发酵生产L精氨酸的微生物育种研究-微生物学专业论文.docxVIP

山东师范大学硕士学位论文 独 创 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经 发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得 （注： 如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示 谢意。 学位论文作者签名： 导师签字： 学 位 论 文 版 权 使 用 授 权 书 本学位论文作者完全了解 山东师 范 大学 有关保留、使用学位论文的规定，有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本 人授权 山东师范大学 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解 密后适用本授权书） 学位论文作者签名： 导师签字： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 目 录 摘 要 I Abstract III 第一章 文献综述 1 HYPERLINK \l _TOC_250013 1.L-精氨酸的物理化学特性 1 HYPERLINK \l _TOC_250012 2. L-精氨酸的功能及应用 2 HYPERLINK \l _TOC_250011 2.1 L-精氨酸的功能 2 HYPERLINK \l _TOC_250010 2.1.1 L-精氨酸与生殖功能 2 HYPERLINK \l _TOC_250009 2.1.2 L-精氨酸与心血管疾病 2 HYPERLINK \l _TOC_250008 2.1.3 L-精氨酸与免疫功能 3 HYPERLINK \l _TOC_250007 2.1.4 L-精氨酸与营养生理 3 HYPERLINK \l _TOC_250006 2.2 L-精氨酸的应用 4 HYPERLINK \l _TOC_250005 2.2.1 L-精氨酸在医药方面的应用 4 氨基酸输液 4 HYPERLINK \l _TOC_250004 pH 平衡剂 4 其他精氨酸制剂 4 HYPERLINK \l _TOC_250003 2.2.2 L-精氨酸在畜牧业的应用 5 HYPERLINK \l _TOC_250002 2.2.3 L-精氨酸在食品饮料方面的应用 5 HYPERLINK \l _TOC_250001 3．L-精氨酸的制备方法 6 HYPERLINK \l _TOC_250000 4．L-精氨酸生物法生产的研究进展 6 4.1 国际上精氨酸产生菌的研究进展 7 4.1.1 传统选育技术选育生产精氨酸菌株的进展 7 4.1.2 基因工程技术选育精氨酸产生菌的进展 8 4.2 国内生产精氨酸菌株的研究进展 10 4.2.1 传统筛选技术选育生产精氨酸菌的进展10 4.2.2 基因工程技术选育精氨酸产生菌的进展12 5.L-精氨酸产生菌的代谢控制育种 14 5.1 L-精氨酸的生物合成及其调节机制 14 5.2 L-精氨酸产生菌的育种策略 16 6.本研究的立题依据、研究内容及技术路线17 6.1 立题依据 17 6.2 研究内容 17 6.3 技术路线 18 第二章 L-精氨酸产生菌的诱变育种 19 1．材料与方法19 1.1 实验材料 19 1.1.1 菌株来源 19 1.1.2 仪器设备 19 1.1.3 培养基20 牛肉膏蛋白胨培养基（NA） 20 琼脂完全培养基 20 琼脂基础培养基 20 筛选培养基 20 种子培养基 20 i 发酵培养基 20 1.1.4 主要试剂 21 1.2 实验方法 22 1.2.1 培养方法 22 种子培养 22 发酵培养 22 1.2.2 诱变方法 22 紫外线（UV）诱变 22 微波诱变 22 亚硝基胍（NTG）诱变 23 1.2.3 筛选方法 24 平板筛选 24 摇瓶筛选 24 1.2.4 分析方法 25 pH 测定 ： 25 菌体生长测定 25 发酵液中还原糖的测定： 25 L-精氨酸含量的测定： 25 2．结果与分析 27 2.1 菌体生长曲线的测定 27 2.2 诱变时间与诱变剂量的确定 27 2.2.1 紫外线 28 2.2.2 微波 28 2.2.3 NTG 30 2.3 L-精氨酸产生菌菌株选育结果 31 2.3.1 选育谱系 31 2.3.2 D-精氨酸 31 SG 32 AE 34 3．结论 35 3.1 微波诱变 L-精氨酸产生菌 35 3.2 筛选方法 35 3.3 L-精氨酸产生菌