骨髓涂片常规检验和应用.docVIP

骨髓涂片常规检验和应用 　　通过骨髓细胞学检验可了解骨髓造血功能及其病理变化，是血液病诊断、鉴别诊断、疗效观察、判断预后的主要检测手段。在骨髓细胞学检查过程中，骨髓的取材、涂片、染色的质量可直接影响细胞观察和分析。骨髓取材不良，再好的检验技术也难以得到正确的诊断；骨髓涂片欠佳，则影响骨髓细胞形态的观察；骨髓涂片染色失真，则会造成骨髓细胞的误判和误诊。因此，提高骨髓取材、涂片、染色质量是骨髓细胞学检查的关键。 　　 　　1 取材[1～5] 　　 　　1.1 骨髓取材的适应证 　　凡不明原因的贫血、血小板减少、发热、多发性骨髓瘤、白血病样血象、恶病质以及肝、脾、淋巴结肿大，血涂片发现幼稚细胞、可疑细胞以及血细胞的单项或多项原因不明的增多或减少时，均可进行骨髓检查。 　　 　　1.2 骨髓取材的部位 　　成人以胸骨、髂骨、脊椎骨等扁平骨采集，一般认为胸骨采集标本最佳，髂骨和脊椎骨次之，小儿多以胸骨采集。 　　 　　1.3 骨髓穿刺 　　①选择好骨髓穿刺部位，让患者处于有利的穿刺姿势。②消毒穿刺区皮肤，解开穿刺包，戴无菌手套，检查穿刺包器械，铺无菌孔巾。③在穿刺点用1%普鲁卡因作皮肤、皮下、骨膜麻醉。④将骨髓穿刺针的固定器定在离针尖1～1.5 cm处，用左手拇指和食指将穿刺点两旁的皮肤拉紧并固定。以右手持针向骨面垂直刺入，当针头接触骨质后，将穿刺针左右转动，缓缓钻入骨质，当感到阻力减少且穿刺针已固定在骨内直立不倒时为止。⑤拔出针芯，接上无菌干燥的10 ml或20 ml注射器，适当用力抽吸，即有少量红色骨髓液进入注射器。常规检查吸取0.2 ml左右骨髓液。若抽不出骨髓液，可放回针心，稍加旋转或继续钻入少许，再行抽吸。⑥取得骨髓液后，将注射器及穿刺针迅速拔出。在穿刺位置盖以消毒纱布，按压1～2 min后，胶布固定30～40 min，并让患者静卧休息，有出血倾向者，让患者静卧到确实止血为止。固定纱布24 h后，如无异常可去除。 　　 　　1.4 骨髓取材量 　　一般骨髓常规检查时，抽取骨髓液0.2 ml。 　　 　　1.5 骨髓取材的质量标准 　　①骨髓抽吸的瞬间，患者有特异的疼痛或酸胀感；②抽取的骨髓中含有骨髓小粒或脂肪组织；③抽取的骨髓液无外周血液稀释。 　　 　　1.6 骨髓穿刺的注意事项 　　①骨髓穿刺的禁忌证：血友病和有严重出血倾向的患者禁忌穿刺。②骨髓穿刺中的并发症：常见的并发症有低血压、心律不齐、心跳停止、呼吸停止、精神紧张、哮喘发作、出血等。③骨髓干抽：骨髓穿刺后抽不出骨髓。其原因，一是表现为技术方面的因素，有穿刺深度不够、穿刺部位选择不当、针头内有组织堵塞；二是器材方面的因素，有针座与针管乳头接触不好，空针内负压降低或无负压；三是病理方面的因素，有骨髓纤维化、毛细胞白血病、再生障碍性贫血等。④骨髓液稀释：骨髓液抽取过多，造成血液混入使骨髓稀释。 　　 　　2 涂片 　　 　　2.1 骨髓液涂片的方法 　　2.1.1 骨髓液传统涂片方法骨髓液抽取后，在没有凝固之前，立即快速涂片，其特点是涂片数量和质量难以保障、骨髓液不能充分混匀、细胞分布不均匀、有核细胞和巨核细胞计数不准，无法获得一定数量符合质量要求的涂片。 　　2.1.2 骨髓液抗凝涂片法采用0.2%～0.4%的EDTA-K2抗凝剂对骨髓液抗凝后涂片，与传统的涂片方法比较，特点是骨髓液均匀一致、细胞分布均匀、标本保存时间较长。染色后涂片背景清晰，涂片数量可充分保障。 　　2.1.3 骨髓液定量涂片法取抗凝骨髓液5 μl，涂成约2 cm×3.5 cm的薄片。其特点是通过检查全片的有核细胞和巨核细胞，能定量报告每微升巨核细胞的数量，用于评估骨髓增生程度更加可靠，更能保障各涂片之间的相对一致，涂片质量最佳。 　　 　　2.2 骨髓液涂片的制备 　　①将骨髓液1滴滴于载玻片的一端；②一手持载玻片，用另一手将推玻片的一边刚好放在骨髓滴前方；③将推玻片后移到接触骨髓液为止；④让骨髓液沿推玻片边缘散开；⑤将推玻片与载玻片保持30°～45°角，平稳地向前将推玻片推到载玻片另一端；⑥涂片待干后染色。 　　 　　2.3 骨髓液涂片的质量标准 　　①厚薄均匀，有清楚的头、体、尾三部分。玻片上下留有一定距离、边缘整齐。②骨髓膜上无来回的横纹线条。③骨髓膜末端光滑，无参差不齐或线条样现象。④骨髓膜长度、厚度适中。⑤骨髓膜上无花斑现象。⑥红细胞分开排列，既无相互重叠，又不过于分散。 　　2.4 骨髓液涂片的注意事项 　　①载玻片需先用95%酒精浸泡，去掉上面的油脂和污垢，再用纱布擦干净备用，以免出现花斑现象。②拿取玻片时应手捏两端，不可触及玻面，以保持玻面干净。③做推片的玻片，边缘必须光滑，以免造成骨髓膜出现毛刺状。④推片时动