运动生物学实验中尿液标本保存的方法的探讨.docVIP

运动生物学实验中尿液标本保存的方法的探讨 　　摘要：目的：探讨尿液标本的保存方法，为运动生物学中的应用提供理论依据。方法：采用文献资料法从中国期刊网、万方和维普等数据库中收集文献进行归纳整理后，从中挑选25篇进行综述。从尿液常规保存方法、尿液有形成分保存方法、等方面进行阐述。结果表明，对尿液标本应根据不同用途和检测物质进行不同的保存方法，各种保存方法有着其局限性，更新的尿液保存技术有待于我们的研究。 　　关键词：尿液保存;防腐剂;有形成分;24小时尿;低温保存 　　1.前言 　　人体代谢过程中产生的部分代谢产物、肾脏分泌物等都会进入尿液。因此，尿液的成分非常复杂，人体处于不同生理病理状态和环境应激条件下时，尿液的成分或浓度会有所不同。尿液保存技术的发展无疑为检验医学和生物技术的不断进步打下了基础。 　　2.尿液常规保存方法探讨 　　尿液中含有葡萄糖、蛋白质、氨基酸等多种营养成份，是一种良好的增菌液。目前的共识是，尿液保存的首要任务是抑制细菌。尿液保存的重点是抑制细菌的繁殖，同时也是尿液保存中的难点。常规尿液保存法中，包括防腐剂法、低温保存法和物理处理方法等。总的说来，常规的尿液保存方法的目的是在尿液的防腐上。 　　2.1防腐剂法 　　防腐剂法有时又称化学防腐法。人们常使用防腐剂达到不同成分防腐的目的。防腐剂的种类很多，因其本身对尿成分有影响，故应按不同的测定项目选择不同的防腐剂。一般尿液常规筛查应及时检查新鲜标本，尽量不要使用防腐剂，但在标本收集后2h之内无法进行尿液分析、尿液中所要分析的成分不稳定或作某些特殊试验需留取大量标本时可加入特定的化学防腐剂[2]。目前常用的一些化学防腐剂如下所示： 　　2.1.1甲苯、二甲苯等 　　作为一种有机溶剂，甲苯与二甲苯在尿液标本的防腐中应用非常广泛。李云霞[1]认为24h尿添加量一般为2～3ml，因其比重小，覆盖在尿液表面可防止细菌与尿液直接接触。用于尿糖、蛋白、肌酐等的测定。牟云青等[2]每100ml尿加甲苯0.5ml，因其比重小，覆盖在尿液表面，防止细菌与尿液直接接触，如尿中已有细菌存在，则不能抑制细菌生长。 　　2.1.1甲醛 　　单玉增[3]认为每100ml尿加入400g/l甲醛0.5ml可抑制细菌生长，并可固定尿中的细胞和管型，用于细胞和管型检查。由于甲醛具有还原性醛基，不适于尿糖、17-羟皮质类固醇、17-酮类固醇等化学成分检查。牟云青等[2]认为甲醛为细胞固定液，用于管型细胞防腐，用量为每100ml尿加甲醛0.3～0.5ml。甲醛具有还原性，对糖、激素等成份还适用。高佩增[4]认为福尔马林（40%甲醛溶液）可抑制细菌生长，并可固定尿中的细胞、管型等有形成份，因醛剂具有还原性，此种防腐尿不适于氧化还原法实验（如尿糖班氏定性假阳性），使用同时要防止蛋白质凝固，应先留足样本再加入适量的甲醛。 　　2.1.3酸类 　　盐酸在24h加入量为6N盐酸10～20ml，使pH保持在1～3。除盐酸除外，硼酸、冰醋酸也可。其机制是降低尿液pH，抑制细菌增长，防止香草扁酸（VMA）分解。用于VMA及代谢物侧定。单玉增[3]每升尿中约加10g硼酸，24h内可抑制细菌生长，但干扰常规筛查的pH可保护蛋白质和有形成分，有尿酸盐沉淀。用于蛋白质（白蛋白、氨基酸等）、尿酸、5-羟吲哚乙酸、羟脯氮酸、皮质醇、雌激素、类固醇等检查。浓盐酸可用于一些特殊化学方法分析并且能保存尿液中的细胞成份，有效剂量：1ml/dl尿[4]。 　　2.1.4其他方法 　　目前，许多化学防腐法用于特定的尿液标本的保存。麝香草酚（C10H14O）有百里香油似的辛香和草香香气的片状结晶。麝香草酚的杀菌作用比苯酚强，每100ml尿加入量lt;0.1g，有防腐作用，保护有形成分。常用于尿浓缩结核菌检查，干扰蛋白沉淀试验，抑制细菌和霉菌。碳酸钠在24h尿加入量为5g具有稳定剂作用主要用于尿胆原、尿卟啉的定量测定。 　　2.2物理保存法 　　物理保存法利用尿液中物质的物理性质使其长时间保存的方法。对于某些尿液标本，可以选用棕色的试剂瓶，放在避光和低温处等。低温保存法是短时间尿液标本保存的首选方法。低温中许多化学物质参与化学反应的速率降低，使得在测试前的理化性质变化对检测结果无影响或影响不大，这是低温保存法的基本原理。 　　3.尿液有形成分的保存方法探讨 　　尿液有形成分（包括血细胞、上皮细胞、管型、结晶等）的保存对于各种科学研究、检验医学和教学实验等都具有重要的意义。 　　3.1尿液有形成分的分类及保存存在的问题 　　尿液有形成分大致可分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、常见结晶、其他病理结晶、药物结晶、其它物质（黏液丝、细菌、寄生虫、精子、花粉、淀粉颗粒等）[5]。尿中有成分多达45种以上，尿液