二苯乙烯及菲类化合物的抗炎活性筛选和作用机制研究-生物学专业论文.docxVIP

独 创 性 声 明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西南科技大学或其它教育机构的学 位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在 论文中作了明确的说明并表示了谢意。 签名： 日期： 关于论文使用和授权的说明 本人完全了解西南科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留学位论文的复印件，允许该论文被查阅和借阅；学校可以公布该论文的全部或部 分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 （保密的学位论文在解密后应遵守此规定） 签名： 导师签名： 日期： 西南科技大学硕士研究生学位论文 第 I 页 摘 要 炎症是机体对诸如感染、组织损伤等有害刺激所作出的适应性反应，适度的炎 症是机体正常免疫反应的体现，有利于机体抵御病原体入侵和组织损伤，然而过度 的炎症则与自身免疫性疾病、糖尿病、心血管疾病及癌症关系密切。天然产物来源 的二苯乙烯及菲类化合物具有较好的抗炎活性，但是其构效关系和具体的作用机 制尚不清楚。 RAW267.4 小鼠腹腔巨噬细胞经细菌脂多糖（LPS）刺激后可以产生炎症反应， 基于此模型，我们评价了 20 个合成的二苯乙烯及菲类化合物对一氧化氮（NO）生 成的抑制能力，发现化合物 10、11 和 17 能够较好的抑制 LPS 刺激所致的 NO 生 成，其半数抑制浓度（IC50）分别为 37.26 μM，5.05 μM 和 20.31 μM。构效关系分 析显示二苯乙烯类化合物的 E 构型和苯环上甲氧基的存在以及与双键相连的羧基 的酯化对此类化合物的抗炎活性发挥具有重要作用。 同时，化合物 11 能够抑制诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、白细胞介素-1β（IL- 1β）和白细胞介素-6（IL-6）的 mRNA 生成，也能以剂量依赖性的方式抑制 iNOS 和 IL-6 的蛋白合成。对这些炎症因子的抑制作用表明化合物 11 具有开发成为抗炎 药物的潜能。 在对化合物 11 的抗炎机制研究中，我们发现该化合物能够抑制 p38 MAPK 和 Akt 蛋白的磷酸化，同时还能抑制 IκBα 的磷酸化以及降解，但对 ERK1/2 及 JNK 蛋白等的磷酸化没有明显影响。这些结果显示，化合物 11 能够主要通过抑制 p38 MAPK 和 NF-κB 信号通路发挥抗炎作用，也提示该化合物可作为潜在的新型抗炎 药物进行开发与利用。 关键词：菲 二苯乙烯 抗炎活性 p38 MAPK NF-κB 巨噬细胞 西南科技大学硕士研究生学位论文 第 II 页 Abstract Inflammation is an adaptive response that is triggered by noxious stimuliand conditions, such as infection and tissue injury. Controlled inflammatory response is beneficial in providing protection against infection and tissue injury, but excessive inflammatory response can lead to auto-immune diseases, diabetes, cardiovascular diseases, even cancer. Natural diphenylethene and phenanthrene derivatives are considered to be important resource for the anti-inflammatory therapeutics, but their structure-activity relationship and mechanisms are still unknown. In this study, we evaluated 20 synthesized phenanthrene analogues in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 macrophages. Compounds 10, 11 and 17 were found to inhibit the production of nitric oxide (NO) with IC50 values of 37.26 μM, 5.05 μM and 20.31 μM, respectively. Meanwhile, compound