肝细胞抗原在Barrett食管、反流性食管炎和食管腺癌的表达和临床意义-内科学(消化系病)专业论文.docxVIP

贵阳 贵阳医学院 2014 届硕士研究生学位论文 PAGE PAGE 10 肝细胞抗原在 Barrett 食管、反流性食管炎和食管腺癌的表达 及临床意义 专业：内科学（消化系病）研究生：许红 导师：张永宏教授 【摘要】目的 探讨肝细胞抗原在Barrett食管、反流性食管炎和食管腺癌的 表达和临床意义。方法 采用免疫组化EnVision法，检测肝细胞抗原在正常食管 粘膜组织10例、反流性食管炎12例、Barrett食管28例、食管腺癌5例中的表达及 在轻度、中度、重度肠化生型Barrett食管中阳性率。结果 正常食管粘膜组织10 例中，阳性率20.0%。反流性食管炎12例，阳性率16.7%。 Barrett食管28例 Barrett食管，阳性率39.2%，其中轻度肠化16例阳性率25%，中度肠化5例阳性率 60%，重度肠化4例Barrett食管阳性率100%；伴有异型增生Barrett食管3例为阴 性表达。食管腺癌5例阳性率60%。结论 随着肠化生程度的加重，肝细胞抗原表 达的阳性率也随之升高。肝细胞抗原有望成为BE肠上皮化生的生物学标志物。对 BE的诊断、防治及预后判断有一定的临床价值。 【关键词】Barrett食管；肠化生；反流性食管炎；食管腺癌；肝细胞抗原 前 言 近年来 Barrett食管（BE）及食管腺癌的发病率逐年升高，Pera等[1]报道食 管原发性腺癌约50%源自BE，食管下段食管腺癌起源于肠上皮化生的腺上皮[2]， 从组织学上已经明确了Barrett食管-不典型增生-腺癌的发展顺序。且确诊后的食 管腺癌预后较差，有报道显示如能早期诊断则5年生存率可达83%-90%，而晚期5 年生存率则只能达到10-15%[3]。目前研究认为BE的主要临床意义是其与食管腺癌 的关系。BE标志物作为一种量化的指标对组织学诊断，可提供有力的帮助, 并使 随访成本大为降低, 但目前的研究均较分散, 尚缺乏成熟的结论和一致的见解。 肝细胞抗原(hepatocyte antigen,Hep)是肝细胞线粒体膜的一种成分,由于其 在正常和肿瘤性肝组织中的表达具有高度的敏感性和特异性,曾被认为是诊断原 发性肝细胞癌以及肝内转移性癌一个重要的鉴别诊断指标。然而在以后的研究中 发现，Hep不仅在肝细胞癌及肝内转移性癌中表达；在胆管癌、宫颈癌、乳腺癌、 结肠癌及胃癌等其他类型的肿瘤中也有表达，并且发现其表达与肿瘤的生物学行 为有关。那么Hep在Barrett食管中的敏感性及特异性如何，是否具有潜在标志物 的价值，成为此次研究的主要目的。 1 材料 1.1 病例与标本 材料与方法 本研究中所有组织切片均取自 2009 年至 2013 年于我院行胃镜检查的病例， 诊断经病理活检证实。其中 Barrett 食管 28 例，反流性食管炎 12 例，食管腺癌 5 例，正常食管黏膜 10 例作为对照组。28 例 Barrett 食管中，男性 16 例，女性 12 例，平均年龄 54 岁。反流性食管炎 12 例，男性 10 例，女性 2 例，平均年龄 50 岁。食管腺癌 5 例，男性 3 例，女性 2 例，平均年龄 68 岁。正常食管粘膜组织 10 例中，男性,5 例，女性 5 例，平均年龄 59 岁。 1.2 诊断标准 Barrett 食管定义为食管下段的复层鳞状上皮被化生的单层柱状上皮所替代 的一种病理现象，可伴有肠化或不伴有肠化。其中伴有肠上皮化生者属于食管腺 癌的癌前病变[4]。经病理活检证实。 反流性食管炎定义为由于胃和（或）十二指肠内容物反流至食管而引起的食 管黏膜组织损害。依据 1994 年制定洛杉矶分级：A 级：一条或一条以上黏膜破 损，长度≤5mm；B 级：一条或一条以上黏膜破损，长度≥5mm ；C 级：两条或 两条以上黏膜破损，有融合但周径＜75%；D 级：两条或两条以上黏膜破损，有 融合且周径＞75%[5]。经病理活检证实。 1.3 组织病理学检查 采用免疫组化EnVision法，将制好的组织切片, 经二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱 水后行免疫组化染色。抗原修复采用高温高压修复, 余操作步骤按试剂盒说明书 进行。经DAB显色, 苏木精复染, 中性树胶封固, 在显微镜下观察。以原发性 肝细胞癌为阳性对照, 以PBS代替一抗作阴性对照。试验所用鼠抗人单克隆抗体 Hep (OCH1E)和免疫组化试剂盒购于上海基因公司。 1.4结果判定 肝细胞抗原（Hep）阳性表达是上皮细胞胞质内出现棕黄色颗粒沉着为阳性。 当着色细胞比例5%时判断为Hep的阳性表达，阴性表达≤5%。 1.5统计学分析 应用SPSS 19.0统计软件，阳性率以百分比（%）表示，各组间阳性率的比较 采用?2检验，以P0.05为差异有统计学意义。 结 果 1 肝细胞抗原在食管各个疾病中的