阿胶藕节天花粉等氨基酸薄层层析方法研究和改进.docVIP

阿胶藕节天花粉等氨基酸薄层层析方法研究和改进 　　[摘要] 目的 改善和提高氨基酸薄层层析的分离效果。 方法 采用盐酸﹕水（1∶1）提取，以正丙醇-36%乙酸（7∶3）为展开剂，含1%茚三酮的丙酮溶液为显色剂，105℃加热显色至斑点显色清晰。 结果 色谱斑点清晰，分离理想，各斑点Rf值适中。 结论 本方法较《中华人民共和国药典》中关于氨基酸的薄层层析的方法简单，重复性好，具有较好的可行性和实用性。 　　[关键词] 阿胶；鹿角胶；地龙；天花粉；半夏；藕节；薄层层析 　　[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2012）10（b）-0066-03 　　从2005年版《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）到2010年版《中国药典》，关于氨基酸的薄层层析效果一直很不理想，例如，阿胶中由于展开剂的极性不理想，展开剂无法上展；藕节中供试品显色不理想；展开剂正丁醇-冰醋酸-水，展开时间过长并且斑点分离不好，此外还有拖尾、重现性差等缺点。通过实验摸索累积，和对原方法的改进，笔者得出了较好的氨基酸提取和分离的方法。本文参考了文献[1-7]，采用了薄层层析方法对氨基酸进行薄层鉴别，为全面控制质量提供了依据。现以2010年版《中国药典》[8]中阿胶、鹿角胶、地龙、天花粉、半夏、藕节几味药材为例，对其进行系统阐述。报道如下： 　　1 药材与试剂 　　1.1 药材 　　阿胶（河南辅仁堂制药有限公司，批号为110801）、鹿角胶（河南老君堂制药有限公司，批号为120301）、地龙（安国国奥中药饮片有限公司，批号为120514）、天花粉（安徽国奥中药饮片有限公司，批号为100902）、半夏（安徽国奥中药饮片有限公司，批号为120201）、藕节（亳州国奥中药饮片有限公司，批号为100301）。 　　以上药材均经承德颈复康药业集团有限公司正高级工程师李云霞鉴定为合格药材。 　　1.2 试剂 　　精氨酸（批号872-200203）、丙氨酸（批号0873-9802）、缬氨酸（批号0874-9802）、赖氨酸（批号140673-200405）、亮氨酸（批号876-200204）、瓜氨酸（批号0875-200205）、甘氨酸（批号735-200102）均由中国药品生物制品检定所提供，所有化学试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 阿胶、鹿角胶、地龙（动物类药材）的薄层鉴别 　　2.1.1 《中国药典》2010版中关于阿胶、鹿角胶、地龙的薄层鉴别方法 　　按2010年版《中国药典》一部中薄层鉴别方法操作：阿胶薄层如图1，鹿角胶薄层如图2，地龙薄层如图3。 　　2.1.2 阿胶、鹿角胶、地龙薄层鉴别的改进方法 　　2.1.2.1 对照品制备：（1）分别称取甘氨酸、赖氨酸、亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、丙氨酸对照品适量，加甲醇制成每1毫升含0.5 mg的溶液。（2）称取瓜氨酸对照品适量，加甲醇制成每1毫升含2 mg的溶液。 　　2.1.2.2 供试品制备：分别取本品粉末0.2 g，置于50 mL磨口三角瓶中，加盐酸∶水（1∶1）20 mL回流提取1 h，趁热滤过，滤液蒸干。残渣加适量甲醇使之溶解，转移至25 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度。吸取1 mL，置于10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即为相应的供试品溶液。照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取相应的对照品溶液2 μL，相应的供试品溶液5～10 μL，将二者分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丙醇-36%乙酸（7∶3）为展开剂，展开，用吹风机吹干，喷以1%茚三酮的丙酮试液，105℃显色清晰。阿胶薄层如图4，鹿角胶薄层如图5，地龙薄层如图6。 　　2.2 半夏、天花粉、藕节（植物类药材）的薄层鉴别 　　2.2.1 《中国药典》2010版中半夏、天花粉、藕节的薄层鉴别方法 　　按2010年版《中华人民共和国药典》一部薄层鉴别方法操作：半夏薄层如图7，天花粉薄层如图8，藕节薄层如图9。 　　2.2.2 半夏、天花粉、藕节薄层鉴别的改进方法 　　2.2.2.1 对照品制备 见“2.1.2.1”项下对照品配制。 　　2.2.2.2 供试品配制 分别取本品粉末0.2 g，置于50 mL磨口三角瓶中，加盐酸∶水（1∶1）20 mL回流提取1 h，趁热滤过，滤液蒸干。残渣加适量甲醇使之溶解，转移至25 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度。即为相应的供试品溶液，吸取相应的对照品溶液2 μL，相应的供试品溶液5～10 μL，将二者分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丙醇-36%乙酸（7∶3）为展开剂，展开，用吹风机吹干，喷以1%茚三酮的丙酮试液，105℃显色清晰。半夏薄层如图10，天花粉薄层如图11，藕节薄层如图12。 　　3 讨论 　　3.1 氨基酸的提取