培训。应用统一的调查表格。调查员逐一与研究对象面谈。具体调查内容如下：职业史，现病史，家族肿瘤史，治疗方法，饮酒史，吸烟史，既往病史，一般情况等。 　　1.2.2 提取DNA 我们应用苯酚，异戊醇，氯仿及蛋白酶K消化法提取研究对象的DNA。经光度计（紫外分光）定量后，备用。 　　1.2.3 内对照检测 我们采用DNA热循环仪（型号：PE2400）。应用PRC引物（2对）。其中1对为GSTM1的基因引物，可扩增基因外显子中4的5端至5的3端。包含内含子4在内的273bp的引物[3]。序列的上游为：5-CTGCCCTAGTTGATTGATGGG-3[4]。序列的下游为：5-CTGGATTGTAGCAGATCATGC-3[5]。另1对为内参照引物。它为350bp长的人类白蛋白基因片段。序列上游为：5-GCCCTCTGCTAACAAGTCCTAC-3。序列下游为：5-GCCCTAAAAAGAAAATCGCCAATG-3。反应体系：50μL。包括：34μL的ddH2O，5μL的PRC缓冲液，4μL的dNTPs（2mmoL/L），4μL引物（每种各1μL），1μLDNA模板（20mg）。预变性，然后加入液体石蜡和1U Taq DNA的聚合酶（华美公司）。具体反应条件：95℃预变性10min；然后，变性1min（95℃）；退火1min（55℃）；延伸2min（72℃）；循环35次；延伸8min（72℃）。然后，将反应物置于琼脂糖凝胶板（2%）上，100V，电泳30min。再进行EB染色（10min）。最后，应用透射分析仪（紫色）观察结果。以273bp片段判断GSTM1的基因型。 　　1.3 统计学处理 应用SPSS19.0统计学软件，应用x2检验