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高雄山虫草无性型的研究进展 　　摘要：高雄山虫草（??Cordyceps takaomontana??）无性型的名称历经多次变迁，现认为细脚棒束孢（??Isaria tenuipes??）是其真正的无性型。细脚棒束孢具有重要的药理、药化作用，子实体和发酵液中可分离出具有抗肿瘤、抗菌和镇静等作用的有效活性组分，基于此也产生了各种各样细脚棒束孢的培养方法和产品，笔者通过对近几年该方面的研究进行综述，以期对细脚棒束孢的研究开发工作提供参考和借鉴。?? 　　关键词：高雄山虫草； 细脚棒束孢； 细脚拟青霉； 生物活性物质； 人工培养 　　 　　 　　高雄山虫草（??Cordyceps takaomontana??）能寄生多种鳞翅目昆虫，子实体形状与蛹虫草（??C. militaris??）相似。在自然界，高雄山虫草有性型不易出现，但其无性型――细脚棒束孢（??Isaria tenuipes??）却分布较广，易于采集。无论是宏观特征，还是微观特征，细脚棒束孢与昆虫病原真菌――粉棒束孢（??Isaria farinosa??）非常相似，常互相混淆，这很不利于细脚棒束孢的科学利用和信息交换。?? 　　著名药用真菌冬虫夏草（??C. sinensi??s）一直受到国内外广大消费者的青睐，作为天然“生物制药厂”，引起了西方研究者新的兴趣［1，2］。而细脚棒束孢作为“新型冬虫夏草”在南韩和日本也取得了有特色的研究成果，其中在抗肿瘤、抗菌、清除体内自由基以及改善睡眠和抗忧郁等方面［3-8］的研究成果尤为显著。目前，细脚棒束孢的各种产品和规模化人工培养方法不断推出，备受食药用菌研究者的关注。因此，很有必要对细脚棒束孢名称变迁、分类地位、有效活性组分及生产方法作一综述，以期对虫草研究和开发者提供有益的帮助。?? 　　1 形态特征 　　 细脚棒束孢又称大孢虫花和日本虫花，其典型特征是：孢梗束基部米黄色、光滑、致密、分枝；头部棒状或珊瑚状分枝，白色或黄白色粉状。孢梗束的高度与寄主虫体的大小、覆盖物厚度和环境湿度有关，一般为10～20 mm，个别高达??50 mm??。由于细脚棒束孢头部多由珊瑚状白色的分枝和大量孢子组成，很像白色的雪花堆积，故在韩国人们也称它为“雪花冬虫夏草”［3］。它的主要培养性状及微观特征是： 25 ℃，在查氏培养基上培养14 d菌落直径达25～30 mm，菌落平展、绒毛状、灰白色，背面呈淡棕色。延长培养??14 d??产生孢梗束，基部黄色，上部白色。分生孢子梗分枝，其上着生有由3～6个瓶梗组成的轮生体。瓶梗基部拟椭圆形或球形膨大，大小4.8～20.0 μm× 1.6～3.6 μm。分生孢子长椭圆形或略弯曲的腊肠形，大小3.0～10.0 μm × 1.6～??2.8 μm??；具双细胞，大小8.0～11.0 μm × 2.0～3.2 μm，分生孢子链长［9］。?? 　　2 分类地位 　　 早在1932年和1934年，日本学者就在米饭培养基上接种细脚棒束孢，成功培养出了高雄山虫草子实体，并首次提出细脚棒束孢是高雄山虫草的真正无性型［10,11］。2005年，YOKOYAMA等［12］利用溶壁酶和聚乙二醇4000处理细脚棒束孢菌丝体后，也成功培养了具有成熟子囊壳的高雄山虫草，更进一步证明了细脚棒束孢是高雄山虫草真正的无性型。?? 　　PECK［13］于1879年首次以细脚棒束孢的名称描述了该真菌，但到了1974年，SAMSON［14］将棒束孢属的不少种移入了拟青霉属（??Paecilomyces??）中，将细脚棒束孢更名为细脚拟青霉（??P. tenuipes??）。2005年，HODGE等［15］再次重新研究了棒束孢属的历史文献，认为棒束孢属(??Isaria??)是有效的属名，随后，他们提出在拟青霉属中拟棒束孢组的拟青霉应重新归于棒束孢中。同年，LUANGSA-ARD等［16］基于分子系统学研究结果，接受和采纳了HODGE等的说法，将拟青霉属中10个有性型属于虫草的拟青霉种（包括细脚拟青霉）都归入了棒束孢属中。?? 　　3 药理药化 　　3.1??抗肿瘤作用 　　 2001年，NAM等［3］从人工培养的细脚棒束孢子实体中分离到2个具有抗癌作用的细胞毒性化合物，光谱吸收分析表明，其中1个是麦角甾醇的过氧化物――5α, 8α-环氧-24(R)-甲基胆甾-6,22-二烯-3β-醇，另1个是4β-乙酰环氧单端孢烯二醇（4β-acetoxyscirpene-3α,15-diol，AETD)。AETD对人胃癌细胞系 (SNU-1)、肝癌细胞系 (SNU-354)、直肠癌细胞系(SNU-C4) 和鼠肉瘤-180的抑制浓度（IC????50??）分别为1.2、??4.0??、2.2和1.9 mmol/L，活性比目前用于临床治