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黄精对环磷酰胺增效减毒的作用的研究 　　【摘 要】 目的：研究黄精对环磷酰胺的增效减毒作用。方法：将肉瘤S180细胞复苏，用生理盐水稀释后接种于小鼠腹腔内行细胞传代培养。7天后于无菌条件下抽取腹水，调配成浓度为1.75×107个瘤细胞/mL的细胞悬液，对40只小鼠进行肿瘤接种造模，每鼠接种0.2 mL于右腋窝下。接种24 h后称重，编号，随机将40只小鼠分为4组，分别为荷瘤组、CTX组、CTX+中剂量黄精组、CTX+高剂量黄精组。造模次日开始给药，共11天，停药次日处死，观察各组小鼠的一般状况，计算抑瘤率，脾、肾、胸腺指数。结果：黄精联合使用CTX对S180荷瘤小鼠的抑瘤率明显高于单独使用，黄精可减轻CTX对荷瘤小鼠免疫器官的毒性作用，保护荷瘤小鼠脾脏和胸腺并促其生长。结论：黄精与环磷酰胺联合用药具有增效减毒作用。 　　【关键词】 黄精 环磷酰胺 增效减毒 　　【中图分类号】 R931 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）09-0394-02 　　黄精（Rhizoma polygonati）是临床常用中药材，其味甘、性平，入脾、肾、肺经，具有补气养阴，健脾，润肺，益肾的功效[1]。Wang和Cai等[2-3]首次从黄精中分离得到一种甾体皂苷，并发现其在体外试验中对肿瘤细胞有明显的抑制作用，大量体内外实验[4-5]表明黄精多糖对小鼠H22实体瘤、S180腹水瘤的生长和增殖有显著抑制作用。张峰等[6]研究黄精多糖对H22实体瘤的生长抑制作用和对荷瘤小鼠免疫调节作用，结果发现抑瘤率最高达56.25%。现代药理学研究表明黄精具有抗肿瘤、调节免疫、保护器官、抗氧化等作用[7]。 　　本研究通过建立S180荷瘤小鼠模型，观察不同剂量的黄精水提液对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠的生活状况，抑瘤率，胸腺、脾脏指的变化，来探讨黄精对抗肿瘤药物的增效减毒作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 　　清洁级昆明小鼠，7-9周龄，雌雄各半，体重15-24g，购自河北医科大学实验动物中心（合格证号：1003008）。动物在实验前适应性驯养1周。 　　1.2 瘤株 　　小鼠S180腹水株由河北大学药学院传代保存。 　　1.3 黄精水提物的制备 　　称取黄精（由河北大学附属医院中药房提供，所有药品均经中药专家鉴定）40 g，蒸馏水浸泡2 h后，分别加8倍量、6倍量、4倍量的水煎煮3次，时间分别为药液熬开后60 min、40 min、30 min，将三次煎煮的药液混合，离心，取上清，用旋转蒸发仪低温浓缩至每毫升相当于原生药材1 g的浓度，即得黄精水提取物，即为高剂量的中药（1 g/mL），中剂量的中药加蒸馏水稀释一倍即可。水提物置4℃低温保存备用。 　　1.4 注射用环磷酰胺腹腔注射液的配制 　　购自河北大学附属医院，由山西普德药业有限公司生产（批号，0.2 g/支，临用前以生理盐水倍比稀释至2 mg/mL，放置4℃冰箱避光保存。 　　1.5 仪器 　　超级恒温水浴（山东鄄城华鲁仪器有限公司，型号：HH-601） 　　电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司，型号：AE240） 　　超净工作台（苏州安泰空气技术有限公司， 型号：SW-CJ-2FD） 　　可见分光光度计（精华科技仪器有限公司 ，型号：722） 　　倒置显微镜（南京江南永新光学有限公司） 　　台式低速离心机（北京京立离心机有限公司，型号：LD4-1.8） 　　1.6 S180瘤源小鼠的复制 　　将冻存的S180细胞取出，置37℃水浴锅中使融化，以生理盐水洗涤一次，然后低速离心，弃上清液，再用生理盐水稀释后，取0.5 mL注入小鼠腹腔内。 　　1.7 肿瘤接种造模 　　S180细胞培养7天后，选择精神状态好，腹水饱满的小鼠断颈处死，于无菌条件下消毒鼠腹，抽取癌性腹水，按1：3比例用生理盐水稀释，吹吸均匀，再以3000转离心5 min，弃上清液，再加入生理盐水调配成浓度为1.75×107个瘤细胞/mL的细胞悬液。每鼠接种0.2 mL（约含3.5×106个瘤细胞）于右腋窝下。 　　1.8 实验动物分组 　　小鼠接种瘤细胞24 h后，称重、编号，按巡回顺序法随机分4组，每组10只，各组小鼠用3%苦味酸标记，自由摄取饲料，量不限，自由饮用蒸馏水。 　　1.9 实验动物的给药方法 　　① 荷瘤组：生理盐水0.4 mL灌胃，同时约5小时后腹腔注射生理盐水0.2 mL ，1天1次，共11天；② CTX组：生理盐水0.4 mL灌胃，同时5小时后腹腔注射CTX 0.1 mL/10g（20 mg/kg）， l天1次，共11天；③ 黄精中剂量组：中剂量（10 g/kg） 黄精0.2 mL/10 g灌胃，同时约5小时