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非洲菊茎尖离体培养技术的研究 　　摘 要：以非洲菊品种‘F53’的茎尖作为外植体进行离体培养技术研究，为建立以茎尖为外植体的非洲菊高频、高效、稳定的工厂化育苗技术体系奠定基础。结果表明，适宜于不定芽诱导的培养基为MS+6-BA2mg/L+NAA1mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖25g/L；增殖培养基为MS+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖20g/L；最适生根培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L+蔗糖15g/L。 　　关键词：非洲菊；茎尖；离体培养 　　中图分类号 S68 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2015）05-12-04 　　非洲菊（Gerbera jamesonii Bolus），别名扶郎花、大丁草、灯盏花等，属于菊科宿根多年生草本花卉，全株具细毛，叶基部簇生，具长柄，柄长15～20cm，植株挺拔，花艳丽、秀美，花大梗长，头状花序单生，花色丰富，可盆栽室内摆放，也可点缀庭院、草坪边缘、花坛等，是当今世界重要的切花种类之一[1-2]。非洲菊品种非常丰富，有单瓣和重瓣品种，有露地切花和温室栽培四季开花品种，以及供盆栽、花坛栽种的品种等[3]。 　　非洲菊为异花授粉植物，自交不孕，有性繁殖易产生分离，不能保持原品种性状的稳定性，而传统的无性分株繁殖方式，其繁殖系数较低，而且分株繁殖容易使病毒逐代积累，从而造成种性退化[4]。因此，组织培养技术是非洲菊商品化生产的主要繁殖方式，既可在短期内大量生产优良种苗，也可用于生产脱毒苗，防止种质退化[5]。目前，非洲菊组培快繁技术国内已有不少报道，大多采用的外植体是花托、花丝、花蕾等花器官以及叶柄、叶片等，而以茎尖为外植体的研究报道则较少。本试验以非洲菊品种‘F53’幼嫩的茎尖为外植体，针对其进行不定芽的诱导培养、增殖培养和生根培养研究，以期为该品种的工厂化育苗建立离体培养技术体系，也为其他非洲菊品种的组织培养技术体系的建立提供参考。 　　1 材料和方法 　　1.1 试验材料及预处理 试验材料为昆明市美兰花卉公司提供的非洲菊‘F53’品种花丝组培瓶苗。将非洲菊品种‘F53’组培苗放入恒温箱中进行预处理。首先在恒温培养箱内温度为32℃下放置2d，之后再将温度调至34℃，放置2d，再将温度调至36℃，放置2d，最后将温度调至38℃，放置2d。将预处理后的组培苗取出，在超净工作台上切取茎尖，长度为0.1～0.3cm，放于无菌水中备用。 　　1.2 试验方法 试验中的每个处理接种10瓶，每瓶2～3个材料（茎尖或不定芽苗），同一处理重复3次。不定芽诱导培养在外植体接入后第5d开始观察，记录启动材料数，以不定芽萌动生长至肉眼可见即认为材料已启动，以高度大于0.2cm的不定芽为有效芽。增殖培养从丛生芽增殖倍数、增殖芽数率和增殖芽平均增殖芽数3个方面来考察，第5天开始观察，20d后记录增殖的芽数和大于0.5cm的芽苗数。生根效果以生根率来考察，20d后记录生根苗数。 　　1.2.1 不定芽诱导培养 用MS作为基本培养基，在基本培养基中加入不同浓度的细胞分裂素和生长素（KT、6-BA、NAA），6-BA的质量浓度设为2mg/L和4mg/L，NAA的质量浓度设为0.5mg/L和1mg/L，KT的质量浓度设为0.5mg/L和1mg/L，采用3因素2水平的正交设计（表1），蔗糖均为25g/L，卡拉胶为4g/L，pH值为5.8～6.2。接种后在光照强度为1 500～2 000lx，光暗时间为16h/8h，温度为（25±2）℃的环境下培养。 　　1.2.3 生根培养 将增殖后生长健壮的不定芽苗接种于生根培养基中进行生根培养，20d后统计组培苗的生根情况。生根培养采用单因素试验设计（表3），采用MS和1/2MS作为基本培养基，分别加入激素2，4-D、6-BA、NAA、IBA，以1/2MS基本培养基作为对照，蔗糖均为15g/L，卡拉胶为4g/L，pH值为5.8～6.2。接种后在光照强度为1 500～2 000lx，光暗时间为16h/8h，温度为（25±2）℃的环境下培养。 　　2.4 炼苗与移栽 当生根后的组培苗高度达到3～5cm，根长达到2.0cm时，将组培瓶口封口膜打开，使其逐渐适应外界环境。3～5d后完全揭去封口膜，将瓶苗移到靠近窗户的试验台上，每天接受日照1.5h左右，后期逐渐延长日照时间。瓶苗生长至高度为10～15cm，且生长出5～6片叶时，移栽到腐殖土∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1的基质中，成活率可达90%以上。 　　3 结论与讨论 　　非洲菊属于世界5大切花之一，品种众多，且商品化生产已经非常普及，在当前的非洲菊组织培养快繁中，较多采用花丝、花托、花蕾以及花瓣等花器官作为外植体[1-2，6-8]。虽然采用的花器官属于较为幼态的组织，但植物体生殖