代谢酶基因遗传变异与焦炉工DNA损伤的关联性研究-劳动卫生与环境卫生学专业论文.docx

华 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 I I 代谢酶基因遗传变异与焦炉工 DNA 损伤的关联性研究 学位申请人：黄国香 导 师：邬堂春 教授 摘 要 多环芳烃 (polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs) 是焦炉逸散物 (coke oven emission，COE)中最主要且最重要的致癌成分，可导致机体 DNA 损伤，而 DNA 损 伤是焦炉工肺癌发病的主要原因。PAHs 与多环芳烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)结合，导致 AhR 空间结构发生变化，入核后诱导多种外源性化学物代谢酶的 合成，如 I 相代谢酶细胞色素 P4501A1(cytochrome P4501A1, CYP1A1)、细胞色素 P4501B1(cytochrome P4501B1, CYP1B1)、细胞色素 P4502B6(cytochrome P4502B6, CYP2B6)、细胞色素 P4502E1(cytochrome P4502E1, CYP2E1)。PAHs 必须经过代谢 酶的代谢活化之后才具有致癌性，其毒性除与本身的理化性质有关外，还与个体间 遗传变异有关。在职业流行病学癌症危险度的研究中发现，作为体内致癌物 PAHs 代谢的关键酶 CYPs，其亚家族成员 CYP1A1、CYP1B1、CYP2B6 和 CYP2E1 催化 PAHs 中重要致癌物苯并芘(benzo[a]pyrene, B[a]P) 经 CYPs 催化代谢为终产物苯并 (a)芘二氢二醇环氧化物(benzo[a]pyrene-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide, BPDE)，此终产 物可与 DNA 和血浆中的白蛋白形成共价加合物，导致 DNA 的损伤。据我们所知， 目前国内外研究均采用 1-OHP 作为 PAHs 职业暴露标志物，由于 1-OHP 生物半衰 期比较短，只能反映短期内的 PAHs 的暴露水平，且绝大部分经尿液排出，参与 DNA 损伤的量极少，因此存在局限性。血浆 BPDE-白蛋白加合物在血中含量较高，生物 半衰期较长，可反映 PAHs 长期暴露水平，尽管血浆 BPDE-白蛋白加合物在焦炉工 人中的应用已有报道，但还未见有关研究其作为 PAHs 暴露标志物的报道，因此， 本研究试图通过代谢酶与焦炉工血浆 BPDE-白蛋白加合物及 DNA 损伤的关联研究， II II 探讨焦炉工血浆 BPDE-白蛋白加合物作为 PAHs 暴露标志物的可行性，以及在遗传 学的基础上找到与焦炉工 PAHs 暴露与癌症风险的潜在敏感因素，为焦炉作业工人 的职业暴露危害防治提供科学依据。本研究共分以下三个部分： 第一部分 研究对象基本情况 采用职业流行病学调查方法，选取 202 例男性焦炉工人作为暴露组，96 例来自 同一工厂的男性机关管理人员以及医务人员作为对照组。通过问卷调查获得研究人 群的一般资料，如年龄、工龄、吸烟及饮酒等。采用反相高效液相色潽法(reverse phase-high performance liquid chromatography, RP-HPLC)测定血浆中 BPDE-白蛋白 加合物水平以及碱性单细胞凝胶电泳实验检测彗星尾距(Olive Tail Moment, OTM)。 结果显示，两组研究人群在年龄、工龄、吸烟及饮酒方面没有显著性差异(P0.05)。 焦炉作业工人血浆 BPDE-白蛋白加合物水平(经自然对数转换后)，在暴露组为 (3.55( 2.37-4.11 ))显著高于对照组(3.06(1.47-2.85))，差异有显著性意义(P0.01)；外 周血淋巴细胞 OTM 值(经自然对数转换后)，在暴露组为(1.25±1.09)显著高于对照 组(0.55±0.93)，差异有显著性意义(P0.01)。本部分结果提示焦炉工人中 PAHs 暴 露标志物血浆 BPDE-白蛋白加合物水平以及外周血淋巴细胞 OTM 值与对照组比较 具有显著性差异。 第二部分 代谢酶基因多态性与血浆 BPDE-白蛋白加合物的关联性 研究 焦炉工血浆 BPDE-白蛋白加合物具有化学特性，因此其形成可能受诸多因素如 PAHs 外环境暴露水平、体内代谢酶的作用、以及吸烟、饮酒、饮食和生活方式等 的影响。本部分通过对影响焦炉工血浆 BPDE-白蛋白加合物形成的因素、代谢酶基 因多态性与血浆中 BPDE-白蛋白加合物水平的关联研究，探讨焦炉工血浆 BPDE- PAGE IV PAGE IV 白蛋白加合物作为 PAHs 的暴露标志物的可行性。根据国际人类基因组单体型图计 划(International HapMap project, HapMap)数据库挑选了 I 相代谢酶中 4 个关键